VII. IDENTIFICATION DES ESPÈCES PRÉSENTES DANS LES CULTURES OBTENUES

Il peul arriver que l'examen direct, les épreuves d'agglutination et l'inoculation expérimentale ne donnent pas d'indications bactériologiques suffisamment précises. Il faut alors étudier

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rapidement les premières cultures obtenues, soit en gélose profonde, soit en bouillon chauffé on non chauffé.

A. Cultures en gélose. — Les caractères des colonies en gélose profonde donnent des renseignements intéressants. Mais nous savons combien sont variables les formes des colonies en gélose profonde pour une espèce donnée. Il arrive souvent qu'une seule et même espèce soit représentée par des colonies d'aspects différents et que, au surplus, plusieurs espèces poussent en donnant en gélose profonde des colonies morphologiquement presque identiques.

C'est ainsi que nous avons insisté au début de nos recherches sur une forme de colonie, que nous avons désignée sous le nom de « coeur jaune », et dont nous n'avons pu dire, à l'époque, si elle appartenait à une ou à plusieurs espèces microbiennes. Depuis, nous avons pu reconnaître qu'il s'agissait d'un aspect banal, habituel pour le />'. fallax et le B. aerofœtidus, et que nous avons observé aussi pour quelques races de B \,perfr 'ingens et de Vil), septique.

Dans de tels cas, les épreuves d'agglutination permettent parfois de résoudre la difficulté. I ne colonie aspirée dans une pipette stérile est éuiulsiouuée dans l'eau physiologique; on se sert de cette émulsion pour pratiquer diverses épreuves d'agglutination çntre lame et, lamelle suivant la technique indiquée plus haut.

B. Cultures en bouillon. — Des épreuves d'agglutination croisée pratiquées avec les sénims nnti-perfringens, anti-.v/>o/'ogenes, anti-vibrion septique, etc., rendent de-grands services pour l'identification rapide des cultures en bouillon, même lorsqu'elles sont impures.

Voici quelques indications sur I emploi des séiunis agglutinants.

Les sérums de lapins préparés sont les plus convenables ; il esl en ell'el exceptionnel ipie le sérum de lapin possède des propriétés agglutinantes non spécifiques.

Pour l'identification du /t. perfringens nous utilisons le sérum des chevaux immunisés. Il faut noter toutefois que le sérum de cheval est parfois capable de donner des agglutinations non

Ils MICROBES DES INFECTIONS ',\/lls|s •">'.>

spécifiques, surtoul avec le /*'. sporogenes. Ainsi, sur 9 échantillons de />. sporogenes étudiés avec le sérum de 9 chevaux

normaux, .'> s lies ont agglutiné à 1 >o. à 1 5o el parfois

même à 1 nui avec la plupart des sérums. Par contre le sérum normal de cheval n'a agglutiné ni le l>. perfringens < 10 souches) ni le Vib. septième (8 échantil Ions 1.

Lorsque les cultures utilisées pour les épreuves d'agglutination sont impures, il \ a lieu de signaler les points suivants :

L'agglutination est totale, si l'impureté esl à l'étal de traces ou ne constitue qu'une petite fraction de l'émulsion microbienne, par exemple 1 '1 ou 1 .">. Ainsi dans le mélange suivant : Vil», septique, '1 parties, B. perfringens, 1 partie, le sérum agglutinanl anti-vibrion septique agglutine la totalité des microbes, el le liquide <|ni surnage le dépôt bactérien esi parfaitement clair.

Si. an contraire, l'on utilise une émulsion microbienne comprenant un mélange à parties égales de Vib. septique el de B. perfringens, le sérum agglutinant anti-vibrion septique n'entraînera, avec les vibrions, qu'une partie des B. perfringens, et le liquide qui surnagera le rulol bactérien restera opalescent.

L'on pouvait espérer que la réaction de fixation pourrait être d'un grand secours pour l'identification des anaérobies. Les expériences que nous avons entreprises avec un de nos sérums antitoxiques, le sérum anti-œdematiens, ne nous ont malheureusement donné que des résultats inutilisables. En effet, nuire sérum antitoxique a fixé l'alexine de cobaye non seulement en présence de divers échantillons de />. œdematiens, mais également avec des antigènes non spécifiques : cultures de B. perfringens, de Vib. septique, etc.

Il n'\ a dune pas lieu d'utiliser la réaction de fixation (pratiquée avec les sérums antitoxiques | r l'identification des

di\ erses espèces anaérobies.

En définitive, le meilleur procédé d'identification rapide reste la neutralisation des propriétés pathogènes des cultures par les sérums spécifiques correspondants.

L'étude complète des caractères biologiques et culturaux des

cultures pures est un travail long et minutieux. Il ne devient nécessaire de l'entreprendre que lorsqu'on a affaire à des espèces qui paraissent nouvelles ou à des variétés particulièrement intéressantes d'espèces déjà connues.

En résumé, il est possible dans certains cas de gangrène gazeuse de déterminer rapidement par l'examen bactériologique et par les épreuves d'agglutination croisée à quels germes anaérobiesil tant imputer la complication gazeuse.

Dans les cas difficiles, l'inoculation expérimentale, l'étude des premières cultures, les épreuves de neutralisation par les sérums spécifiques permettront le plus souvent d'établir un diagnostic bactériologique en %l\ à 36 heures.

Par contre, l'obtention des cultures pures el l'étude bactériologique complète de tous les microbes isolés, même dans un seul cas. est un travail longe! souvent difficile.

CIIAPITHK IV

Les anaérobies des infections gazeuses

Nous étudions successivement dans ce chapitre :

i" Des bacilles anaérobies que nous avons isolas el donl nous avons pu faire une étude personnelle;

2° Des microbes isolés au coins de la guerre el donl nous donnons la description d'après leurs auteurs ;

.'V' Des germes anciennement incriminés el <|ui n'ont pas été retrouvés dans la flore des Messines de guerre.