VOIE SOUS-CUTANÉE

Le cobaye inoculé sous la peau de la patte postérieure avec une dilution allant en poids de 1/10 à un millionième et plus d'un organe virulent, présente, après une certaine incubation, une fièvre élevée de plusieurs jours de durée, accompagnée de symptômes au point d’inoculation. Il maigrit, paraît manifestement malade et meurt parfois au déclin de sa fièvre.

L'autopsie du cobaye, mort ou sacrifié au cours de sa maladie montre un œdème hémorragique entourant une zone centrale de fonte nécrotique des tissus qui ont reçu l'injection, une hypertrophie ganglionnaire, une hypertrophie de la rate, des lésions pulmonaires consistant en congestion et surtout en zones limitées d’hépatisation.

Le sang et tous les organes du cobaye sont virulents.

Incubation. — Klle est de durée variable. De 6, 9 et 10 jours pour les cobayes inoculés avec le sang du malade elle tombe à 6, 4, 3 et 2 jours chez ceux du premier

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passage. Dans la suite, elle varie avec la quantité de matériel virulent utilisé, avec le temps et les conditions de conservation du virus, el toutes choses d’ailleurs, avec un facteur imdividuel des cobayes. Lorsque les passages se font avec 1 cc. de sang frais défibriné ou non, elle est en général de 3 à 4 jours, et de 3 à 6 avec une émulsion à 1 pour 100 d'une rate conservée 24 heures à —15°. Elle peut paraître nulle lorsqu'un animal, inoculé l'après-midi de façon massive avec un virus très actif dépasse 40° dès le lendemain matin. Quand le virus est dilué, l’incubation s’allonge, mais le facteur individuel empêche qu'il y ait une progression tout à fait régulière.

Pour une émulsion de rate fraîche du cobaye T 78, légèrement centrifugée et inoculée à dose de 1 cc. sous la peau d'une série de cobayes, on note les incubations suivantes : 30 heures à 10-1, 56 heures à 10-7 et 10°, six jours à 10-° et 10-S. Dans une autre série d'expériences, les chiffres sont un peu différents, malgré un matériel tout à fait analogue ‘rate du cobaye M 31) : 4 jours à 10- et 10, 9 jours à 10-°, 8 jours à 10-5, 11 jours à 10-7. Avec le sang des mêmes animaux aux mêmes doses, l'apparition de la fièvre retarde de 2 à 3 jours en moyenne et de 3 à 5 avec le cerveau.

Lorsque les conditions de conservation du matériel virulent sont bonnes, la durée de celle-ci, à condition de ne pas dépasser certaines limites, influe assez peu sur la longueur de l’incubation. Ainsi un centigramme du cerveau du Rhesus 117 conservé à 15° donne au cobaye V. 61 la fièvre au bout de 58 heures, c’est-à-dire aussi rapidement qu'il le faisait au cobaye M. 13, 115 jours auparavant. Par contre, si les conditions de conservation sont moins bonnes, et cela est vrai surtout pour les rates du

RAAÇ Nu

, cobaye maintenues à la même température, mais sous un volume forcément moindre, la fièvre tarde de plus en plus à paraitre au cours des passages successifs faits avec les divers fragments d'un même organe.

La plus longue incubation constatée est de 23 jours (cob. M. 32 inoculé avec du cerveau de cobaye). Il s'agit là d’un fait exceptionnel : si les imcubations de plus de 10 jours sont déjà assez rares, celles d'une quinzaine le sont bien plus.

Les caractéristiques de l’incubation de notre virus chez le cobaye ont une valeur certaine. Elles sont approximativement celles de la chorio-méningite chez le même animal, Ni le typhus historique, n1 le tyÿphus murin ne connaissent des délais aussi courts, du moins quand les passages se font de cobaye à cobaye.

La détermination de la durée maxima de l’incubation conditionne les épreuves d’immunité, qu'il conviendra de ne commencer que 25 à 30 jours au moins après l'inoculation première.

Fièvre. — La fièvre marque la fin de l’incubation. Elle dure le plus souvent de 6 à 10 jours et atteint ou dépasse 41 degrés. Elle peut être plus longue (jusqu'à 17 jours) ou plus courte, évoluer en une seule fois ou en deux poussées successives, parfois de façon encore plus irrégulière. Elle peut ne dépasser la température normale que de quelques dixièmes de degré et pendant à pee quarante-huit heures.

Les formes moyennes prolongées ou un peu raccourcies sont de règle au cours des passages effectués de cobaye à cobaye avec des doses importantes d'organes

en pleine virulence. Mais l'inoculation est faite parfois pour vérifier l'existence du virus dans certaines humeurs, dans des organes prélevés en dehors de la période fébrile ou provenant d'espèces peu sensibles, dans des émulsions passées au travers de filtres serrés ou encore soumises à l'action d’antiseptiques : elle aboutit alors fréquemment à des fièvres courtes, larvées, atypiques et même à une maladie Inapparente, toutes formes qui doivent témoigner de leur identité réelle par un passage positif ultérieur au cobaye ou par l'épreuve d’immunité consécutive.

La fièvre cède le plus souvent progressivement. Une température élevée qui tombe très au-dessous de 39° en 24 ou 48 heures annonce la mort de l’animal.

Un coup d'œil jeté sur la fig. 3 fera mieux comprendre que toute description à quoi correspondent ces diverses formes.

En allant de haut en bas et de gauche à droite, les cobayes - qui ont fourni ces courbes ont reçu sous la peau 1 cc. d’émulsion de rate de cobaye à 1/10, à 1/1.000, à 1/1.000.000, 1 cc. de sang de cobaye, 1 cc. d’émultion de rate à 1/100, 1 cc. de sang de cobaye à 1/100.000, de poumon de cobaye à 1/10.000. Les trois derniers ont reçu un cerveau entier de souris, un demipoumon de souris, un cerveau entier de rat. Tous ces cobayes ont donné, s'ils sont morts, de nouveaux passages positifs à partir de leur sang et de leur rate ; s’ils ont survécu, ils ont subi sans réagir une inoculation d’épreuve positive pour les témoins. Quant au cobaye M 28, dont la maladie a été inapparente, son sang prélevé le 11° jour a donné une fièvre typique aux 2 cobayes M 42 (1 cc.) et M 43 (2 cc.) ; éprouvé 53 jours après l’inoculation première, M 28 s’est montré immun.

noue

Action locale du virus. — En général, dès les premiers jours de la fièvre, parfois un peu plus tard, exceptionnellement avant l'apparition de cette dernière et surtout lorsqu'elle est tardive, le cobaye inoculé sous la peau de la patte postérieure présente une inflammation de la région Imguinale. Elle est le plus souvent très marquée, suffisante pour immobiliser au moins relativement la patte pendant la marche de l'animal et pour lui donner au repos une attitude en flexion exagérée, qui contraste avec celle de la patte symétrique. La palpation, manifestement douloureuse, montre un empâtement plus ou moins ferme et étendu, dans lequel on peut ou non percevoir un ganglion lymphatique hypertrophié. Avec le déclin de la fièvre l’'empâtement régresse, le ganglion devient plus nettement perceptible, puis diminue à son tour et disparaît. Une dépilation locale est le dernier témoin des inflammations intenses. Les plus actives seules aboutissent à une nécrose cutanée et à une cicairice gauirée.

L'inflammation locale n’a manqué complètement que de façon tout à fait exceptionnelle, (Moins de 1 % des animaux). Elle a, dans l’ensemble, subi quelques fluctuations, suivant la cadence des passages du virus ; une période d’espacement de ces derniers amène un allongement de l’incubation et une diminution de l’action locale du virus, tandis que l'inverse suit une augmentation de leur fréquence.

À un moment donné et pour diverses doses de virus, il n’y a pas plus de rapport étroit entre l'intensité de F'inflammation sous-cutanée et la brièveté de l’incubation,

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Cob.C#41

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qu'il n’y en a entre cette dernière et la longueur de la fièvre, quoique des symptômes locaux importants se rencontrent plus souvent au cours des fortes réactions thermiques.

Symptômes généraux. — Le cobaye fébrile porte presque toujours les marques de l'atteinte infectieuse. A l'immobilité, au hérissement des poils, à la perte de l’appétit, symptômes banals du cobaye malade, se joint bientôt un amaïigrissement rapide et important. Plus tard, on constate éventuellement de la conjonctivite séropurulente, de la salivation exagérée, une dyspnée parfois extrême. Il n'y à jamais de diarrhée. Les manifestations nerveuses localisées manquent : la somnolence, l’asthénie, la faiblesse des pattes se rencontrent surtout chez les animaux qui font une hypothermie terminale.

L'amaigrissement est de tous ces symptômes le plus fréquent. Il est bien dû à l’action du virus, car il manque constamment chez les animaux immuns éprouvés. Commençant rarement avant l'élévation de la température, plus souvent dès les premiers jours de celle-ci, 1l continue quelque temps pendant l’apyrexie quand l'animal survit. Il est parfois très rapide.

Le cobaye M 31 pèse 610 grammes à l’inoculation. Incubation de 72 heures. Le poids est de 532 et 518 grammes les 3% et 6° jours de la fièvre.

L'amaigrissement qui manque dans les formes inapparentes peut cependant être important, malgré la brièveté de l'élévation thermique.

Le

Le cobaye T87 ne fait de fièvre que du 11° au 13 jour de l’inoculation avec un maximum de 40°6. Son poids passe

Passe

de 594 grammes à 567, 507, 478 et 490 grammes les 8e, 12°, 16e, 21° et 28° jours.

La dyspnée est toujours liée à des lésions pulmonaires et en rapport avec leur intensité.

On peut encore, pendant le cours de la maladie, observer des modifications morphologiques ou chimiques du sang.

Formule sanguine.

Les-sSix cobayes P 201, P 202, P 204, P'206, P 207 et P'209 sont inoculés sous la peau, le 8 juillet, chacun avec 1 cc. d’une émulsion à 1/100 de rate du cobaye M 219. Tous commencent leur fièvre au bout de 36 à 48 heures, à l’exception de P 209, pour lequel l’incubation dure 72 heures. Durée de la fièvre : 8 à 18 jours. L'examen des globules blancs donne les résultats suivants (pages 24 et 25) :

Malgré le peu de fixité du nombre des globules blancs et de leur formule chez le cobaye, il ressort de l'examen d'ensemble des données précédentes qu'à l’inoculation fait suite une hyperleucocytose très passagère, bientôt remplacée par une leucopénie. Puis à travers plusieurs oscillations assez langes le chiffre des globules blancs tend à revenir au point de départ. Les variations du nombre des polynucléaires accompagnent, souvent avec un certain retard, celles du nombre des globules. Il y a une courte poussée précoce coïncidant avec l'hyperleucocytose, puis une lymphocytose beaucoup plus prolongée atteignant de 75 à 90 %.

mme" f

Cob. 201 Leucocytes Poly. P. Eosino P. Baso Gds Monos Petits et Gds neutro lymphos 6/7 7.680 53 1 0 1 45 LU} 13.950 82 2 0 il 15 13/7 3.720 3% 0 0 1 64 16/7 6.200 31 1 0 3 65 18/7 10.075 25 1 0 3 2 20/7 6.200 17 > 0 1 82 22/7 5.425 47 10 0 1 52 24 T2 200 38 1 0 1 60 26/7 10.800 22 2 0 0 76 2) 7 7.790 24 il 0 0 75 2/8 7.750 34 0 0 0 66 5/8 10.850 20 0 0 13 67 Cob. 202 Leucocytes Poly. P. Eosino P.Baso Gds Monos Petits et Gds neutro lymphos 6/7 6.820 28 1 0 il 70 1VÈA 6.200 62 2 0 1 30 13/7 5.580 15 0 Ù 3 82 16/7 8.100 29 0 0 1 70 18/7 3.875 16 0 0 0 84 20/7 5.425 10 0 0 0 90 22/7 5.425 82 0 0 0 68 24/7 18.600 70 1 0 0 29 26/7 16.275 42 1 0 0 OÙ 29/7 13.175 24 2 0 6 68 2/8 6.200 34 è 0 0 64 5/8 7.750 26 0 0 6 68 Cob. 204 Leucocytes Poly. P. Eosino P. Baso Gds Monos Petits et Gds neutro lymphos 6/7 5.580 64 5 0 É 30 1Hb/tr 10.850 51 2 0 2 45 13/7 6.200 20 2 0 1 20 16/7 8.875 34 0 0 1 65 18/7 4.650 47 0 0 1 52 20/7 6.200 35) 1 0 2 64 22/7 8.525 2e 0 0 1 ui 24/7 6.975 35 0 0 0 65 26/7 6.975 34 0 0 0 66 29/7 10.075 46 2 0 0 52 2/8 6.975 30 2 0 0 68 5/8 6.200 ñ 4 ( 5 84

pm)

Cob. P.206 Leucocytes Poly. P. Eosino P.Baso Gds Monos Petits et Gds

neutro lymphos 6/7 4.340 56 5 (2) 0 39 1107 14.725 42 2 0 0 56 13/7 9.300 10 1 0 1 79 16/7 3.875 PAI 1 0 0 78 18/7 4.650 12 0 0 0 88 20/7 8.525 8 0 0 2 90 22/7 6.975 12 0 0 2 77 24/7 13475 15 1 0 0 84 26/7 13.175 38 0 0 0 62 29) 11.625 10 0 0 0 84 2/8 7.750 28 2 0 0 70 5/8 8.525 ail 8 (D » 38

Cob. P,207 Leucocytes Poly. P. Eosino P.Baso Gds Monos Moy. et Pts

neutro lymphos 6/7 4.960 32 1 0 1 66 a lyITe 11.625 75 1 0 0 24 13/7 4.960 28 1 0 0 71 | 16/7 4.650 38 0 0 1 61 LS 1.550 19 1 0 0 80 20/7 3.875 60 1 0 1 38 22/7 6.200 28 0 (0) 0 te 24/7 11.625 22 0 0 0 78 26/7 12.400 25 1 0 0 74 29/7 BE 4 1 0 5 90 2/8 6.200 32 0 0 0 68 5/8 8.045 32 0 0 2 66

neutro lymphos 6/7 7.340 52 4 0 1 43 11/7 13.950 52 4 0 0 44 13/7 8.680 44 1 0 1 54 16/7 3.815 14 4 0 1 81 18/7 2.325 13 1 0 il 85 20/7 4.650 o 1 0 1 89 22/7 5.425 36 5 0 0 59 24/7 6.975 30 3 0 0 67 26/7 16.275 29 1 0 0 70 29/7 10.075 40 3 0 0 57 2/8 10.075 14 2 0 0 84 5/8 6.975 23 5 0 5 67

Urée sanguine. — Le taux de l'urée sanguïne est en général très peu élevé. Nous avons trouvé seulement 0 gr. 126, malgré un amaigrissement notable, au 8° jour, d'une fièvre ayant atteint ou dépassé 41° pendant 6 jours, el qui se terminera 5 jours plus tard par la mort. Les chiffres de 0 gr. 189, Ogr. 063 on été obtenus du 1% au 2° jour de l’apyrexie, ceux de 0 gr. 169 el 0 gr. 239 un peu plus tard.

C'est seulement dans les formes extrêmement graves que l’urémie est notable : 0 gr. 807 aux environs de la mort survenue 10 jours après une inoculation Intracérébrale de virus.

A titre de comparaison, indiquons les taux trouvés chez 4 cobayes morts ou sacrifiés mourants de chorioméningite : 0 gr. 971, 1 gr. 386, 0 gr. 643, 0 gr. 404.

Evolution. — L'évolution de la maladie du cobaye aboutit le plus souvent à la guérison.

La mort survient chez moins de 10 % des cobayes qu'on ne sacrifie pas en vue des passages. Elle est dûe parfois à une rupture de la rate, peut-être facilitée par les manipulations au cours des prises de température, qui tue les animaux presque subitement en pleine fièvre par inondation sanguine du péritoine. L'accident s’explique par la rate énorme, boursouflée, déchirée et extrémement friable que l’on trouve à l’autopsie. Il n’est pas exceptionnel (8 cas sur plusieurs centaines de cobayes), mais n’est responsable que d’une faible proportion -des décès. En dehors de la rupture de la rate, la mort s’observe quelquefois en pleme hyperthermie, plus souvent

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en hypothermie un ou deux jours, rarement davantage, après la fin d'une fièvre élevée et assez longue. L’étendue des lésions pulmonäires, constante dans ce cas, ne suffit pas toujours à expliquer la mort, qu'il faut rapporter à à la gravité générale de la maladie.

Comme dans la fièvre des Montagnes Rocheuses, et dans la chorio-méningite lorsque les souches de ces virus ne sont pas toujours mortelles pour. le cobaye, ce n'est

pas à l'inoculation des plus fortes doses que succombhe l'animal.

A la suite, par exemple, de l’inoculation d'une émulsion centrifugée de rate de cobaye à des dilutions diverses, les cobayes T 100 (3° courbe de la figure 3) et T 97 meurent après avoir reçu 1 cc. des dilutions à 1/1.000.000 et à 1/1.000, alors que survivent ceux qui ont reçu les dilutions à 1/10. 1/100, 1/10.000 et 1/100.000.

Lésions analomo-pathologiques (1). — £a première constatation faite à l’autopsie d’un cobaye inoculé sous la peau et dont la fièvre a duré environ une semaine est un amaigrissement très marqué. La peau est collée sur les muscles, et la graisse peut avoir totalement disparu. L'amaigrissement met en relief les lésions locales d'œdème hémorragique, qui ne manquent à peu près jamais. La zone purement œdémateuse dépasse largement la zone où l’hémorragie se mêle à l'ædème. Il s'agit d'une infiltration d'aspect gélatineux, épaisse parfois de près d'un centimètre, et qui laisse échapper à la coupe un li-

(1) L'étude des lésions histo-pathologiques dues au virus D n'étant pas terminée, seul l’aspect macroscopique sera décrit ici, sauf nécessité absolue.