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b) Recherche de la choline par la formation de son periodure. s!

Une solution de choline salifiée par un acide, et additionnée de réactif iodoioduré fort, laisse déposer, pour un excès d'iode, de fins cristaux noirâtres ou bruns foncés ressemblant à ceux de TE1CHMANN ou de FLORENCE, et dont

* la formule est ( | | [C'HUNOT. [8] (1)

A l'air, ou pour une dose insuffisante d'iode, un pentaiodure huileux prend seule naissance. : ; : k

Cette réaction, déjà utilisée par GrIessE et HarroN en 1885 pour la recher-

. che de la choline dans des mouts de bière, a été étudiée sur le sperme par . FLORENCE, BocaRrius, el reprise au point de vue de l'étude de sa spécificité, par STRUVE et DENIGES en 1900.

Gumprecar la même. année et surtout ALLEN en 1904 l’ont appliquée au liquide céphalo-rachidien ; ROSENHEIM, ZIVERI, HANDELSMAN, KAJIURA, Morr, etc., les ont suivi bientôt dans cette voie.

Technique de Denigès. — Le liquide céphalo-rachidien faiblement acidulé par l'acide acétique est porté quelques instants à l’ébullition et filtré afin d'en séparer l’albumine. \

Le filtrat est évaporé au bain-marie à 1/10. Une goutte en est portée sur une lame porte-objet. À côté l’on dispose une goutte de liquide de Florence modifié comme suit :

TOO SSSR Re pe ane ne lee bre ne 6 ARC TR AR A A D RE SE Tee EM EL ER Sa 8 À PNR Er re ES AN Se EC REA RE AL EE 150

Par diffusion les deux gouttes se mélangent; on couvre à ce moment d'une lamelle et l’on examine à 400 ou 600 diamètres. La présence de choline se manifeste par l'apparition de cristaux brun noirs rappelant assezles cristaux bien connus d'hémine.

Si cette première opération n'a rien donné, on reprend le filtrat, on y ajoute 10 ce. d’alcool, on porte quelques minutes à l'ébullition. Puis on filtre, et évapore au volume de quelques gouttes seulement pour essayer sur ce résidu la réaction de Florence. Les sels de potassium et d'ammonium ne gênent en aucune façon.

La réaction est très sénsible.— Gumprecar décèle ainsi 0 gr. 005 de choline

(1) Sraxek. — Z. für physiolog. Chemie, &. XLVI, p.281, 1905.

(en solution pure) par litre. — Rosenueim (1907), dans le sang, indique une limite de sensibilité de 0 gr.050 (1). | /

Formation des cristaux de peripdure de choline à parlir du précipilé plalinique. — L'obtention des cristaux ci-dessus n'est pas moins facile en parlant du précipilé platinique fourni par l'une ou l'autre des techniques déjà

‘indiquées. |

Il suffit de glisser sous la lamelle qui les recouvre une goutte du réactif de Florence modifié, pour voir aussitôt les cristaux disparaitre, et se transformer, s'il s'agit de choline, en prismes bruns-foncés qui croissent jusqu'à présenter des dimensions macroscopiques. Is ont un déchroïsme marqué el possèdent la double réfraction. Abandonnés à l'air, ils se transforment en gouttelcttes brunâtres par perte d'iode (GuMPRECHT, ROSENHEIM).

c) Autres méthodes de recherche de la choline.