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On prépare trois solutions :
Solution À :
Solution de sulfate de cuivre à 10 %.
Solution B
Solution saturée de benzidine de Merck à laquelle on ajoute deux gouttes d’eau oxygénée à 3 % pour 100 cc. de la solution.
Solution C :
Solution aqueuse de safranine à 1 %.
Sur létalement de sang séché à l’air, on verse la solution A. Puis, sans laver, on ajoute quelques gouttes de solution C. On mélange. Après quatre à cinq minutes, on remplace ce liquide par le réactif B pendant une minute. On lave et on sèche.
B. - Cette méthode a été avantageusement modifiée par Mas y Magro, en 1936, qui, partant de la première . méthode de Sato, opère comme suit :
1° Les frottis de sang encore humides sont fixés par des vapeurs de formol pendant 10 à 20 heures ou plus. On ne fixe pas par la chaleur.
20 On verse sur le frottis la solution À de sulfate de cuivre. Une à deux minutes. Sans laver, on verse ensuite la solution B de benzidine. Deux minutes.
3° On fixe les frottis desséchés à l’air par l’alcool méthylique pur (10 secondes).
4° On colore par la solution de Giemsa, selon la technique habituelle, pendant 8 à 10 minutes, qu'on substitue, par conséquent, à la coloration par la
safranine.