I. — NATURE ET FONCTIONS DE L'INHlBITRICE

On sait que certains sérums de sujets tuberculeux et que les sérums d'animaux hyperimmuns fournissent un précipité au contact de la tuberculine (Calmette et E Massol) ^ H était indiqué de rechercher si cette réaction de précipitation intervenait en quelque manière dans le phénomène d*inhibition.

Pour séparer du sérum inhibant les substances précipitables par la tuberculine, il sufiBt de faire un mélange dans le rapport de i cent, cube de sérum pour o ce. 126 d*extrait bacillaire aqueux B*. On laisse en coAtact deux heures à l'éluve et dix-huit heures à la glacière, puis on centrifuge pour séparer le précipité. Le liquide surnageant, additionné d'une nouvelle dose d'extrait bacillaire, ne donne plus aucun louche. Pourtant il conserve sensiblement la moitié de ses propriétés inhibantes.

Un résultat encore plus net s*obtient si l'on traite lé sérum inhibant, par une tuberculine non antigène (précipitée par l'alcool), ou encore par la malléine qui fournit également un précipité. Le liquide, débarrassé du précipité, conserve presque intégralement sa propriété inhibante.

Il faut donc admettre que la précipitation du sérum par l'antigène ne joue aucun rôle dans la réaction d'inhibition.

Rappelons d'ailleurs que le sérum dit antituberculeux ^le Ruppel et RiCKMAiiif, par exemple, très rirhe en anticorps, fournit un précipité abondant avec les diverses tuberculines. Il ne possède cependant aucun pouvoir inhibant.

D'autres expériences nous ont montré qu'un sérum inhibant non chauflfé, privé d'alexine par vieillissement, perd, par trois heures de

1. Comptes rendus Académie des sciences, 8 dot. 1909 et t5 jsiL 1910.

chauffage à 58 degrés, environ 33 p. loo de Tinhibitrice qu'il contenait. Ce même sérum, mélangé après chauffage à Textrait bacillaire, ne fournît plus que 3i p. lOO du précipité qu'on pouvait en séparer par centrifugalion lorsqu'il était mélangé, non chauffé, à Tantlgène.

La précipitation par l'eau distillée (avec isotonisation subséquenle) conduit à un résultat moins net : on n'obtient plus, par l'extrait bacillaire, que 4 2 p. lOO du précipité que fournit le sérum normal et 5o p, ICO de l'inhibitrice contenue dans le. sérum non traité.

Une partie de l'inhibitrice est donc entraînée par les précipités produits dans un sérum inhibant.

On pouvait encore se demander si la réaction d'inhibition ne résultait pas de la présence dans le sérum d'un excès d'anticorps.

Or, le sérum de Ruppel et Rickmanx, le plus riche «n anticorps que nous ayons eu entre les mains, n'est jamais inhibant, quelle que soit la dose qu'on fasse intervenir en présence d'une même quantité d'antigène. Et d'autre part on constate, comme nous l'avons déjà dit, que les sérums inhibants ne libèrent les anticorps qu'ils renferment à côté de l'inhibitrice, quelque minime que soit la dose à laquelle on les emploie, que lorsqu'on les met en présence d'une dose élevée (environ trois foîs^upérieure à celle qu'exige le sérum de Ruppel et Rickmann), d'un antigène approprié, tel que notre antigène peptoné B^. C'est donc que la fixation de l'alexine ne peut se produire, par l'effet des anticorps sur l'antigène, que lorsque toute la substance inhibante a été saturée par cet antigène.

L'action combinée de la dilution par l'eau distillée et d'un courant d'anhydride carbonique [méthode de Liefmann) sur un sérum inhibant peut d'ailleurs nous permettre de séparer l'inhibitrice des anticorps (Calmette et Massol) * :

Dans un sérum de bovidé inhibant inactivé à 58 degrés, dilué avec neuf volumes d'eau distillée, nous faisons passer un courant d'anhydride carbonique. Après un repos de deux heures et centrifugatlon, on décante le liquide qu'on isotonise. On reprend par l'eau salée physiologique l'abondant précipité formé.

Voici les poids de précipité sec que fournissent divers sérums à. la dosé de i cent, cube ;

Sérum de bovidé inhibant O gr. oaaS

Sérum de bovidé sain o gr- 00875

Sérum de B appel et Bickmann .......... ogr. oi25

Sérum antivenimeux o gr. 008

Sérum de cheval agglutinant le bacille typhique. o gr. 009

Sérum d'homme sain o gr. oo5

Sérum de cobaye sain ^8^» 00375

I, Comptes rendus de la société de.biohgie, a6 jiiil. iQiS.

LES t ANTICORPS » TUBERCULEUX 501

Le sérum de bovidé inhibant précipite donc beaucoup plus que le sérum d'un bovidé sain.

D'autres expériences nous ont permis de rechercher les pouvoirs inhibants du liquide, du précipité, du mélange reconstituant le sérum initial et de les comparer au pouvoir inhibant de ce dernier. On constate ainsi que le liquide décanté ne possède pas de pouvoir inhibant ; le précipité au contraire se montre aussi actif que le sérum dont il provient. Le précipité du sérum de Ruppel et Rickmann, ou d'un sérum de bovidé sain, n'atténue pas la fixation. La réaction est donc spécifique.

La recherche des anticorps dans les diverses fractions du sérum fournit un résultat négatif avec l'antigène B*. Avec l'antigène B^ (extrait bacillaire peptoné) on constate que le précipité retient de faibles traces d'anticorps ; au contraire le liquide décanté, même employé en grand excès, donne une fixation très nette qui ne s'atténue pas : il n'est donc pas inhibant. Pour faire réapparaître Tinhibition, il suffit d'incorporer le précipité au liquide décanté.

De plus, si l'on fait une réaction de fixation avec l'antigène B^ et du liquide décanté, ou du sérum initial, on observe que, pour obtenir un^ déviation égale avec le liquide décanté, il faut environ trois fois moins d'antigène qu'avec le sérum (caractère distinctif des sérums à anticorps non inhibants et des sérums inhibants).

Ajoutons que les précipitines se retrouvent avec l'inhibitrice dans le précipité, tandis que les agglutinines restent avec les anticorps dans le liquide décanté. L'inhibitrice est donc bien distincte des anticorps. Ces derniers sont aussi, par suite, distincts des précipitines. {Voir chap, XXX, F.)

Gomment expliquer la formation de cette substance inhibante dans le sérum des animaux hyperiramuns et son absence habituelle dans le sang des tuberculeux ?

Nous ne pouvons formuler à cet égard qu'une hypothèse : c'est que chez les animaux qu'on immunise au moyen d'injections intraveineuses massives de bacilles tuberculeux plus ou moins modifiés ou virulents, ces bacilles, se trouvant immédiatement sensibilisés par une surabondance d'anticorps, provoquent un enrichissement du sang en globulines (ainsi qu'on le constate d'ailleurs par ce fait que le sérum, même chauffé à 58 degrés, forme un important précipité de globulines lorsqu'on le traite par barbotage d'acide carbonique (méthode de Liefmann). Or, ces globulines, qui contiennent l'inhibitrice, comme nous l'avons montré, ont la propriété d'empêcher la fixation de l'alexine sur les antigènes sensibilisés et de s'opposer même à l'agglutination.

Nous avons vu précédemment {Chap, XXXV, C) que, d'après les

travaux de E. Friedbbrger et E. GoLoscHAiiDT ^» G. SatBATAïui, eCc., les bacilles tuberculeux, mis en contact in vitro avec du sérum frais de cobaye, peuvent fournir après ceutrifugation une réaction dite etnaphylatoxique par injection intraveineuse chez le cobaye sam.

F. Nbupbld et H. Dold ^ sont parvenus au nième résultat en injectant à une série de cobi^yes, du poids de 20a gramme» environ, quelques milligrammes de bacilles de souche humaine ou bovine, par voie intraveineuse. Pour -une partie de ces animaux (tes autre» restant Gomme témoins) les bacilles avaient été préalablement sensibilisés par contact de 24 heures, à la glacière ou à Tétuve^ avec un sérum spéciGcpie (sérum de chèvres immunisées par les auteurs ou sérum de Rvppell et RiCKMANN, préparé à Hôsght), et mis ensuite en {présence de sérum frais de cobaye pendant 24 heures. Dans 9 cas, ils ont cru isoler ainsi, des bacilles traités, une toxine tuant le cobaye en 2 à 5 minutes. Tous les résultats positifs ont été obtenus avec des bacilles sensibilisés à la glacière et ayant macéré ensuite à l'étuve en présence de Talexine fraîche. En aucun cas, les bacilles simplement sensibilisés par le sérum spédCque n'ont donné de réaction anaphy la toxique.

Dans Thypothèse que Tinjection de bacilles dans les veines d* animaux sensibilisés par des injections antérieures produit une anaphy la-inéoxication (l'on a déjà vu des accidents mortels au cours des immunisations par injections intraveineuses, évitables souvent par le procédé des vaccinations subintrantes de Besredka), on pourrait supposer que r a inhibitrice )», qui s'oppose à la fixation de l'alexine, concourt ainsi à empêcher la réaction anaphylatoxique, laquelle est liée à la baisse du pouvoir alexique(J. Boroet, MuTEàMiLCu). Il est bon de faire remarquer que nous n'avons pas pu faire la preuve de ce fait par une expérience directe, car le sérum inhibant de bovidé dont nous disposons est toxique pour le cobaye à une dose pour laquelle l'inhibition est insuffisamment marquée. Nous pensons toutefois que les inhibilrices exercent dans l'organisme une action protectrice ou défensive au regard des injections intraveineuses et des infections bacillaires massives. Cette opinion semble justifiée par le fait que, si l'on cesse d'injecter des bacilles aux animaux hyperimmuns, on constate un abaissement du pouvoir inhibant de leur sérum.

K. — RECHERCHE DES ANTICORPS DANS LES EXTRAITS D'ORGANES ET LES EXSUDATS TUBERCULEUX.

De même que les antitoxines sont élaborées principalement par les leucocytes, ainsi que l'ont établi les travaux de Metch.nikoff et de ses élèves, il semble bien que ces cellules et les organes qui président à

I. ZeUschf. Immnnil., 191 1. vol. IX, p. 869 et suit. a. Ar6. a,d. KK. Ge$tindli.\ nov. 1911.

LES « ANTICORPS » TUBEltCULEUX 503

leur formelion, tels qoefe» gangH«>n9 ïymphalirpiw, la modle osseiwe ©t la rate, soient tes principaux organes d'élaboraHon des anticorps foberctïl^nY. On doit donc s'attendre à les y retrouver en abondance, et cest ce- <}ue la réaction' de ftxation de BoRDET-GErrcoir permet de démontrer.

EmeriATO • tes a» décelés aisément dan« les ga-nglionsr scroftrFetrx et tnbercufenx en se servant d^émulsron» de bacilles, d'extraits bacillaires on de hiberenline comme awligènes, et P. Paraskeropoulos^ montre qii*on' en tronre en pTu5 grande quantité dans k* exsuda ts séro-fibrineux provenant des pleurésies aiguës que dans le sérum des mêmes malades, si l'on prend soin d'éRraîncr d'abord par centrîfugafîon les bacrFles que renferment ces exsuda ts.

Enfin L. Kaitwackï et Czeslas Otto ^\ en s'adressant aux crachats de tuberculeux pulmonaires, ont également pu y mettre en éridenoe des anticorps, alors même que ces crachats renfermaient déjà des bacille». Les anticorps s'y trouvaient donc en excès.

I TRAMSItlSSIOlt HÉRéDrTADRE DES AimCORFe TUKReunLEinC.

On sait, d'après les travaux dé Theobald Smith, de J. Rosenau et J.-F. Aj«derso5, que les jeunes cobayes issus de mères sensibilisées au sérum de cheval, gardent pendant plusieurs semaines après leur naissance un certain degré dTiypersensibililé vis à vis de ce même sérum. On peut donc se demander si, dans l'infection tuberculeuse, les anticorps paâseAt. dt la mère ai» ie&ius. Des reekevehes ont' été faites à ce sujet pai* phjfikurs expérimestsaleurs.

J. Parisot et Hanns * ont fait l'autopsie d'une femme enceinte qui SttCCQcaba à uu& tuberculose cavîlaire pendant le huitième mois de sa grossesse. Â-pcè» la morl on percevait encore leï? baUemenls du cœur de Teoiant qui fut ejfctrait par operaliooi césarie&oe, mais ne sutvécut qu'une demi-beure. Le placenta H>aternel et fœtale le foie ^ la vate, les capsules surrénales, furent recueillis asepiiquemeiLC. Les examens bistologiques a'y décelèrent ni tubercules, ni bacilles de Koca. L'inoculation au cobaye resta négative. Mais la réaction de fioRDUT-GENGOU se montra positive avec le sang de la mère et avec celui de l'enfaafit.

Expérimentatement, ScMB?fGK ^ avail obtenu un résultat ideutique avec le sang de deux jeunes cobayes issus d'une mère tuberculisée, puis traitée par clesrinjectioas cpoiflsaDtes d'émulsions de bacilles. Par contre Fbdbu^ écbottai complètement en recherchant les anticorps dans le

I. Centralbl, f. Bakl., 21 janv. 191 1. 3. Société de biologie^ 8 avril 191 1.