Caractères culturaux

Le B. œdematiens, ainsi que Le t'ont prévoir les conditions de 9a mobilité, esl un anaérobie strict.

L'anaérobiose est extrêmement prononcée pour la plupart des échantillons. Les cultures sont difficiles à obtenir. Le microbe ne pousse Lion qu'en bouillon fraîchement préparé ou régénéré par ro à 3o minutes d'ébullition ; le vide doit être aussi complet (pie possible.

L'isolement du B. œdematiens à partir des produits pathologiques est. de ce lait, souvent très pénible. Nous tenons à insister sur la difficulté qu'il y a à obtenir une première culture de ce germe en milieu liquide lorsqu'on repique une colonie en gélose

prof le. Il est absolument nécessaire de pratiquer le réense-

mencement en utilisant des tubes de bouillon Martin préparés le jour même: faute de prendre cette précaution, l'on court à un échec presque certain.

Ce l'ait permet de comprendre pourquoi, Lien <pie le H. œdematiens suii un germe très répandu, peu d'auteurs aient pu jusqu'ici l'obtenir en culture pure.

Bouillon Martin glucose à 2 p. 1000. — En bouillon glucose à 2 p. iooo, on voit apparaître en quelques heures un trouble d'abord léger, ayant l'aspect moiré des cultures typhiques; puis le trouble s'accentue et, très rapidement, les microbes autoagglutinent et formenl un dépôt abondant dans le fond du tube. L* ne de nos souches, filamenteuse, dépose en gros flocons en moins de six heures d'étuve. In échantillon à articles droits tombe en très tins grumeaux visibles seulement à la loupe dans les cultures abondantes. Le dépôt atteint environ un centimètre, parfois beaucoup moins, suivant la souche. La culture s'éclaircil en '|S heures, si bien (pic. dans les cultures pauvres âgées de quelques jouis, il esl parfois difficile de reconnaître les tubes qui ont donné une culture positive.

Cel éclaircissement progressif du bouillon s'explique par la dégénérescence rapide des microbes, la culture étant rapidement réduite en poussière de spores.

lis MICROBES DES INFECTIONS GAZEUSES 137

L'odeur des cultures esl caractéristique pour presque toutes

les souches. C'est un leur sui ffeneris, fétide, particulièrement

forte dans les \ ieilles cultures.

Les cultures en bouillon glucose s'accompagnenl d'un dégagement gazeux. Le bouillon est nettemenl acide au tournesol.

En bouillon Martin, non sucré el surtoul en bouillon ordinaire non sucré, les cultures soin peu abondantes.

Bouillon Martin non glucose, additionné de blanc d'oeuf. — Le microbe pousse un peu moins abondamment qu'en bouillon sucré; les caractères du dépôl sonl les mêmes. Le blanc d'oeuf n'est pas attaqué même après des mois de séjour à l'étuve. Une

seule de uns souches, après cinq mois de séjour à l'étuve, a attaqué légèrement le blanc d'œuf sur les bords.

Gélose profonde nitratée. — Nous avons représenté (pi. color. \ i l'aspecl des colonies en gélose glucosée nitratée il\ à '|X heures de plusieurs échantillons de B. œdematiens. Le plus souvent, les colonies jeunes ont un centre opaque, jaunâtre, irrégulier, entouré d'une fine couronne de filaments courts e1 inégaux que l'on observe aisément à la loupe ou au microscope. Puis, la colonie s'éclaircit, le centre devient nuageux et, en \H heures, on observe à sa périphérie une large couronne de filaments enchevêtrés. L'éclaircissement des colonies en gélose correspond au stade de désagrégation des microbes observé dans les cultures de même âge en bouillon glucose.

Il est intéressant de noter que certains aspects de ces colonies rappellent de très [très celui du \ ili. septiquect du B. tetani, etc..

Nous figurons ci-après fig. i5 un échantillon (souche U)dontles colonies en gélose glucosée présentent l'aspect <pie nous avons décrit comme aspect « en grenade ». La colonie, d'abord lenticulaire, présentée l'un de ses pôles un gros bouquet de filaments enche\ êtres.

Gélose en surface. — Cultivé en tubes Pinoy, le B. œdematiens produit des colonies extrêmement fines, aplaties, mis bleuâtre, transparentes, à contours irréguliers.

Gélatine glucosée. — Le B. œdematiens poussé à 220 en

gélatine faiblement glucosée à ■>. p. iooo. Il forme des colonies nuageuses constituées par des arborescences de filaments délicats. La gélatine n'est pas liquéfiée. Certains échantillons conservés quatre mois à l'étuve à 220 n'avaienl pas même commencé à digérer le milieu.

Au contraire, en gélatine fortemenl glucosée (à ■>. p. roo), la culture esi beaucoup plus abondante el le milieu esi assez rapidement liquéfié.

Ainsi, suivant la technique employée, le B. œdemaîiens ne liquéfie pas ou au contraire liquéfie la gélatine.

Fig. i5 — Aspect atypique (« en grenade ») des colonies de H. œdematiens (souche I ) eu gélose profonde glucosée nitratée; culture de \S heures.

Dans ce milieu, comme en gélose glucosée, il n'y a qu'une faible production de yaz.

Lait tournesolé. — Le lait tournesolé vire au rouge en ■>J\ heures avec dégagement abondant de gaz. La coagulation se produit en un temps variable (5 jours à un mois et plus). Le caillot se désagrège peu à peu en fins grumeaux. Dans des cultures de plusieurs mois, le caillot grumeleux se décolore, devient rose clair, et la caséine subit un début de peptonisation.

Sérum coagulé. — Cultures très pauvres ; colonies plates et irisées; [tas de liquéfaction du milieu.

Bouillon à la viande. — Culture pas très riche ; la viande est un peu ramollie et prend une teinte blanchâtre. Sporulation abondante,

I ES Hll ROBES DES INFEI flONS GÀZE1 SI S 139

( '.. — rROPRIK i ES BU h. m m lui i -~

i" Propriétés saccharolytiques. — II. Henry a eu l'occasion d'étudier le pouvoir fermentatif «le deux échantillons de />. œdematiens que nous lui avions envoyés.

Ces germes onl attaqué énergiquement l«' glucose, le lévulose ci le maltose, mais aucun autre hydrate de carbone.

2° Propriétés protéolytiques- — Le H. œdematiens n'est pas un fermenl protéolytique actif. Il ne liquéfie pas la gélatine (non

sucrée ou sucrée à •> p. m ), ne digère ni l'ovalbumine, ni le

sérum coagulé. Il attaque très faiblemenl el très lentemenl la caséine.

I). - Pouvoir pathogène

Toutes les souches dr II. œdematiens que nous avons étudiées e( qui provenaient de cas mortels de gangrène gazeuse i n) possédaienl un pouvoir pathogène élevé. Dans trois cas de gangrène gazeuse non mortelle, nous avons isolé îles échantillons plus faiblement pathogènes. Enfin, nous avons rencontré deux fois, dans des plaies gangreneuses, un bacille anaérobie strict donl les caractères morphologiques et culturaux rappelaient de très près ceux du /*'. œdematiens, mais qui était dépourvu de toute virulence.

i° Culture totale. — Les échantillons actifs de B. œdematiens

tuent tous les animaux de laboratoire : cobaye, lapin, rat, souris. I.e microbe est aussi pathogène pour le mouton et [tour le cheval.

Cobaye. — Le cobaye est un des animaux les plus sensibles. L'injection intra-veineuse de culture totale « i (\ à i ce de culture de ''j heures en bouillon glucose) tue le cobaye en quelques heures : 6 ;'i iS heures suivant la dose injectée. L'animal ne présente d'accidents graves que quelques instants avant la mort. Les poils se hérissent, les flancs se creusent, le rythme respiratoire est précipité : ranimai est froid, se retourne difficile-

1 iO DEUXIÈME PARTIE

ment cl [tousse de petits cris plaintifs. La mort est annoncée par des crises de hoquets el de convulsions. L'animal meurt par anèt respiratoire.

A l'autopsie, on rencontre des lésions viscérales étendues : placards de nécrose dans le foie, la rate et les reins, hvperémie de l'intestin et des capsules surrénales. Ces lésions se retrouvent chez tous les animaux (pu succombent à l'inoculation de culture ou de toxine de H. œdematiens.

L'inoculation intra-musculaire esl des plus sévères. Nous avons tué des cobayes en il\ à 3o heures à la dose de i 10 à i/4o de ce.

L'inoculation intra-musculaire de culture de II. œdematiens nous a révélé l'existence de deux types de microbes : un type toxique el un type virulent, entre lesquels il existe, du reste, des intermédiaires.

a Si l'on inocule dans la cuisse du cobaye i ce. de culture de ■>.'\ heures en bouillon glucose provenant d'un échantillen toxigène, on constate bientôl une tuméfaction appréciable du membre, laquelle s'accroît d'heure en heure. La cuisse devient froide ; la peau esl pâle, bleutée; un œdème dur, élastique, peu dépressible, envahit de proche en proche la paroi abdominale et remonte jusqu'au sternum; l'animal se refroidit et meurt par arrêt respiratoire.

En incisant la lésion, on constate <pie la paroi abdominale est envahie par un œdème gélatineux, lardacé, blanc ou blanc rosé (ressemblant à l'œdème charbonneux), non infiltré de gaz. Au voisinage des muscles, l'œdème est rose, parfois hémorragique. Les muscles œdématiés sont hyperémiés et infiltrés de très fines bulles gazeuses (pi. color. VI). Il ne sont pas nécrosés; la lésion n'a pas d'odeur putride.

Les microbes sonl très rares dans la sérosité musculaire (fig. 16). Ils ne se généralisent pas. On ne retrouve pas de bacilles dans la cavité péritonéale. Les hémocultures faites à l'agonie ou immédiatement après la mort restent constamment négatives.

b Si on injecte an cobaye i ce. d'une culture de :?4 heures d'un échantillon virulent de B. œdematiens les lésions obtenues sont assez différentes. La peau de la cuisse tuméfiée est souvent brun rougeâtre, humide; à la palpation du membre, on perçoit.

LES MICROBES DES INFECTIONS GAZEUSES lil

une fine crépitation qui s'étend parfois jusqu'au niveau de l'abdomen œdématié. A l'incision, l'cedè gélatineux esl rosé,

parfois rouge groseille el infiltré de nombreuses bulles de gaz. L'œdème périmusculaire esl hémorragique. Les muscles sonl fortement hyperémiés, rouge violacé, crépitants, infiltrés de huiles de gaz parfois assez volumineuses. Ils ne sonl pas gangrenés ci n'ont pas d'odeur putride.

Dans la sérosité musculaire pullulenl un grand nombre de bacilles prenanl le Gram, diplo-bacilles pour la plupart, droits dm légèremenl incurvés. Les éléments sporifères ne sonl pas rares dans les muscles des animaux qui succombenl 24à48 heures après l'inoculation (fig. t6).

Le microbe se généralise ;„on rencontre de nombreux bacilles dans l'exsudal péritonéal. Ce sonl des éléments ordinairement groupés par deux, droits, assez longs ; il n\ a pas de formes filamenteuses ni de chaînettes à la surface du foie (fig. if>). Les bacilles sonl nombreux dans le foie et dans la rate. Les hémocultures pratiquées avanl la mon sont régulièrement positives.

Sur ii échantillons fortement pathogènes pour le cobaye, cinq donnaient des lésions ,|u type toxique, Irois des lésions du type virulent ; trois échantillons produisaient des lésions intermédiaires.

L'injection sous-cutanée «les mêmes doses de culture i i 4 à i ce. i produit des lésions qui diffèrent peu de celles que provoque l'injection intra-musculaire. L'injection sous-cutanée esl cependant moins sévère.

La paroi abdominale esl envahie par un œdème blanc, lardacé, sans infiltration gazeuse et sans généralisation microbienne lorsqu'on inocule une souche toxique; parun œdème hémorragique. infiltré de nombreuses bulles .le gaz, et par la pullulation des bacilles dans l'organisme du cobaye lorsqu'on expérimente avec des échantillons virulents. L'épaisseur de la paroi abdominale œdématiée ai teint 3 à 4 centimètres.

Les lésions ne sont jamais putrides. Les muscles abdominaux sonl hyperémiés, jamais gangrenés.

Lapin. — Le lapin esl au moins aussi sensible que le cobaye au H. œdematiens. Nous insisterons peu sur la description des lésions provoquées chez cet animal par l'inoculation sous-cutanée

ou intra-musculair.e de la culture lotale. Elles rappellent de très près celles observées chez le cobaye et sont caractérisées surtout par l'envahissement du tissu conjonctif par un œdème blanc rosé, le plus souvent infiltré de iines bulles de gaz. La paroi abdominale œdématiée atteinl souvenl '\ à 5 centimètres d'épaisseur.

Kîg". 16. — B. cedematiens dans les sérosités du cobaye. — En haut, type virulent : à gauche, sérosité musculaire avec des formes spondées ; à droite, sérosité péritouéale, diplobacilles. — En bas, type toxique, sérosité musculaire avec rares bacilles

Les muscles œdématiés et hyperémiés son! Infiltrés de bulles de gaz. I ii quart de centimètre cube tue le lapin en -ilx à 4& heures.

Souris blanche. — ■ La souris blanche esi extrêmement sensible à l'inoculation de liés faibles doses de culture. Il suffit d'inoculer à cet animal i/io à i /5o de ce. de culture dans les mus-

clés de la cuisse pour déterminer l'apparition des lésions caractéristiques el la mon de l'animal en moins de £8 heures.

Ilvr blanc. — Le rai blanc esl presque aussi sensible que le cobaye, peut-être un peu moins. Cependant les lésions provoquées par l'inoculation sous-cutanée ou intra-musculaire de culture totale <>nt un caractère un peu spécial. Les lésions, quel que soil l'échantillon inoculé, rappellenl toujours celles que produisenl chez le cobaye les souches toxiques. Les muscles, hyperémiés, soni extrêmemenl peu ou même ne soni pas infiltrés de bulles de gaz. Le lissn conjonctif est envahi par un œdème gélatineux, blanc, jamais infiltré de gaz. Les microbes soni peu abondants dans les lésions locales el soni très rares ou absents dans la cavité péritonéale.

Conservation du pouvoir pathogène. — Repiqué en bouillon blanc d'oeuf, le />'. cedematiens conserve bien à la glacière son pouvoir pathogène. Les souches Les pins toxiques semblent le conserver pendant un temps considérable: certaines de nos souches toxigènes gardées depuis douze à dix-huil mois à la glacière tuem encore le cobaye en ->.'\ heures à la dose de i !\ de ce. Les échantillons du type virulenl conserveni moins bien leur pouvoir pathogène : une souche (bacille C), isolée en février iqi5 et qui tuait à cette époque le cobaye à la dose de i 4 ce, ne inaii pins le cobaye, le 6 avril [916, qu'à la dose de 10 ce.

Enfin, les échantillons faiblement pathogènes (provoquanl des lésions à la dose de 3 à ."1 ce. 1 perdent en deux ou trois mois toute virulence.

■i° Toxine. — Cobaye. — La première toxine de />. œdematiens obtenue en filtranl des cultures en bouillon glucose âgées de un à six jours tuait le cobaye en 12 à 17 heures, à la dose de 1 '|o de CC. injectée dans la veine.

Nous avons pu, depuis, obtenir une toxine beaucoup pins active, tuant le cobaye jusqu'à la dose de 1 '(Oo de ce. en injection intraveineuse.

Les symptômes provoqués parla toxine injectée dans la veine du cobaye rappellent de très près ceux qui suivenl l'inoculation intra-veineuse de culture totale. De fortes doses de toxines (3, 2,

14i DE! Ml.ME l'AliïlK

i ce.) m' déterminent jamais la mort foudroyante. L'animal parail cependanl malade, triste; les poils se hérissent ; au bout de quelques heures il est pris de frissons, de dyspnée progressive, puis, quelques minutes avant la mort, de hoquets et de convulsions. Il meurt en hypothermie par arrêt respiratoire. Les doses de toxine tuant en S à ft heures ne produisent d'accidents que très peu d'heures avant la mort. Le débul de la crise est annoncé par la dyspnée, le hérissement des poils et le refroidissement de l'animal. La fin de la crise secousses musculaires, hoquets el mort est le plus souvent extrêmement rapide | io à i 5 minutes environ i.

Les doses limites i 4.00 . lorsqu'elles ne provoquent pas la mort du cobaye, déterminent cependanl souvent des symptômes appréciables ->'\ à 4-8 heures après l'injection: l'animal se hérisse et est pris de dyspnée (flanc creux, accélération du rythme respiratoire). La crise dure \-> à ■>.', heures, puis le cobaye se rétablit.

La toxine injectée sous la peau du cobaye tue cet animal à des doses variables allant jusqu'à i rioo <h- ce. Des doses plus faibles il 200 à 1 '|oo causent des lésions locales qui Unissent par guérir.

Les doses mortelles produisent un œdème gélatineux caractéristique, semblable à celui que provoque l'injection sous-cutanée de la culture totale d'un échantillon hypertoxique. Cet œdème, blanc, gélatineux, progressif, non infiltré de yaz. envahit peu à peu toute la paroi abdominale. Les lésions progressent jusqu'à ce que l'animal succombe (en deux à trois jours avec la dose limite 1.

Les doses non mortelles déterminent la production d'un œdème local qui atteinl son développement maximum au boul de 2 à 3 jours. Après ■>\ heures, on aperçoit à la surface de la peau un grand nombre de petites taches hémorragiques superficielles; puis l'œdème se résorbe peu à peu. Souvent il se forme une petite escarre et la guérison survient par sclérose.

Souris blanche. — La souris est encore plus sensible que le cobaye; cel animal succombe en >\ à 48 heures à la suite de l'injection sous-cutanée de 1 800 à 1 [6 :c. de toxine de B. œde-

matiens.

LES MICROBES l'Ks INFECTIONS GAZEUSES I '»•>

Lapin. — Le lapin est très sensible à l'action delà toxine. I n centimètre cube de toxine injectée sons la peau de l'abdomen provoque la formation d'un œdème blanc gélatineux qui s'étend à

toute la paroi abdominale. L'animal meurt en il\ ;l 48 heures.

Moi io\. — l.a toxine injectée sous la peau du flanc du mouton produit un œdème considérable au point d'inoculation ou à distance (œdème du poitrail et de la cuisse). Ces lésions locales s'accompagnent de symptômes de dyspnéetrès accusés. Cinq centimètres cubes de toxine injectés sous la peau d'un gros mouton ont déterminé sa mort en 48 heures pararrêl respiratoire.

Cheval. — Le cheval est égalemenl très sensible à l'action de cette toxine. L'inoculation de faibles doses détermine l'apparition d'œdèmes locaux et d'oedèmes à distance qui ne disparaissent parfois qu'après plusieurs semaines. Le cheval présente également des symptômes généraux graves i lièvre, dyspnée, perte de l'appétit, etc..) qui durent plusieurs jours et font craindre pour sou existence.

Ajoutons enfin que le H . œdematiens secrète des hémotoxines. La culture totale détruit in vitro les globules d'homme de mouton et de cobaye. Cependant cette action, bien que constante, est beaucoup plus faible que celle exercée par le B. perfringens ou le Vib. septique. i 10 de ce. de culture totale ne peut détruire que la même dose d'hématies diluées à i : 20.

E. — Anticorps spécifiques

i° Agglutinines. — Nous avons obtenu assez facilement sur lapin des sérums qui agglutinaient à 1/100 les échantillons de n. œdematiens ayant servi à préparer l'animal. Les sérums n' agglutinaient pas d'autres échantillons de li. œdematiens. Il est du reste difficile de pratiquer ces expériences d'agglutination croisée^ car la plupart des échantillons de li. œdematiens auto-agglutiut'ui avec la [tins grande rapidité.

■i° Antitoxine. — L'on verra dans notre chapitre de sérothérapie expérimentale que nous avons obtenu une antitoxine très active eu immunisant différents animaux contre la toxine du

B. œdematiens . Cette antitoxine a neutralisé la toxine et la culculture de tous les échantillons de B. œdematiens que nous avons isolés.

F. — Identification

Les caractères morphologiques différents, l'aspect variable des cultures en gélose, certaines variations du pouvoir pathogène et des lésions observées expérimentalement ont rendu nos premières identifications assez difficiles.

Seule, l'antitoxine nous a permis d'identifier entre eux avec certitude les divers échantillons de B. œdematiens que nous avions isolés.

Nos divers sérums antitoxiques (sérums de lapin, de mouton et de cheval) ont toujours neutralisé la culture de tous les échantillons de B. œdematiens étudiés. Dans beaucoup de cas, des doses minimes de sérum (l/ioo, 1/200) de ce. ont suffit pour neutraliser totalement jusqu'à .">o doses mortelles de culture.

Des essais de neutralisation des cultures de B. œdematiens elfectués avec de fortes doses de sérum non spécifiques (sérums antivibrion septique, anti-per/r ingens, anti— tétanique, sérum anticharbon symptomatique de Leclaïnche et Vallée) sont toujours restés sans résultats ; les cobayes inoculés avec un mélange : culture de B. œdematiens -)- sérum non spécifique succombent en pfésentanl les mêmes lésions que les animaux témoins.

(i. — Position dans la systématique

Nous ne comparerons ici le B. œdematiens qu'au Vib. septique Pasteur et au B. Nùvyi. Les rapports de ce germe avec d'autres bacilles producteurs d'oedème : Bac. de l'œdème gazeux malin et B. Bellonensis de Sacqi i':pki:, B. sarcemphysematodes hominis de Conradi et Bieling, Bac. du Gasoedem d'AsCHOFF seront étudiés dans le chapitre suivant, après que nous aurons donné la description de chacun de ces microbes.

Rapports du B. œdematiens avec le Vib. septique Pasteur. — Les deux germes possèdent les Caractères généraux communs

LES MICROBES DES INFECTIONS GAZEUSES l-'l"

suivants : bacilles anaérobies, prenant le Gram, ciliés, sporulants, très pathogènes pour les animaux de laboratoire.

Ils se différencient par de multiples caractères, morphologiques, culturaux, lésions chez les animaux, propriétés des toxines e1 dos anticorps spécifiques.

Le li. œdematiens est plus épais el plus long que le Vib. septique. Dans les sérosités des animaux h dans les conditions ordinaires d'examen, le B. œdematiens esl pratiquement immobile, tandis qu'il csi habituel d'observer la motilité du V'û). septique.

Les spores du l'>. œdematiens sonl pins grosses que celles du \ il», septique. Elles sont plus constammenl subterminales «pie centrales : c'esl I inverse pour le \ ib. septique.

Les caractères de culture sonl différents en bouillon, en lait, en gélatine. Le II. œdematiens ne liquéfie pas la gélatine.

Les lésions chez les animaux sonl très différentes. L'œdème épais, gélatineux, souvenl transparenl (comparable à celui prodnii par le hardie charbonneux), provoqué par le li. œdematiens, diffère grandemenl de l'œdème séreux produil par le Vib. septique.

La toxine du IJ. œdematieris '-si très active, mais ne tue les animaux qu'après une certaine période d'incubation : trois cents doses mortelles injectées dans la veine du cobaye ne tuent l'animal qu'en deux heures. La toxine de \ ib. septique a, au contraire, une action foudroyante: ■>. à 3 doses mortelles tuenl à coup sûr les animaux en quelques minutes.

La toxine du li. œdematiens inoculée sous la peau produit un œdème blanc, gélatineux ; puis la peau se sclérose et il se forme parfois une escarre sèche. La toxine du Vib. septique produit un œdème séreux auquel succède une escarre humide.

Le sérum agglutinant anti-vibrion septique n'agglutine pas le IJ. œdematiens et inversement.

Enfin, les antitoxines correspondant à chacun de ces germes oui des actions strictement spécifiques.

Il n'est pas douteux que le li. œdematiens et le Vib. septique soni des germes différents.

Rappelons enfin ici que le sérum anti-charbon symptomatique de Leclainche el Vallée préparé à l'Ecole Vétérinaire de Toulouse n'a pas neutralisé la culture du IJ. œdematiens.

Rapports du B. œdematiens avec leB. Novyi. — Novy a décrit en i S<>4 sous le nom de B. œdematis maligni II un bacille anaérobie provenant de trois cobayes morts à la suite d'une injection de « Milchnuclein ».

Kehry iiS()4i a isolé des muscles desséchés provenant d'un bœuf mort de charbon symptomatique nu bacille qui, d'après les traités, serait semblable an Bac. de Novy. Ainsi, Kruse (in Flûgge réunit les deux germes sous le nom de B. œdematis thermophilup, et Migula sous celui de B. Novyi.

Enfin v. Hibler, dans son traité sur les anaérobies pathogènes, donne les caractères de ce microbe qu'il désigne comme Bacille n° V. Il en a étudié quatre souches : i" Souche fournie par Migula i originale '?) ; ■>" Sérosité de l'œdème sous-cutané d'un lapin inoculé avec de la terre :

3° Muscle desséché d'un sanglier mort de charbon symptomatique ;

'i0 Pus provenant de la lèvre d'une femme morte en présentant des symptôme^ de septicémie.

Les descriptions données par les auteurs, malgré quelques désaccords portant sur des points de détail, faisaient admettre que ces différents échantillons appartenaient à une même espèce, le B. Novyi, dont la position systématique se présentait de la façon suivante.

Il offre un certain nombre de caractères communs avec le B . œdematiens :

i° 11 en a en effet les dimensions et l'aspect morphologique; à noter, en particulier, les bouquets de cils géants observés par Novy et v. Hibler (pi. IV, fig. ri.

2° Les caractères culturaux sont très voisins. Le //. Novyi dépose rapidement dans les milieux liquides; acidifie les milieux glucoses, donne en gélose des colonies arborescentes (pi. 1\ , fig. L), E'.), ue liquéfie pas le sérum coagulé.

3° Le B. Novyi est très pathogène pour les animaux de labo-

Plunche IV. — H. Novyi. A. frottis de foie de cobaye. — B, Spores (d'après v. H i bleu). - C, Bouquets de cils géants (d'après Novy). — Del E, Colonies en gélose profonde, aspect typique; F, Colonie atypique : (d'après v. IIibi.eh).

Planche IV

Si

M v \|h ROBI s Dl S IM l ;i I hi\> GAZ1 l si S

ratoire (cobaye, rat, souris, lapin) el produil souvenl un œdème gélatineux blanc. Il ne donne pas de filaments à la surface du foie du cobaj e (pi. IN. li^ . A .

Cependant, il diffère du />'. oedematiens par les points suivants :

a. — I >'après \n\ ï el kr.iwo , il ne pousse pas dans la gélatine à 24° H <>s' vrai qu?on Irnin c dans \ . HlBLER une indication générale d'où il ressorl que le H. Novyi liquéfierait la gélatine .

h. — Les auteurs n'ont jamais observé (le spores dans les sérosités musculaires des animaux Novy,Kerm .

\ . I Iibler).

c. — Ce germe ne sporule pas en milieu glucose. Les spores n'ont jamais été observées que par v. Hibler et dans des milieux spéciaux (Hirnbrei, gélose alcalinisée, etc., PI. IV, 6g. B .

On ne pouvait donc.

d'après les seules descriptions, identifier les 2 germes el ceci d'autant pins que les auteurs n'ont pas obtenu la toxine si caractéristique de notre microbe.

Seule la comparaison directe de nos souches el de celles des auteurs pouvait permettre de résoudre ce problème bactériologique.

Fis

— Bac. de Novy. A. culture en bouillon glucose de \ jours à 2 |). mon; formes sporulées (coloration par le Ziehl à chaud). 15. culture de i'\ heures dans le même milieu .

Tout récemmenl nous avons demandé au professeur Novy do nuiis faire parvenir un échantillon du germe qu'il avait autrefois isolé. Le savant américain a très aimablement accédé à notre demande, el nous sommes heureux de lui en témoigner ici noire gratitude.

Nous avons immédiatement entrepris l'élude comparative du B. œdematiens et du bacille de Novy et nous avons pu déjà faire les constatations suivantes :

Nous n'avons noté jusqu'ici minute différence essentielle entre les 2 germes. Les discordances relevées dans lu littérature ne résistent pas à In comparaison directe des souches :

a. — Le bac. de Novy comme le II. œdematiens pousse dans la gélatine à 24°. Il liquéfie la gélatine sucrée à 2 p. roo, mais non la gélatine sucrée à ■>. p. 1000 on non glucosée.

/>. — Dans la sérosité musculaire d'une souris qui avait succombé à l'injection dans la cuisse de culture eu bouillon de !>ae. de Novy additionnée d'acide lactique, nous avons observé des bacilles sporifèjes. Ceux-ci étaient semblables aux tonnes sporulées du />. œdematiens

c. — En bouillon Martin glucose à 2 p. 1000 les 2 germes sont morphologiquement identiques (fig. 17. B); tout au |>lus peut-on remarquer que le bac de Novy dégénère moins rapidement que le B. œdematiens. Au bout de quelques jours, on observe dans ce milieu la présence de spores, ovalaires, subterminales, que l'on retrouve encore incluses dans les bacilles incomplètement d égé né ré s (fig. 17. A .

Le bacille de Novî ( eoni raireiueut aux descriptions anciennes] Sporule donc, non seulement dans les tissus, mais encore dans les milieux même glucoses.

Enfin dans Ions les milieux de culture utilisés (lait, sérum coagulé, bouillon blanc d'œuf les caractères biochimiques ei culturaux étaient les mêmes.

Malheureusement, en raison sans doute de son origine ancienne, le bacille de Novy s'est modifié en 2 de ses caractères importants :

1" En gélose profonde glucosée nitratée, il ne donne plus des colonies arborescentes, mais des colonies qui primitivement lenticulaire» ne produisent que secondairement des bourgeons ou des filaments colonies atypiques de v. Hibler, <•!'. pi. \ I. F).

LES MICROBES DES INFECTIONS GAZEUSES 1")l

a0 11 a perdu presque totalement son pouvoir pathogène et s;i toxicité; aussi les expériences de neutralisation croisée que nous avons pu faire jusqu'ici n<' nous permettent-elles pas d'affirmer encore que le sérum anti-œdematiens exerce une action spécifique sur l'échantillon de Novy. Nous nous efforçons actuellement de renforcer le pouvoir pathogène de ce germe el espérons pouvoir résoudre bientôt ce point particulier.

Quoi qu'il en soit il n'est pas douteux :

i Que les différences relevées dans la littérature entre le />. œdernatiens et le bacille de Novy ne résistenl pas à la comparaison directe îles souches;

•>" Que l'échantillon de Novy ou bien esl identique au l>. œdematiens ou bien en es( extrêmement voisin.

Si nous avions rencontré cet échantillon dans nu cas de gangrène gazeuse, nous n'aurions certainement pas hésité à le considérer comme un H. œdernatiens non pathogène. .Mais étant donné qu'il existe dans la littérature un bacille de \o\ y el un H. œdernatiens nous croyons qu'il serait imprudent de ne pas nous entourer de toutes les garanties possibles avant de déclarer que ces ■>. germes sont identiques.