PROCÉDÉS BASÉS SUR LA MISE EN LIBERTÉ DU PIGMENT

| 1° Procédé Salkowski. — (1) Il consiste simple- ment à agiter 50-100 cme. d'urine avec une partie 2 égale d’éther pur. On sépare l'extrait éthéré et on ajoute quelques eme. d'alcool. La solution est jaune Phavec: fluorescence verte. Il faut contrôler au spectroscope. On peut agir de la même façon après avoir oxydé l’urine par le persulfate d’ammoniaque. Ainsi lon se rend compte des quantités respectives de chromogène et d’urobiline. Au lieu d’éther sulfurique, je n'ai qu'à me louer de l'emploi de l’éther lacétique qui est un meilleur dissolvant de l’uro- , biline. | 2 Procédé Grimbert. — (2) Ce procédé commode, est souvent employé en clinique, mais il peut conduire à des erreurs: aussi doit-il toujours être - contrôlé par l'examen spectroscopique. Il consiste à additionner l'urine d’un volume égal (un tiers suffit cependant) d’acide chlorhydrique et à chauffer jusqu'au voisinage du point d’ébullition. C'est là la partie délicate : En chauffant trop on détruit

QT) Démonstr. v. præformirst Urobilin in Harn. Ze tsch. f. phys. ch. Bd. IV 1888.

(2) Journal de-Pharme. et Chimie 1888.

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l’urobiline, en chauffant trop iéntément - on forme. d’autres pigriénts (indirubine, ete.) (L). On refroidit rapidement, puis on agite lentement l’urine avec un peu d’éther, de chloroforme, ou d’alcool amylique qui recueille le pigment. La solution est verdâtre

et fluorescente. Elle doit être examinée au spectroscope. On le voit c'est le même procédé que celui qu’on emploie pour la recherche des pigments de la série indoxylique [indirubine, etc]: par conséquent ceux-ci viennent vicier la réaction. D'autre part l'emploi de l'acide chlorhydrique est- sujet à caution. Ne forme-t-on pas ainsi de l’urobiline qui n’existe pas ? | ë Ve Enfin s’il est nécessaire de contrôler au spectroscope, à quoi bon cette réaction, puisque cet instru ment nous fournit une méthode autrement sûre et rapide de reconnaitre la présence du pigment? Procédé Méhu. — (2) On isole l’urobiline en la précipitant par le sulfate d'ammoniaque. On filtre 100 eme. d'urine; on les additionne de 2 à 3 gouttes d'acide sulfurique, puis de sulfate d'ammoniaque à saturation, c'est-à-dire de facon qu'il reste un petit excès de sel non dissous. On agite vivement le” mélange, puis après une ou deux heures de repos, : + on jette sur un filtre sans pli; on lave ce dépôt avec une solution de sulfate d'ammoniaque acidu-

lée à l’acide sulfurique; on essore le filtre entre

(1) Voir Maillard, Soc. Biol. 6 juin 4908, etc. (2) Méhu Journ. Phys. et Chimie 1878, t. XXVIIL.

| des doibles feuilles dé papiér: à filtré, puis on n fait diffé:

: rer à chaud (40°-500) avét de l'alcool à 95° légèrement À ‘ammoniacäl. L'alcool évaporé à une température . peu élevée abätidonnera l'urobiline. On la caracà térisera encore par le spectroscope ét la pététtén: avec les sels dé zific: La précipitation dé la globuline par le ifate d’ OA A vient gênér datis À les urines albumineuses. Ce n'est d’ ailleurs à qu'un | | procédé de laboratoire rs obtenir l'urobiline.

Rs oUies 2eme. de la solution de sulfate de cuivré : saturée à. froid, puis du sulfate d’ammoniaque

Lx cristallisé jusqu’ à saturation, enfin 10 éme. de chlo-

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employée d'ailleurs.

roforme ; on agite quelques minutes, le chloroforitie

se colore en rouge ; on le sépare. Par comparäiz son avec des solutions graduées d’avaricé on peut juger d'aprés l'intensité dé la coloration, de la proportion d'urobiline (?). L'impossibilité de con-

server des solutions titrées d’urobiliné nous paraît

devoir faire rejeter cetté méthode qui n’est ie

Procédé Mac Munn. — (2) be est filtrée sur

de l’acétate et dû sous acétate de plomb. Le pré- cipité est traité par un mélange d alcool rectifié 68 avec acide sulfurique 12 parties.

La solution est ensuite diluée avec de l’eau distil-

lée, puis agitée avec du chloroforme qui dissout le

(1) D'après Hénocque, Spectroscopie biologique. (1) Researches into the colouring matters of urin with an account of the separation 6f urobilin. Proceding ôf thé King Soc. Lord. 1880,

d’un LME robinet, ie pour ie de pigment -

ji suflit de l’ évaporer à la température ordinaire. tite Procédé Léo (1). — D’après cet auteur la recherche À ‘à de l’urobiline peut se faire plus simplement en l'extrayant de la ue de plomb au moyen de l'alcool ammoniacal : are rare rier | Alcool, 10 1 VMS Ammoniaque, 2. emÿ. - | Fu. à cet effet 150 à 200 cme. d'urine sont précipités par l’acétate basique de plomb, jusqu'à ce que le liquide . filtré ait perdu sa coloration ] jaune. “bé pigment ré- colté est lavé rapidement dans l’eau distillée j jusqu’ ‘ait | ce qu'on ait obtenu une réaction négative avec P acide À us On filtre enfin avec 8 à 10 eme d'alcool LA NES solu. La laque lavée est traitée par 10 à 12 cme. d’al- ; cool ammoniacal. Cette solution alcoolique est con- HA centrée au bain marie. Où: verse dans le tube qui le contient du chlorure de zinc ammoniacal dilué, et il ue une fluorescence verte. Avec l'acide sulfurique = Je liquide devient rose, l'alcool amylique prend la