I. Société de biologie, i^(év

a. Comptes rendus Académie des sciences, a8 oct. 191a.

Malm (de Christiania) * constate que le bacille tuberculeux refuse de se développer dans les milieux privés de phosphore et que la présence d'une petite quantité de silicate de potasse est très favorable. Dans les liquides privés d'albumine, le bacille en fabrique et la tuberculine qu'on en obtient peut en être séparée par précipitation par l'alcool sous forme d'une poudre blanche, toxique pour les animaux tuberculeux. Le filtrat alcoolique ne contient pas d'albumine et n'est pas toxique. C'est donc dans la substance de nature albuminoïde formée par lé bacille que se trouve la tuberculine. Celle-ci, d'après Malm, serait surtout un produit d'échange du bacille tuberculeux et non un extrait de son pi*otoplasma.

Avec les milieux artificiels privés d'albumine et qui contiennent de l'asparagine, de la glycérine et i p. loo de mannite ou de dextrose par exemple, Kendall, Day et Walker ^ ont établi que le bacille tuberculeux construit les éléments azotés qui entrent dans sa con^itution aux dépens de l'asparagine et les graisses et cires aux dépens de la glycérine et des sucres. Il sécrète une lipase qui dédouble le butyrate d'éthyle et, quoique faiblement, l'huile de ricin. Celte lipase se retrouve aussi dans les cultures d'autres bacilles acido-résislants, dans celles de bacilles tuberculeux bovins, aviaires, dans celles des bacilles paratuberculeux de la peau, du smegma, de la fléole, etc. . . On peut constater sa présence même dans le filtrat des cultures. Elle est thermostabile et d'autant plus abondante que la culture est plus développée ; mais après avoir atteint un maximum elle diminue, puis disparaît. Les vieilles cultures n'en contiennent plus.

Lorsqu'on ne se propose pas d'étudier les produits de sécrétion du bacille et qu'on cherche seulement à le cultiver en partant d'organes tuberculeux, il est toujours préférable de se servir de sérum coagulé glycérine ou de pommes de terre glycérinées. On utilisera aussi commodément, dans certains cas, le milieu à l'œuf de poule, deDoRSET^, que l'on prépare de la manière que nous allons indiquer.

c) Cultures sur milieux à Vœut de poule.

Des œufs de poule sont soigneusement lavés et brossés dans Teau bouillie, puis immergés pendant quelques minutes. dans une solution phéniquéeà 5 p. loo. On les saisitentre deux feuillets de papier buvard stérile, on flambe leurs deux pôles et, avec une pince pointue flaml>ée, on pratique sur chacun de ces pôles une ouverture. Au moyen d'un tube de caoutchouc portant un filtre à coton stérilisé, on souflle par l'ouverture supérieure correspondant à la chambre à air, de telle sorte que le contenu de l'œuf tombe dans un malras A'Erlenmayer stérile et préalablement taré. On introduit ensuite dans le matras une quantité

I. Ceitralbl. f.Bakt , 4 août igiS, vol. L\X, p i^r. a. Joarn. of Inf. diseases, 1914, vol. \V, p. 417 à 4O7. S. Journ. of Amertcan Mcdicine^ 1902, p. 555.

d'eau correspondant à lo p. loo du poids d'œufet on agite pour assurer le mélange homogène du jaune, du blanc et de l'eau, sans faire de bulles d*air. On jette ensuite le tout dans un entonnoir portant une tarlatane stérile et on répartit aseptiquement la masse filtrée dans des tubes à essai. On coagule au thermostat à 70"* pendant 2 heures, en po silion inclinée, et on porte les tubes àTétuve à 37*" pendant trois jours, afin de rejeter ceux qui seraient contaminés. On les obture finalement avec des capuchons de caoutchouc et on les conserve en position verticale jusqu'au moment de leur emploi.

LuBErtAu * préconise également ce milieu de culture, dont il modifie la préparation en additionnant le contenu de chaque œuf de 3o p. 100 de son poids de bouillon alcalin glycérine à 5 p. 100.

L'emploi de l'œuf pour la culture du bacille tuberculeux avait été déjà proposé en 1896 par Capaldi. Bezaî<îçon et Griffon 2 utilisent le jaune seulement, qu'ils incorporent à l'état cru à la gélose glycérinée dans la proportion de i p. de jaune pour 2 p. de gélose. Sur ce milieu les bacilles d'origine humaine poussent rapidement en colonies humides et grasses, au lieu d'être sèches et écailleuses comme sur le sérum glycérine ou la gélose glycérinée ordinaire.

Besredka ^, avec la collaboration de F. Jupille, a fait l'étude très intéressante d'un milieu mixte constitué par 100 gr. de bouillon de viande sans peptone, auquel on ajoute à froid un mélange de 20 centimètres cubes d'émulsion de blanc d'œuf à i p. 10 et 5 à 20 centimètres cubes d'une autre émulsion de jaune d'œuf à i p. 10, préalablement filtrées et stérilisées chacune à part à ii5° pendant 20 minutes.

Sur ce milieu liquide (mais qu'on peut, si on le désire, solidifier par addition de i p. 100 de gélose), privé de glycérine et de sels, on obtient d'emblée, en projondeur, des cultures aussi abondantes que celles d'un streptocoque en bouillon. Au bout de deux ou trois semaines, elles forment une membrane blanchâtre qui tapisse complètement le fond du vase, et quelques secousses suffisent pour transformer celte membrane en une fine poussière. Les bacilles bovins prennent dans ce liquide un aspect particulier de filaments glaireux, collant aux parois, de consistance muco-membraneuse, tandis que les bacilles d'origine humaine produisent, au bout de 4 à 6 semaines, de petites écailles non adhérentes au verre.

L'odeur si caractéristique que développent les bacilles tuberculeux dans les milieux ordinaires fait complètement défaut dans ce milieu de Besredka, et pourtant il s'y élabore une tuberculine très active, car après trois à quatre semaines de séjour à Tétuve à 38% i ce, 5 à 2 ce. du