CHOLINE ET BASES VOISINES
Recherche de la choline.
Nous ne possédons aucune méthode qui nous permette de caractériser sürement la choline dans le liquide céphalo-rachidien, Toutes, à des degrés divers, sont sujettes a erreur, aussi la question de la choline rachidienne, pour être comprise, exige-t-elle essentiellement un éxposé des techniques successivement employées.
a) Méthode au PtCli.
La choline ou triméthyl-oxyéthylammonium à la fois base et alcool donne des sels et des éthers. Sa formule est:
CH3 SatEr CDN E CHe CH OH CH Le chloroplatinate (CSHHO2NCI) PtCH, bien cristallisé en tables rhomboida-
les obliques, soluble dans l'alcool faible de 15 à 20°, insoluble dans l'alcool
fort, sert le plus souvent à séparer cette base (4). PC En solution aqueuse ou alcoolique faible, les cristaux que l’on obtient sont des oclaèdres à une molécule-d’eau.
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(1) Le liquide en question renfermait 5 grammes d'albumine et seulement de petites quantités de mucine. AO TAN A ue HE
‘à es encore, pour les précipikés formés à froid par Da acétique dans le liquide RER E PAS Rater FASO de-RivazTa et de MOoriITz.
3) C. R. Soc. Biologie, décembre : 7. LAS
4 Voyez, pour les propriétés des sels du chlorure, le travail de GULE NrrScH. Zeilsch. für physiol. Chimie. T. 24, p. 513, 1898.
20 NÔTIONS TECHNIQUES ;
Technique de Mott el Halliburton. — Une dizaine de ce. de liquide céphalorachidien sont additionnés de 6 volumes d'alcool absolu et filtrés. Le filtrat alcoolique est évaporé à siccité (à 40° C.) et repris par l'alcool absolu. Après firation on évapore de nouveau la solution et reprend encore de la meme facon. On recommence ainsi ? fois cette opération afin d'éliminer les sels de potassium. d sv 1 j
Le dernier résidu, repris par 10 cc. d'alcool, est additionné de PtCH en solution alcoolique. Le chloroplatinate obtenu est lavé à l'alcool absolu et dissous dans de l'alcool à 15°/..
On fiitre, pour séparer le résidu insoluble qui ne serait pas du sel double de choline. On évapore finalement le filtrat à 40° dans un verre de montre. En présence de choline, on voit,à un faible grossissement? des cristaux oclaédriques caractéristiques.
Technique de Donafh. — Quelques années plus tard, Donaru, étendant les recherches de Morr et HALLIBURTON, et de GumprecuT (1900), indique une
: méthode au chlorure de platine peu différente de la précédente, dans laquelle cependant le liquide céphalo-rachidien est évaporé à sec au bain-marie, après avoir été légèrement acidulé par l'acide chlorhydrique. Le résidu obtenu est repris par l'alcool absolu. DonarH recommande l'emploi d'un alcool réel-
‘ lement à 100°, afin de ne pas dissoudre les sels de K ; il indique de plus de ne pas prolonger inutilement le contact (Rép. à MANSFELD).
Les solutions alcooliques obtenues sont enfin additionnées d’une solution
æ de PIC dans l'alcool absolu. Le dépôt formé, assez polymorphe, est examiné au microscope. Les pointes de lance, les tables hexagonales, les croix, les | aiguilles rayonnantes ou en gerbes, les prismes, seraient des sels de choline, alors que les octaèdres proviendraient des sels de potassium ou d’ammonium.
Seconde technique de Donath. Emploi des nicols croisés. — A la suite d'une polémique avec MANSFELD qui mettait en doute la nature des cristaux isolés, DonaTux crut trouver une solution satisfaisante dans lexamen entre nicols croisés des cristaux de chloroplatinate obtenus.
Le chloroplatinate de choline est, en effet, biréfringent. GuMprEcuaT (1900) avait déjà utilisé la lumière polarisée pour mieux caractériser ces cristaux. DonarTa, en 1906, et 1907 ne fit que reprendre cette propriété.
‘Donaru à cet effet traite 20 à 30 cc. de liquide céphalo-rachidien par 1/2 à 1 cc. de COSK2 à 5 p. 100. Il filtre pour éliminer les carbonates alcalinoterreux ; évapore, ét reprend le résidu par l'alcool absolu acidifié par HCI ; évapore de. nouveau, reprend par l'alcool absolu, filtre et ajoute au liquide filtré Occ.3 à 0 ce. 4 de PICI# à 5 p. 100 dans l'alcool absolu. Le précipité est 1 rassemblé, lavé par 1 à 3 cc. d'alcool absolu et dissous dans autant d'eau :
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chaude. À cette solution l’on ajoute Oce. 3 à Occ. 4 d’une solution de KCI à ES p. 100 (qui équivaut volume à volume au PC employé). Après avoir séparé le précipité formé immédiatement, on prélève une goutte de liquide clair que l'on abandonne vingt-quatre heures à la dessiccationf sur une lame porte- À objet. Le résidu cristallin est monté à la paraffine. Examinés à la lumière polarisée, seuls les cristaux de chloroplatinate de choline restent éclairés et se détachent sur un fond noir. Ce sont des lamelles des bâtonnets, des aignilles droites ou courbes parfois arrangées en touffes,, en gerbes ou en rosettes, Ce sont encore des croix, des prismes, etc. Lés sels doubles de potassium, d'ammonium, qui appartiennent au système
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