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comme néphrophagocytes, car, sans nul doute, ces éléments amiboïdes sont capables, non seulement d’excréter les liquides,

mais probablement aussi de phagocyter les particules solides injectées *. A 2 Si l’on injecte des solutions colorées à des animaux appartenant à des. groupes zoologiques autres que ceux cités ci-dessus, on constate que certains leucocytes fixent encore les colorants, mais par un procédé autre que celui employé par les cellules des reins ouverts, les néphrocytes et les néphrophagocytes.

. En effet, il ne s’agit plus alors d’un phénomène de sécrétion plus ou moins lent. Le réactif ne se retrouve plus concentré sur des boules ou des grains de sécrétion, mais au contraire il est simplement et très rapidement fixé par toute la surface du corps cellulaire. Ce sont ces phénomènes de fixation expérimentale des substances colorées que nous allons étudier comme types de phénomène d'élimination normale.

HisroriQuEe. — Quelques auteurs ont déjà signalé la faculté que possèdent les leucocytes vivants de fixer certaines matières colorantes. Ils interprètent rarement les faits et se bornent, le

plus souvent, à signaler qu'il s’agit là de colorations vitales banales.

Ainsi, Certes (1881) a remarqué que les cellules lympha-

tiques de la Grenouille pouvaient se colorer dans une solution faible de cyanine.

Kowalevsky (1888) a vu aussi le bleu de méthylène colorer les globules blancs de la Grenouille.

de globules, des amibocytes hyalins possédant un petit noyau et un cytoplasme pourvu d’une grosse vacuole dans laquelle se concentre le colorant injecté. È

Chez les Sipunculiens, le mème réactif est excrété seulement par des cellules

amiboïdes spéciales qu’on trouve en abondance cans l’épaisseur de l'intestin. Après l'élimination de ce réactif, le corps cellulaire renferme des granulations (naturellement Jaunes) toutes colorées en rose.

. Chez les Échinodermes et les Tuniciers, Cuénor a constaté que les globules éliminant le carmin ammoniacal peuvent aussi phagocyter des particules d'encre de Chine. Chez les Oligochètes et les Sipunculiens, le pouvoir phagocytaire des globules qui prennent le carmin ammoniacal n’a pas encore été constaté.

1. À côté des néphrocytes et des néphrophagocytes fixes représentés soit par des cellules conjonctives éparses ou réunies en organes, soit par des cellules endothéliales, il existe donc, dans les groupes étudiés par Cuénor, des néphrophagocytes mobiles représentés par des amibocytes.

Hele IT À

Harmer (1891) et Calvet (1900) observent des leucocytes de Polyzoaires marins ayant séjourné dans des solutions de carmin d'indigo, de brun de Bismarck et constatent qu'ils se chargent de ces colorants !.

De Bruyne (1896) a remarqué que les globules sanguins se colorent chez des Lamellibranches vivant dans des solutions très étendues de bleu de méthylène.

Carles (1904), après avoir injecté du bleu de méthylène dans le péritoine d’une Grenouille et dans le tissu cellulaire d’un Lapin, à constaté que « les leucocytes absorbent le colorant ».

Enfin, Courmont et Montagard (19092) ont oo d'utiliser la ace vitale des globules blancs pour faciliter les exa- . mens du sang et aider à la numération de ces éléments.

Tecunique. — Nos recherches ont porté sur l'Homme et sur quelques animaux choisis dans divers groupes de la série :

Mollusques [Escargot (/Æelix oo Limace (Limaz agresls)],

Crustacés (Écrevisse),

Insectes (Grillon champêtre),

Arachnides (Tégénaire),

Batraciens [Grenouille rousse (Rana temporaria)],

Mammifères (Lapin).

Sauf chez l'Homme, nous avons expérimenté, nr vivo, en injectant des réactifs colorés, soit dans la cavité générale, soit dans le système circulatoire (Grenouille, Lapin). Au bout d’un temps plus au moins long, variant d’une minute à quelques heures, nous examinions une goutte de sang placée sur de l’huile de vaseline entre une lamé et une lamelle.

Chez tous les animaux cités et chez l'Homme, nous avons expérimenté, #n vitro, en plaçant directement sur une goutte d'huile de vaseline, d’abord une trace du liquide! coloré, puis une goutte de sang. Les essais étaient effectués, suivant les cas, à la température ordinaire ou à celle de 38° environ obte-

1. Cependant, d'après les dessins donnés par Calvet, il semble que les globules aient excrété la vésuvine. Il faudrait alors rapprocher ce cas de ceux décrits par Cuénor.

nue à l’aide d’une platine chauffante lorsque nos recherches portaient sur le sang des Mammifères.

Comme liquide coloré, nous avons fait choix presque exclusivement de deux réactifs : le carmin ammoniacal privé de toute trace d’ammoniaque en excès et la solution aqueuse de bleu de méthylène au millième. Ces colorants présentent une série d'avantages qui nous les ont fait choisir de préférence à d’autres. Au titre auquel nous les avons employés, ils ne sont toxiques ni pour les globules, ni pour les animaux en expérience. Ils possèdent un pouvoir colorant intense de telle sorte qu'il suffit d’en injecter de petites quantités pour retrouver colorés les éléments qui fixent ces réactifs. Le fait est de la plus haute importance, car, en injectant de petites quantités de réactif, on ne trouble pas l’équilibre des liquides de l’organisme et on modifie peu ou point l’état physiologique de l'animal sur lequel on fait des essais.

De plus, le carmin ammoniacal et le bleu de méthylène sont des colorants nucléaires. Comme le rapportent Fischel (1901), Galeotti (1894), de Beauchamp (1909), etc., el comme nousmême l’avons toujours constaté, ces réactifs ne colorent que

les noyaux des cellules mortes (des cellules fixées, par exem-

ple). Les colorants que nous avons utilisés permettent donc de reconnaître l’état de vie ou de mort de la cellule dont le cytoplasme ou certains corps inclus ont fixé le colorant. Quelles que soient les parties colorées de la cellule, si le noyau est demeuré incolore, nous avons lassurance d’être en présence d’un phénomène physiologique.

Les réactifs choisis ne possèdent point d’affinité spéciale pour les produits d’inclusion. Nous avons, par exemple, évité d'employer des solutions qui auraient pu colorer des inclusions de produits graisseux, ou des vacuoles à grains de ségrégation (Renaut, 1907), etc.

De même, il était tout indiqué, pour étudier la fixation des produits colorés par les leucocytes, de ne pas prendre, comme : Font fait certains auteurs, la solution iodo-iodurée de Gram ; l’iode, en effet, à moins de l’employer à des doses infinitésimales, tue le cytoplasme (propriété qui le fait du reste employer comme fixateur). L’acide picrique agit d’une manière analogue.

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