PIGMENTS BILIAÏÎRES AS CA

On décante le liquide qui surnage, et on le remplace par 7 à 8ce. d'eau. À l’aide d'un petit agitateur, on remet en suspension le précipité barytique et | l'on centrifuge à nouveau. Après quelques minutes de rotation, le précipité

étant rassemblé, on décante et jette l'eau de lavage que Fon remplace par 2 cc. de liqueur d'Huez au centième additionné de 1 ce. d'HCI pur.

La liqueur d'Hüsz n/100 se prépare en mélangeant, au moment de l'emploi, parties égales des deux solutions suivantes : iode 0 gr. 13 dans 100 d'alcool à 9%, el HgCP 0 8x. 16 dans 100 du même véhicule.

Sous l’action de l'acide chlorhydrique, le bicarbonate se dissout (refroidir au besoin légèrement le tube durant cette opération). FES

Quand le dégagement d'acide carbonique a cessé, boucher avec le pouce et agiler énergiquement pendant quelques minutes. L F2

Le tube est enfin abandonné un moment à lui-même (1), puis centrifugé, une dernière fois pour rassembler le chloroforme.

C'est la coloration du chloroforme qui doit retenir l'attention. |

Celle-ci est dans la majorité dés cas d’un beau vert pré, quand le liquide essayé renferme des pigments biliaires en certaine quantité; mais elle peut varier, suivant l'abondance plus ou moins grande de ceux-ci, des teintes les plus tendres au vert bouteille foncé.

Cette coloration du chloroforme $s'accentue avec le temps, au fur et à mesure que l'oxydatiôn des pigments se fait. Y aurait-il donc doute au début, pour une raison quelconque, il convient d'observer le tube -un, jour ou deux.

Le procédé est d'une exquise sensibilité pour la recherche des pigments biliaires.

L'hémoglobine et l'urobiline ne donnent en aucune. façon la coloration ci-dessus. Le chloroforme devient simplement jaune-brun ou brun en leur présence et conserve sans variations cette teinte.

La présence d'urobiline en petite quantité, à côté des pigments biliaires ne gène pas. On remarquera seulement, qu'une teinte rosée précède la teinte verte, l'urobiline diffusant plus rapidement que la bilirubine dans le chloroforme.

La connaissance de cette particularité a son importance ; elle permet dans certains cas de mettre nettement en évidence à côté des pigments biliaires de petites quantités d'urobiline. Celle-ci peut en outre être caractérisée au microspectroscope par la bande à la limite du vert et du bleu que présentera la solution. Les pigments biliaires purs ne donnent aucun spectre.

Procédé Grimbert. — GrIMBERT ajoute au liquide à examiner la moitié de son volume de BaCI2 à 10 p. 100 (2). Agite vivement, filtre, lave avec un peu d’eau distillée et entraîne par 5 cc. d’alcoo!l à 90° acidulé par 5 p. 100 d'HCI

(1) 1 n'y a même aucun inconvénient à le laisser ainsi jusqu'au lendemain.

(2) Dans le cas du liquide céphalo-rachidien il conviendrait d'ajoutei encore, aprés l'addition de chlorure de baryum, 3 cc. de bicarbonate de soude, comme il a été fait dans'le procédé Jozces moditié.

4ÿ NOTIONS TECHNIQUES

en volume. Le filtrat porté au bain-marie bouillant une minute laisse développer une belle coloration verte (1). à

Recherche de l’urobiline.

Il n'est pas pour cette recherche de procédé aussi sensible qu'il serait désirable. Souvent l’on en est réduit à suspecter seulement la présence d’urobiline par les particularités remarquées lors de la recherche des pigments biliaires.

Voici néanmoins un procédé assez recommandable dû à Morez et Monon(?), . utilisé par ces auteurs pour le sérum, et que j'ai eu l'occasion d'appliquer au

liquide céphalo-rachidien.

Trois ec. de liquide à essayer (3) sont additionnés de 30 cc. d'alcool à %5°

et chauffés 20 minutes au refrigérent ascendant; filtrés, et réduits à 3 cc. au bain-marie (4). Après refroidissement, on ajoute une goutte du réactif d'OBERMAYER au 1/100 (HCI : 50 ec. perchlorure de fer 0 cc. 10), puis ? cc. de réactif zincique (solution d'un gramme d’acétate de zinc dans 100 cc. d'alcool

à 95°; la clarification étant obtenue par l'addition d'acide acétique). On laisse

reposer vingt-quatre heures à l'obscurité, filtre et recherche au foyer d'une

lampe à arc, la fluorescence que développe l'urobiline.

FROIN a fait usage dans ses recherches du procédé ofdinaire au chlorure de zinc et à l'ammoniaque.

TROISIER à employé le procédé GRIGAUT (5), qui consiste à oxyder par Fe?Cl6; à précipiter les albumines à l'ébullition par SO4Na, et à extraire par le chloroforme thymolé à 15 p. 100 (Aucué). Le chloroforme séparé est traité par une solution alcoolique de ZNC1. La fluorescence est recherchée dans un éelairage intensif.

Sels biliaires.

Recherche par la tension superficielle. — Les sels biliaires abaïissent fortement la tension superficielle ; c'est donc là un moyen physique de les rechercher. On emploiera à cet effet avec avantage le compte-goutte de DucLaux que nous avons décrit aux mesures physiques. Le nombre des gouttes est augmenté.

Réactions de Ilay el de Pellenkofer. — La réaction de HAy est bien connue (chute du soufre en fleur). Celle de PETTENKOFER ne saurait être effectuée

(1) La limite de sensibilité du procédé GrimBert serait, d'après JAvAL, qui tee sur des solutions de bile, de 1/600° (Soc. Méd. des Hôp., 23 juillet

(2) Morez et Moxop. — C. R. de la Soc. de Biologie. T. 64, p. 205, fév. 1908.

(3) 11 est préférable d'employer 6 cc. que: l'on réduit de moitié par ébullition dans le vide.

(4) Mieux vaut faire cette réduction par ébullition dans le vide comme je l’aiindiqué en note p…. 2

(>) GriGauT. — Recherche de l’urobiline dans le sang et dans les humeurs de l'organisme. C. R. Soc. de Biologie, 8 mai 1909. T. 66, p. 725.

UROBILINE. — PERMÉABILITÉS 49

sur le liquide céphalo-rachidien directement, comme la chose a été faite. La technique à employer est la suivante :

Quelques centimètres cubes de liquide sont évaporés au bain-marie. Le résidu est broyé avec ? cc. d'alcool chaud acidifié par un peu d'acide acétique, puis filtré ou centrifugé.

1 ce. du filtrat es additionné d’une goutte d’une solution de saccharose à 1 p. 100et, avec les précautions d'usage, de 1 ce. d'acide sulfurique. Au point de séparation des deux liquides, un anneau violet se développe s’il y a des sels biliaires. La recherche de la bande dans le jaune permet de pousser plus loin encore l'identification de celle-ci.

PERMÉABILITÉ MÉNINGÉE

Perméabilité aux nitrates.

Je développerai ailleurs les avantages que présente l'emploi des nitrates sur celui des iodures et les autres sels employés jadis pour apprécier la perméabilité méningée. Je n'indique ici que ce qui est relatif aux techniques à suivre. ; 4

Dose de nitrale à donner au malade. — Le malade prend, {rois heures avant la ponction, sous forme de cachet, une dose de nitrate de soude calculée à raison d’un gramme de nitrate par 30 kilos de poids. En même temps que les cachets, on lui fait boire un bol de tisane.

Les adultes reçoivent ainsi 2? grammes en règle générale ; les enfants 1 gramme à 1 gr. 50.

Recherches et dosage des nitrates dans le liquide de ponction. — Le liquide de ponction centrifugé est essayé comparativement avec des solutions à 20, 30, 40, 50, 60, 70 milligr. d’azotate de soude par litre. Ces solutions sont préparées exlemporairement par dilution d’une solution à 1 p. 100 de nitrate de soude, qui se conserve parfaitement.

L'’essai comparatif se fait de la façon suivante :

Dans trois verres à pied bien propres, disposés sur une feuille de papier et devant un fond blanc, on introduit dans chacun 3 ec. d'acide sulfurique ; III gouttes de diphénylamine en solution sulfurique (diphénylamine : 1 gr. dans 100 cc. d'acide sulfurique pur à 75 p. 100 en volume) (1); puis, avec précaution : IIT gouttes de la solution à 30 milligr. dans le premier, IIT gouttes de la solution à 60 par exemple dans le troisième, le verre du milieu recevant III gouttes de liquide-essayé (2). Les gouttes des solutions nitratées

(1) Cette solution se conserve assez bien, mais doit cependant être renouvelée tous les mois ou tous les deux mois sous peine d'augmenter par trop la sensibilité de la réaction. : R

(2) Pour les liquides dont la teneur en nitrates est très faible, il peut être utile d'ajouter IV, V et même VI gouttes.

doivent être déposées à la suface même du liquide, puis réparties unifor

mément dans les couches toutes superficielles, à l'aide d’un agitateur propre

dont est muni chaque verre. Il convient d'opérer vite pour que les réactions se fassent partout avec autant de parallélisme que passible. Des anneaux bleus apparaissent dans les différents verres. On veille à leur bonne formation en mélangeant de temps à autre les couches les plus voisines de la surface. Au bout d’un moment, les anneaux bleus étant bien développés, on peut uniformiser par agitation le contenu de chaque verre, et comparer les colorations obtenues.

On situe ainsi fort aisément tel liquide entre les solutions 40 et 50 par exemple ; avec un peu d'habitude, on fixe même assez exactement la position occupée par le liquide entre ces deux limites.

Perméabilité à l’iodure.

Les auteurs ne sont pas d'accord sur la dose à donner. Ce sont cependant toujours des doses fortes : ? à 5 grammes par exemple, cela pendant plusieurs jours.

Recherche de l’iodure. — L'emploi dela méthode suivante, qui est sensible, est d'une mise en œuvre facile ; elle évitera peut-être l'obtention de résultats paradoxaux, comme il en a été quelquefois publié.

On mélange, pour rechercher l’iodure, dans un tube à essai : 2 cc. d'acide sulfurique au dixième; 1 cc. d'empois d’amidon à 1 p. 100, et II gouttes d’une solution olitenue en dissolvant gros comme une tête d’épingle de nitrite de sodium dans 30 cc. d’eau distillée. Puis on verse avec précaution, dans le tube, ainsi préparé, 1 à 2 cc. du liquide céphalo-rachidien essayé. Si le liquide renferme des iodures, un anneau bleu ne tarde pas à se montrer. La réaction est sensible à 1/100.000, soit : 10 milligr. d'iodure par litre.

L'empois d’amidon et la solution de nitrite doivent être de date relativement récente. >

La recherche d'autres perméabilités n'est pas d'un usage courant; nous donnerons en note, à propos du plomb et du mercure, quelques renseignements sur la façon de rechercher ces métaux