RÉACTIFS
tie côté et d'autre la lamelle sur la préparation. On obtient ainsi une couche liquide d'égale épaisseur, on multiplie les points d'adhérence entre les deux lames et on arrête les mouvements amihoïdes. Quand on observe des êtres vivants de faibles dimensions, (infusoires, algues), on place un morceau de papier ou un fil de soie entre les deux lames, pour ne pas exagérer la pression subie par l'objet; c'est aussi ce qu'il faut éviter, quand on observe les mouvements des liquides dans les parties molles d'une plante. (Chevelu des racines de ÏHydrocharis morsus ranœ, poils de VUrtica urensy etc., etc.)
Les objets minces et transparents que la lumière ne traverse pas assez, seront rendus plus visibles par la coloration artificielle. Suivant leur structure, on emploie des solutions aqueuses étendues d'iode, d'acide chromique, de chloi 'ire ferrique. Pour préparer la solution d'iode, on rhélange 1 à 2 gouttes de teinture d'iode avec 450 gouttes d'eau environ, ou 150 gouttes du mélange indiqué plus haut et composé de : glycérine pure, 70; alcool, 15 ; eau, 15. Pour obtenir une coloration plus intense, on mélange de 2 à 4 gouttes de teinture d'iode avec 50 gouttes d'eau et 50 gouttes d'alcool. Pour mieux étudier la structure des objets délicats et transparents, on fait macérer la préparation dans la solution de matière colorante d'après le procédé indiqué précédemment.
Conservation des Préparations. — Il est d'un trèhaut intérêt pour le micrographe de conserver lepréparations dans leur état naturel. Les précautiondiffèrent, suivant la nature de l'objet à étudier, suivant l'expérience de l'opérateur. On ne peut donner que quelques éclaircissements généraux.
Bon nombre de préparations (précipités chimiques, carapaces siliceuses, cheveux, écailles de poisson ou d'insectes, fils de tissus, etc.) doivent être conservées sèches. On place sur l'objet une mince lame, que l'on fixe sur le porte-objet avec un morceau de papier coloré, troué au milieu pour montrer la préparation. On se sert aussi, pour recouvrir les deux lamelles, d'une solution concentrée de gomme arabique. Pour les faire adhérer plus complètement, on les presse l'une contre l'autre. Sur le papier, on écrit le nom de l'objet.
Quant aux détritus organiques assez humides pour donner lieu à la formation de moisissures, on les recouvre d'une goutte d'un liquide contenant 1 partie de térébenthine de Venise et 100 parties de térébenthine de Bordeaux. Quand la goutte s'est desséchée dans un endroit à l'abri de la poussière, , on place le couvre-objet et on colle. Beaucoup de préparations qui sont toujours saturées d'humidité doivent être conservées dans un liquide qui, semblable aux liquides normaux, n'exerce aucune action
dissolvante et ne facilite pas la formation de moisissures. On emploie un liquide composé d'un peu d'acide phénique et d'une solution filtrée de chlorure de calcium dans de la glycérine, étendue de 5 ou 6 fois son poids d'eau. On peut encore se servir d'une solution de 1 partie de colle transparente dans 2 parties d'acide acétique étendu. Cette conservation au chlorure de calcium convient à la plupart des corps organisés (infusoires, mites, vers, substance cellulaire, cerveau, moelle, poils, écailles, etc.) et de plus à un grand nombre de substances végétales. Il ne faut cependant pas oublier que cette solution gonfle les grains de fécule et les rend plus transparents. Si l'on veut qu'ils gardent leur forme naturelle, on ne doit pas se servir de chlorure de calcium, mais de glycérine étendue (i^^ mélange).
Parmi les liquides destirîCs aux corps organisés qui subissent facilement la putréfaction, et qui demandent à être conservés humides, on peut citer les mélanges suivants :
Glycérine 70
Alcool 15
Eau distillée 15
Glycérine 100
Eau distillée 80
Sublimé corrosif. . . 1
Glycérine 100
Alcool 50
Eau distillée 50
Acide phénique .... 3
Glycérine 50
Chlor. de calcium, . . 20
Eau distillée 100
Alcool 30
Glycérine 100
Chlor. do sodium ... 10
Acétate d'alumine . , « 5
Eau distillëe 60
Glyce'rine 100
Eau distillée 100
Acide chlorhydrique . 5^
Sublime corrosif. ... 1
Il faut ensuite clarifier ces divers mélanges en^ filtrant, laissant déposer en vase clos et décantant.
On laisse la préparation macérer plusieurs heures, plus longtemps même si c'est nécessaire, jusqu'à ce qu'elle soit imbibée. On la porte sur la platine on y ajoute une goutte du mélange, additionné de l£^ moitié de son poids d'alcool. On répète cette opéra tion après l'évaporation du liquide, jusqu'à ce que la préparation paraisse suffisamment humectée. Leé substances animales qui se putréfient facilemeni exigent le mélange II, par exemple ; les globules du sang, le mélange III ; les corps organisés colorés, lé mélange V ; les animaux microscopiques, les alguesj le mélange IV ; la plupart des préparations végétales, les mélanges II et IV; les grains de fécule, 1 mélange I.
On ne doit pas employer la coloration par l'acid chromique en même temps que les mélanges précé dents ^ ; au contraire, l'acide chromique s'accommod très bien de la solution aqueuse de chlorure de cal cium. Pour colorer les grains de fécule, on se sert]
* En pre'sence des composés organiques qui entrent dana les mélanges précités, l'acide chromique, oxydant trî énergique, serait immédiatement réduit.
de l'eau iodée ou d'une solution iodurée contenant 2 parties d'iode, 3 parties d'iodurede potassium, 70 parties de glycérine, i5 parties d'eau, d5 parties d'alcool.
Les liquides et les mélanges conservateurs pour les préparations microscopiques sont pour la plupart assez connus : Dane recommande un mélange de 4 parties de glycérine, 2 parties d'eau distillée, 1 partie de gélatine ; Beale, un mélange de glycérine et de colle (chauffer le mélange avant de s'en servir). Farrants emploie parties égales de gomme arabique de glycérine et d'une solution aqueuse saturée d'acide arsénieux. On prépare le liquide de Goadhy [consa*^ ving liquor) avec : chlorure de sodium, 60 grammes ; alun, 30; sublimé corrosif, 0,13; eau distillée bouillie, 1300 ; on filtre : (excellente préparation). Pacini emploie deux liquides) ^ie premier se compose de : sublimé corrosif, 1 partie ; chlorure de sodium pur, 2 ; glycérine, 13 ; eau distillée 113 ; et le second de : sublimé corrosif, 1 ; acide acétique, 2 ; glycérine, 43 ; eau distillée, 215.
En outre, on conserve les préparations sèches (fragments d'insectes, spores, pollen) dans le baume de Canada, sorte de térébenthine que l'on peut remplacer par de la térébenthine de Venise limpide. Si cette matière est trop épaisse, on l'étend avec de l'essence de térébenthine jusqu'à consistance convenable.
La coloration des préparations est avantageuse plusieurs points de vue; la matière colorante fiv en effet ressortir les détails avec bien plus d'énergie Les matières colorantes les plus employées sont : *1 carmin d'indigo en solution aqueuse, la rosanilin< la teinture de bois de Campêche. On dissout une pai tie de carmin d'indigo dans 100 parties d'eau distillée et 8 d'alcool, une partie de rosaniline dans un mélange de 100 parties d'alcool et de 100 parties d'eau. La teinture de bois de Campêche est préparée en faisant macérer 20 parties de bois de Campêche concassé dans 20 parties d'alcool et 30 d'eau. Chacune de ces solutions doit être filtrée au papier.
3 à 5 parties de ces solutions sont mélangées à 100 parties de l'un des 6 liquides conservateurs formulés plus haut. Avec le dernier mélange, on peut ramollirla préparation pour la porter souslalamelle dans le liquide incolore. Pour colorer en noir le contour des objets, on humecte la préparation avec une solution de nitrate d'argent, (1 partie de nitrate d'argent pour 30 d'eau distillée). Après une demiheure à une heure de contact, on lave à l'eau distillée et on porte la préparation sous le couvreobjet avec les liquides I ou IL Les liquides III et IV ne doivent pas être employés ici ^
* La présence de l'acide chlorhydrique ou des différcnl chlorures contenus dans les quatre derniers mëlangesy interdit l'emploi simultané d'une solution argentiqne.
Voici comment on place le couvre-objet sur la préparation : avec une pince à ressort, on saisit la lamelle sèche et propre par un des coins, on l'enduit sur un espace de 2 à 3 millimètres à partir du bord et sur la face qui regarde l'objet avec un des vernis dont nous parlerons plus bas. On place ensuite le couvre-objet sur la préparation recouverte de la liqueur conservatrice, on saisit les deux lames entre le pouce et l'index de la main gauche sans les presser, on dessèche avec du papier buvard les bords du couvre -objet ainsi que les parties voisines; on étend ensuite au moyen d'un pinceau tout autour du bord externe des couvre-objets, une large couche du vernis I ou II, de façon à ce que le vernis soit moitié sur la lame et moitié sur la lamelle. Dès que la première couche est sèche,^^n en étend une seconde. Au bout de quelques heures, vn en dispose une troisième. Enfin on en étend une dernière avec le vernis n" III. A chaque nouvelle couche, on dépasse de la largeur d'un fil la limite de la couche sèche. En maintes circonstances il est possible de placer l'objet dans un vernis agglutinatif, dont la transparence est particulièrement avantageuse. Il s'étend beaucoup plus loin dans l'intervalle des deux lamelles, et s'il déborde par pression, il se dessèche et se durcit bien vite. Le bord lui-même de la lamelle est recouvert d'un vernis analogue, auquel on a ajouté du noir, du
vert ou du jaune de chrome, etc., etc. Cette compo-: sition se dessèche complètement ; on peut également]
employer le vernis n» III, ou mieux encore le vernis universel (IV).
Pour disposer certaines préparations, il est très
