INFLUENCE DES SUBSTANCES TENSIO-ACTIVES SUR LA CELLULE VEGETALE

1° Sur les cellules des Phanérogames.

L'un des procédés employés par A. MiRIMANOFF et ENGLER fait appel aux feuilles d'Elodea canadensis. Dans des cristallisoirs en verre de même format, placés dans les mêmes conditions de température et d'éclairage, on immerge simultanément plusieurs feuilles proches du bourgeon, donc contemporaines et d’égale résistance. La toxicité des Mouillants est déterminée par la cessation des mouvements cytoplasmiques et surtout par la plasmolyse au moyen d’une solution 0,8 molaire de Saccharose. Conventionnellement est considérée comme non toxique toute solution qui n’entrave pas la plasmolyse après 24 heures d'immersion.

MIRIMANOFF et ENGLER ont été amené à la suite de leurs travaux aux conclusions suivantes:

Pour la cellule d’un Végétal supérieur étudié au moven de divers procédés, la toxicité d’un Mouillant ne dépend que de sa nature chimique. Elle est indépendante des propriétés physiques telles que la tension superficielle et le pouvoir mouillant.

En mettant en présence Mouillants et Antiseptiques, aucune exaltation ou diminution de la toxicité n’a pu être observé quelles que soient les proportions de ces deux types de substances dans la solution.

Les Mouillants non-ioniques se sont montrés les plus inoffensifs, leur toxicité étant pratiquement nulle. Les Mouillants cationiques se sont révélés les plus toxiques. Les Mouillants anioniques étudiés occupent une place intermédiaire.

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2° Influence des Substances tensio-actives sur les Végétaux inférieurs.

Ex. Aspergillus niger.

En ce qui concerne l’Aspergillus niger, les Mouillants anioniques, indépendamment de leur toxicité propre. du reste variant d’une substance à l’autre, exercent une influence exaltante sur l’Antiseptique quelle que soit la nature chimique de ce dernier. L’exaltation de l’Antiseptique par le Mouillant peut s’élever au coefficient 10. Tel n’est pas le cas avec les cellules des végétaux supérieurs.

Les Mouillants cationiques agissent dans le même sens, avec Aspergillus niger, quoique moins nettement. L'action ést plutôt additive qu’exaltante.

Avec certains Mouillants non-ioniques les résultats sont très inattendus: utilisés seuls à la concentration élevée de 2%, ils agissent nettement, comparativement aux témoins, comme facteurs de croissance. Indifférents à la concentration de 2%, ils deviennent légèrement toxiques (retardent la croissance sans l’inhiber complètement) à la concentration de 2 p. 10.000. Ceci s’applique — avec des différences légères — aux Crillex N° 6, 11 et 16 ainsi qu’au Tween 80.

Cette action <renversée» s'exerce aussi en présence de certains Antiseptiques comme le Sulfate d’oxyquinoléine. Les Mouillants non-ioniques s'opposent parfois à l’action de l'Antiseptique associé:

Toxique seul à 1/70.000, le Sulfate d'oxyquinoléine additionné dans le milieu de culture de 2% de Crillexz N° 6 et 16 ne conserve son action fungistatique qu’à partir de 1/10.000.

Ce n’est pas une exaltation décuplée, mais au contraire une action toxique diminuéé. Le Mouillant a agi comme un Antiseptique. Si le même Mouillant est ajouté à 2 p. 10.000, l’action du Sulfate d'oxyquinoléine est alors exaltée et le Sulfate d'oxyquinoléine est inhibiteur de la croissance du champignon à la concentration de 1/200.000.

3° Influence des Substances tensio-actives sur les Bactéries.

D’après ENGLER les expériences faites sur les Bactéries donnent des résultats peu intéressants au point de vue de l’exaltation.

Divers Mouillants anioniques (Laurylsulfonate de sodium, Duponol C) sont atoxiques à la concentration de 1% vis-à-vis du Staphylocoque doré en milieu liquide (Bouillon Liegic) de réaction proche de la neutralité.

Plusieurs chercheurs américains: BAKER, HARISON, WILER (27) étudiant l'influence des Mouillants sur la respira-

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tion des bactéries trouvent également une atoxicité complète avec le Duponol L.S. à la concentration de 1/3.000 sur le Staphylocoque doré. Les Mouillants anioniques se sont révélés presque indifférents vis-à-vis du Staphylocoque, contrairement aux Mouillants cationiques qui sont actifs jusqu’à la concentration de 1/30.000.

Dans l’action combinée Sulfate d'oxyquinoléine + Mouillant anionique aucune exaltation n’a pu être enregistré par ENGLER, contrairement à ce qu’il a observé pour les champignons. Les essais effectués avec Escherichia coli ont donné des résultats identiques.

Cependant divers auteurs ont observé que l’action antibactérienne de certains Antiseptiques pouvait être exaltée par l’addition de Substances tensio-actives en elles-mêmes dépourvues d’action germicide, du moins aux concentrations mises en œuvre. Par ailleurs, d’autres Substances tensioactives se sont révélées agir à la façon de facteurs de croissance, ajoutées seules à un milieu de culture, ou encore capables d’inhiber l’action d’un Antiseptique.

De ces travaux sur les bactéries il ressort d’une part que les différents auteurs semblent souvent en contradiction et que d'autre part nous n’obtenons aucun renseignement à propos de l’action des Mouillants non-ioniques seuls ou de l’association Mouillants non-ioniques + Antiseptiques. Le Tween 80 étant précisément un Moutillant non-ionique, nous avons eu l’idée d'étudier son action, à concentrations diverses, sur la prolifération du Bacillus subtilis.

Pour cette étude nous avons utilisé notre méthode de dosage au Colorant vital. En voici la technique:

Nous préparons une série de tubes à hémolvse contenant du milieu à l’Autolysat de levure et ensemencé à l’aide d’une émulsion de Bacillus subtilis dans du Sérum physiologique.

Comme pour le dosage proprement dit, nous plaçons les tubes 15 à 18 heures à l’étuve à 37°. Puis nous ajoutons dans chacun 0,05 cc. de solution de Tween80 dans l’eau distillée à concentrations différentes allant de 3°} à 1 p. 10.000, le tubetémoin recevant 0,05 cc. d’eau distillée.

Les tubes sont placés à nouveau à l’étuve à 37° pendant 6 heures. Nous les retirons et ajoutons une goutte de solution de Colorant vital.

Après quelques minutes, nous pouvons faire la lecture.

Nous observons que pour les concentrations allant de 1 à 3%, les tubes sont légèrement plus colorés que le tubetémoin, tandis que la coloration est moins intense pour une concentration de 1 p. 10.000. Aux environs de 1%, la coloration est identique à celle du témoin.

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Nous pouvons donc interpréter les résultats de la façon suivante:

1° Pour une concentration de 1 à 3% le Tween 80 agit, comparativement au témoin, comme facteur de croissance.

2° Pour une concentration de 1% le Tween 80 est indifférent.

3° Pour une concentration de 1 p. 10.000 le Tween 80 est légèrement toxique.

Ces faits se sont reproduits et confirmés lors de notre étude, à l’aide de la même méthode, de l'association Tween 80 + Phénol.

En se plaçant dans les mêmes conditions et en opérant selon notre technique, nous constatons qu’il faut une dilution de Phénol à 1/60 pour obtenir la bactériostase.

Si nous ajoutons à la solution de Phénol à 1/60 une solution de Tween 80 de façon à avoir 1 à 3% de Tween, nous constatons que la concentration en Phénol n’est plus suffisante pour obtenir la bactériostase. I1 faut dans ce cas une concentration de Phénol se fixant à 1/55.

Dans le cas où nous associons le Tiween 89 à 1%, nous n’observons pas de modification tandis qu’à 1 p. 10.000 la concentration en Phénol nécessaire pour obtenir la bactériostase est de 1/65.

Nous avons complété cette étude en considérant l’action réciproque de la Pénicilline et du Tween 80 en présence d’'Huile d'arachide, c’est-à-dire dans les conditions mêmes où nous nous plaçons pour le dosage d’un Antibiotique insoluble dans l’eau, la bactérie-test étant toujours le Bacillus subtilis.

Nous avons fait simultanément deux dosages de sel sodique pur cristallisé de Péncilline G. L’un à l’aide de dilutions de Pénicilline dans l’eau, l’autre avec des suspensions équivalentes de Pénicilline dans le mélange à parties égales de solution aqueuse de Tween 80 à 1% et d’Huile d’arachide. Ces deux dosages nous ont donné rigoureusement les mêmes résultats. |

Il en résulte que le mélange Tween + Huile d’arachide n’a aucune action inhibitrice ou exaltante sur la prolifération du Bacillus subtilis en présence de Pénicilline et par conséquent cette dernière peut être dosée, comme en solution aqueuse, en suspension dans le mélange Tiween + Huile darachide, c’est-à-dire de la même manière qu’un Antibiotique insoluble dans l’eau.

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