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sensibilité du rat à la maladie. Ces expériences ont consisté à mettre ces animaux au régime déficient en vitamines ; à les refroidir, à les soumettre à l’action des rayons X ou à les injecter de substances qui en réduisant la production leucocytaire où en général le mécanisme de défense donnait, pour résultat la pullulation de Rikettsia.

Les expériences faites avec le benzol et les rayons X leur ont donné de très bons résultats. Voici la technique de préparation des rats employés dans ces deux méthodes :

Préparation des rats par le benzol. — On choisit des rats mâles d'un poids approximatif de 120 à 150 gr., on les injecte par voie sous-cutanée de 2 cmc. d'un mélange de benzol et d'huile d'olive à parties égales. 48 heures après les rats sont prêts pour souffrir l’ino-

culation.

Préparation des rats par les rayons X. — On expose les rats mâles adultes à l’action des rayons X, produits à 170 millivolts et à 8 milliampères ; filtrés à travers 0,5 mm. de cuivre, avec une longueur d’onde effective de 0,160 unités Angstrom, et une intensité de 10 unités ‘ r ” par minute.

48 heures après, ou tout de suite après l’irradiation les rats sont inoculés par voie péritonéale de 2 cmc. d’une solution à 1 pour 10 provenant du râclage de la tunique vaginale d'un cobayeinfecté du virus mexicain. On garde les rats inoculés dans un refrigérateur à la température de 5°.

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La maladie se déclare chez les rats 3 jours après l’inoculation, le quatrième ou cinquième jour on les tue, on les saigne à blanc et on ouvre la cavité péritonéale aseptiquement (on extrait de même les testicules). Si l'examen microscopique montre qu'il y a pullulation suffisante de Rikettsia on procède au lavage de la cavité péritonéale et au râclage de la tunique vaginale, Avec une pipette spéciale de 10 cmc. munie d’une tétine en caoutchouc, le péritoine et les intestins sont lavés soigneusement avec une solution saline formolinisée à 0,2%. On dépouille les testicules de la tunique vaginale. On triture la tunique dans 10 cmc. de sérum physiologique ou bien on râcle et on lave cette séreuse et on ajoute ce produit à l’antérieur; le produit total est centrifugé pendant 3 minutes à petite vitesse et le liquide qui surnage est gardé pour être traité ultérieurement. Le sédiment obtenu est trituré avec poudre de verre « pyrex » dans un mortier; on fait des centrifugations et des lavages successifs afin de rompre les cellules pour obtenir le plus grand nombre possible de germes libres ; le liquide surnageant de la première centrifugation est soumis à une autre centrifugation plus rapide et plus longue (5.000 tours par minute pendant une heure); le nouveau liquide qui surnage est rejeté et le sédiment agité avec une pipette. Après d’autres centrifugations à petite vitesse et des lavages successifs ce sédiment donnera une suspension de Rikettsia libre de débris cellulaires. Ure dernière centrifugation, à grande vitesse, permettra d'obtenir un sédiment, lequel suspendu encore une fois de plus dans

J. Godinez-Rivera 3