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cope, les différentes phases du processus de régénération. Au point de vue histologique, les premiers stades qui vont de la Se heure au huitième jour sont assurément les plus instructifs et aussi les plus difficiles à interpréter, car s'ils nous donnent l'image très nelle de la restauration épithélio-conjonetive, il est encore diflicile de se prononcer sur le primum movens de la régénération cellulaire et sur l'origine mème des fibroblastes qui en font les frais. MM. Bonnefon et Lacoste, sans donner aucune explication catégorique de ces faits, apportent quelques données nouvelles qui pourraient jeter un peu de lumière dans le débat: nous nous bornerons toutefois à exposer au cours de ce travail documentaire les faits tels qu'ils les ont vus et tels que nous les avons vus nous-même dans le champ du microscope.

Description histologique

CINQUIÈME HEURE (/lanche I, fig. 1)

Fixation au formol à 10 pour 100.

Inelusion à la parafline.

Colorations : Van Gieson-Curtis, vert-lumière, hématoxyline-éosine, thionine phéniquée-éosine.

Coupes transversales.

La perte de substance apparait sous forme d'un vallonne- . ment à bords taillés à pie, à fond inégal, déchiqueté. Si l'on compare la profondeur de la perte de substance à l’épais- seur du lissu sain environnant, on conslate que lexcision a intéressé la moitié et, par endroits, les deux tiers du tissu propre.

L'épithélium, normal à la périphérie, où il compte trois ou quatre couches de cellules, s'amincit brusquement à une certaine distance de la plaie et ne compte plus à partir de ce point jusqu'au bord mème de la perte de substance qu’une

Dr CR

ou deux couches de cellules aplaties. Des deux côtés, au moment précis où le revêtement épithélial atteint la berge de l’excavation, il présente un brusque renflement piriforme, composé d’une trentaine de cellules polygonales, d'aspect normal, réparties sur cinq couches. Ce renflement surplombe le fond de la plaie, qui est occupée à ce niveau par un grumeau de leucocytes polynucléés neutrophiles englobant des débris épithéliaux, le tout enserré par un réseau de fibrine parsemé de globules rouges. De nombreux leucocytes polynucléés neutrophiles, d'aspect normal, immigrent dans le Lissu propre et l’infiltrent dans toute la région des angles de Ja plaie.

On ne note aucune figure de mitose.

. Le tissu du fond ne présente aucune or aiou histalogique et se continue sans transilion avec le parenchyme sain environnant.

L’endothélium de Descemet est normal sur toute son étendue.

DouzièMEe HEURE’ (Planche I, fig 2): °°" ""

La perte de substance apparait ici sur une grande éten- ‘due. Du côté du limbe, on constate que lépithélium, réduit à deux couches de cellules aplaties, est en progression vers le centre de la plaie. Il a totalement recouvert un bourgeon de tissu propre qui surplombe la perte de substance à ce niveau (Planche IL, fig. 6). Du côté pupillaire, la progression épithéliale est également très nette. “

A peu de distance de l'excavation, on note une invagination épithéliale dans le tissu propre, sous forme de bourgeons composés d'une vingtaine de cellules polyédriques, ànoyaux globuleux et à protoplasma clair. À la suite, la couche épithéliale devient uniformément mince et descend en pente rapide vers le fond'‘de la perte de substance.

Le tissu propre est recouvert, comme dans le stade précédent, partout où l’épithélium fait défaut, d’une croûte inflam-

matoire composée de globules rouges, de leucocytes polynucléés neutrophiles et de débris de globules blancs.

La région du limbe, au niveau du bourgeon précédemment décrit, présente un aspect tout à fait particulier. Dans les couches superficielles et par endroits, au voisinage immédiat de l’épithélium, se trouvent des espaces lacunaires entièrement clos, sans paroi organisée, renfermant des globules rouges en nombre variable. Le nombre de ces cavités s’accroit au fur et à mesure qu'on se rapproche du limbe, pour faire place à des vaisseaux de structure tout à fait différente et dont l'existence est normale à ce niveau.

Le tissu propre, en dehors d’une infiltration par les cellules migratrices, ne présente dans toute son étendue aucune altération et il est impossible de trouver parmi les cellules fixes le moindre signe de prolifération.

ViNGT-QUATRIÈME HEURE (Planche 1, fig. 3; Planche III)

La perte de substance est entièrement comblée par un épithélium, réparti sur un grand nombre de couches, variable suivant les points considérés.

D'une façon générale, l'épaisseur croit de la périphérie vers le centre ; l’épithélium, aminci au voisinage immédiat de la brèche, s’épaissit brusquement quand il atteint celle-ci. De deux couches il passe successivement à six, dix, quinze et vingt couches.

De la face profonde de ce bourrelet épithéliak partent des bourgeons de dimensions très variables qui pénètrent dans les anfracluosités du tissu propre el dessinent un contour, irrégulièrement dentelé par endroits ; dans l'intervalle de ces crêtes, le Lissu propre est séparé de l'épithéHKum par des espaces vides.

À un fort grossissement, on constate au centre même du bourrelet et au centre de la zone excisée des cellules épithéliales polyédriques, à protoplasma spongieux, avée de nombreuses figures de karyokinèse ; on ne trouve que de rares figures de

ET mitose dans les couches superficielles. Le tissu propre à un aspect normal, toutefois on trouve entre ses lames un certain nombre de leucocytes polynueléés neutrophiles.

Le long des éperons épithéliaux, on trouve, à côté des polynueléés et des débris de globules blancs, des cellules propres de la cornée en plus grand nombre. Ces cellules, très polymorphes, à gros noyau et à protoplasma exubérant, sont orientées dans tous les sens sans systématisation aucune.

Dans le voisinage de la couche épithéliale, on relrouve, creusés en plein tissu propre, les espaces lacunaires arrondis, décrits au stade précédent au voisinage du limbe. Leur aspect est identique ; pas de paroi cellulaire, globules rouges et parfois quelques globules blancs à leur intérieur. Leur situalion topographique a seule changé, car ils cheminent en pleine cornée le long des bords de la plaie.

QUARANTE-HUITIÈME HEURE (Planche I, fig. 4)

A ce stade, les dentelures qui hérissaient la face profonde de l’épithélium ont à peu près disparu. L’épaisseur est cependant loin d’être uniforme. Aux angles et au centre de la perte de substance, il existe des épaississements considérables, allant jusqu'à vingt couches de cellules, dans l'intervalle desquels l’épithélium se réduit à un nombre de couches voisin de la normale.

De la face profonde de l’épaississement central partent deux bourgeons obliquement dirigés de haut en bas et de dedans en dehors, s’enfonçant dans le tissu propre.

Ces formations sont essentiellement constituées par des fibroblastes jeunes, désordonnés dans leur orientation, par des leucocytes polynueléés neutrophiles, des débris nucléaires et de très rares cellules épithéliales. Entre chacun de ces bourgeons et la face profonde de l’épithélium (Planche IV), il existe un espace angulaire ouvert en dehors et dans cet espace on trouve un tissu cornéen infiltré par des cellules épithéliales sur les caractères desquelles il nous faut insister.

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En effet, le protoplasma est vacuolaire, œdémateux, réduit parfois à une mince membrane d’enveloppe; le noyau est flou, lavé, en pyenose ou ayant perdu une partie de sa chroinatine.

On ne trouve plus dans le revêtement que quelques très rares figures de karyokinèse.

Le tissu propre, dans les couches profondes, est normal ; l'infiltration leucocytaire, signalée dans les stades précédents, est ici absente; on ne signale ni polynucléés, ni traces de vaisseaux. C’est dans cet espace angulaire également que l’on rencontre des léucocytes polynucléés éosinophiles en nombre important. |

QUATRE-VINGT-SEIZIÈME HEURE (/lanche I, fig. 5)

La perte de substance est encore visible très nettement. En effet, on constate, au voisinage de la région marginale de la zone excisée, l’amincissement de la couche épithéliale déjà signalée aux stades précédents, auquel fait suite très rapidement un bourgeon épithélial présentant le maximum d'épaisseur aux angles et au centre de la perte de substance, comprenant en moyenne dix à douze couches de cellules, aplaties dans les zones superficielles, polyédriques dans les parties moyennes, n'ayant pas encore d'orientation régulière et un aspect cylindrique normal dans la couche la plus profonde.

Au niveau de l’un des angles de la perte de substance, on rencontre encore, à la face profonde de l'épithélium, des fibroblastes en nombre important et des cellules épithéliales reconnaissables à leur noyau et dont le protoplasma vacuolaire, œdémateux, indique la dégénérescence.

Vers la région du centre de la plaie, on remarque quelques éléments conjonctifs qui présentent ce même aspect vacuolaire.

Par ailleurs, le tissu propre est absolument normal; on n'y trouve ni polynucléés, ni trace de vaisseaux.

L'endothélium de Descemet est également normal,

HuiT Jours

À ce stade, la cornée régénérée présente dans les parties transparentes un aspect qui ne diffère pas notablement de celui du stade précédent. La seule particularité réside dans l’'amincissement progressif de la couche épithéliale, à partir des lèvres de la plaie vers le centre. L'épithélium central est encore très épaissi, mais la couche profonde présente partout la mème régularité.

Dans le tissu propre, l'agencement des fibroblastes est encore régularisé et l’on peut délimiter une région sous-Épithéliale, composée exclusivement d'éléments jeunes (couche génératrice).

Cette pièce présentait une zone opaque dans laquelle la texture est complètement modifiée. L'épithélium est beaucoup plus épais; les cellules propres du tissu conjonclif sont bien proliférées et ne présentent aucun agencement régulier. L'infiltration leucocytaire est extrêmement marquée

UxX Mots ET DEMI

Toute trace d'épaulement limitant la perte de substance primitive a disparu. Au niveau des lèvres de l’excision, on constate seulement que la couche épithéliale normale s ‘amincit légèrement, ne comptant que deux à trois couches de cellules; puis elle s ’épaissit de façon uniforme, comptant huit à dix couches; la zone d’épaississement correspond exactement à l'aire de la partie excisée. En un point de celle aire, la couche épithéliale compte jusqu'à quinze couches de cellules. Les cellules basales s'étendent en une ligne continue et bien limitée du tissu propre; régulièrement cylindriques en cerlains points de la préparation, elles affectent ailleurs une forme irrégulièrement polyédrique.

Le tissu propre présente avec beaucoup de nelteté dans ses couches superficielles le type précédemment décrit de la

prolifération fibroblastique régulière. Les éléments fibroblastiques sont ordonnés en une couche régulière dont les parties superficielles sont immédiatement contiguës aux cellules basales de l’épithélium. L'agencement de cette couche génératrice est caractéristique, en ce sens que les éléments sousépithéliaux se présentent sous la forme de cellules fusiformes très allongées, à noyaux volumineux, mais dont les expansions protoplasmiques sont très grèles et très fragiles. Par endroits même, cette couche fibrillaire en voie de formation a été détachée de l’épithélium sur une certaine étendue, ce qui semble indiquer que les moyens d'union sont encore bien peu solides. La couche basale des fibroblastes ne se distingue, par contre, en rien du parenchyme normal et il est difficile, sinon impossible, de délimiter en prolondeur l'étendue primitive de la perte de substance.

Trois MoIs

Les coupes transversales ne montrent plus aucune trace de dénivellation, ni aucune modification importante aux points d'union du tissu régénéré et du tissu sain environnant. Toutefois, en partant des bords de la préparation vers le centre, on constate un épaississement très lent de l’épithélium qui, normal à la périphérie du carré, présente sur la plus grande étendue de celle surface jusqu'à cinq ou six couches de cellules. Mais, d'un bout à l’autre de la préparation, les caractères morphologiques de cet épithélium sont redevenus normaux : cellules basales régulièrement cylindriques, moyennes polygonales, superficielles aplaties. En outre, on distingue à nouveau une basale très nelle qui sépare l'épithélium du tissu propre, ce qui semblerait plaider en faveur d'une régénéralion intégrale de la membrane de Bowman.

Dans le tissu propre, aucune modification notable. L'épaisseur s'est encore accrue et nos mensurations micrométriques nous ont montré que sur les bords de la perte de substance et sur une distance de 1 à 2 millimètres, elle était identique à

celle du tissu sain. Il persiste néanmoins au centre une très légère dépression; il faut noter qu'à ce niveau les fibroblastes sont en plus grand nombre.

Six mois (Planche V, jig. 9)

Il n’y a plus aucune modification importante à noter soit dans l’épithélium soit dans le lissu propre. Les mensurations micrométriques comparatives montrent que le tissu régénéré a comblé à peu près complètement la perte de substance primitive. Celle-ci n’est plus reconnaissable que sur les bords. A ce niveau, il persiste sur une étendue très limitée un léger épaississement épithélial, vestige des éperons marginaux du début. De part et d'autre de cet épaississement, la couche épithéliale se continue sous un aspect à peu près normal. Les cellules basales cylindriques sont partout séparées du tissu propre sous-jacent par une ligne légèrement ondulée qui peut en imposer pour une reconstitution de la membrane basale. Le tissu propre est absolument normal d’un bout à l'autre de la préparation. Les couches superficielles ne se distinguent plus des couches profondes par aucun signe caractéristique. Les fibroblastes ont disparu, ce qui semble indiquer que le processus d’accroissement a pris fin. Il est possible sur un certain nombre de coupes de mettre en évidence les limites de l’ancienne perte de substance et de se rendre compte par conséquent de l'épaisseur et de l’étendue de la zone régénérée. En effet, dans ces préparations on observe que les fibres du parenchyme néoformé forment avec celles du parenchyme ancien (fibres intéressées par la section) des angles variables, contrastant avec la disposition régulière en lames stralifiées du reste de la cornée. Ces nœuds d’interseclion, analogues en tous points aux nœuds de contact déerits récemment par Magilot dans les greffes, ne sauraient donc ètre caractéristiques de la présence d’un greffon, puisque nous les voyons avec beaucoup de nelteté sur des pièces qui ne furent jamais recouvertes par la moindre greffe.

Si nous cherchons maintenant à dégager de l’étude minutieuse de la régénération aux différents stades une vue d'ensemble sur la marche générale du processus, nous verrons qu'on peut, avec Bonnefon et Lacoste, diviser en deux grandes périodes l’histoire de la régénération :

1° Une phase épithéliale.

2° Une phase conjonctive.

L'examen des coupes à partir de la cinquième heure jusqu'à la quarante-huilième heure nous donne des indications très précises sur le rôle de l’épithélium. Celui-ci, dès les premières heures qui suivent la kératectomie, s'emploie très activement à protéger la plaie et même à la combler en partie. A la cinquième heure, les cellules marginales commencent à se déverser dans la brèche; à la douzième heure, elles y forment un bourgeon qui surplombe l'excavation. Puis, très rapidement, de ce bourgeon partent des cellules qui ne tardent pas à recouvrir la perte de substance d’un vernis épithélial continu. On n'a observé encore au sein de l’épithélium d'autre mode de division que la division directe. À partir de la quinzième heure, la couche de revêtement de la plaie présente les premières figures de karyokinèse et ne tarde pas à devenir le centre d’une prolifération intense; monostratifié au début, le revêtement épithélial est à la 24e heure composé par un très grand nombre de couches. Cette masse épithéliale comble la plaie et par sa base épouse la surface irrégulière du fond de la plaie, envoyant des travées dans tous les interstices qu'il présente.

A la 48e heure, l’activité épithéliale a à peu près complètement cessé et l’on commence à noter au sein de la masse des signes évidents de dégénérescence. Certaines cellules présentent un noyau en pycnose, landis que le protoplasma se creuse en vacuoles et s'œdématie.

Le stade épithélial a pris fin. L'entrée en scène des éléments conjonclifs s'annonce par la présence déjà constatable à la 24e heure d'éléments lusiformes qui se trouvent groupés dans les couches superficielles du tissu propre, immédiatement au-