CHAPITRE III

TECHNIQUE HISTOLOGIQUE

Microscopes. — Instruments. — Verrerie. — Microtomes. — Réactifs. — Récolte des liquides h examiner. — Procédés de coloration des bactéi-ies. — Photographie.

Dans les détails de technique que nous exposons ici, nous supposons connue toute la technique histologique ordinaire. 11 serait en effet absolument irrationnel et dangereux de commencer à faire usage du microscope en vue d'étudier les bactéries, car il est nécessaire d'avoir des notions générales et pratiques de botanique, d'histologie normale et pathologique qu'on ne peut acquérir sans être très expert dans le maniement du microscope, dans la pratique des coupes, dans la coloration et le montage des préparations. Aussi nous boraons-nous à indiquer les traités généraux sur la matière et en particulier l'excellent traité technique d'histologie de Ranvier (1), le traité du microscope de Ch. Robin (2), et les histologies de Kôlliker (3), Slricker (4), etc., où l'on expose les méthodes de l'histologie normale. La technique spéciale à l'étude histologique des bactéries est relatée dans les mémoires et publications de Weigert (b), de Cohn (6), d'Ehrlich (7), de Koch (8), de Friedlànder (9), de Firket (10). Nous nous contenterons d'indiquer ici les instruments, les réactifs et les modes de préparation qui sont nécessaires lorsqu'on étudie les micro-organismes.

Microscopes. — II est nécessaire d'avoir un microscope solide, dont la vis micrométrique soit très bonne, qui soit pourvu d'un condensateur Abbé

(1) Ranvier, Traité technique d'histologie. Paris, Savy, 1875.

(2) Robin, Traité du microscope, 1« édit., 1840 ; 2° édit., 1881.

(3) Kblliltcr, Elem. d. menschl. Gewchen, traduct. franç., 2« édit., 18G8.

(4) Striclccr, Lehre von den Gewnhen.

(5) Wcigeri, Virchow's Archiv, t. LXXXIV. (G) Cchn, lieilr. z. Biol. il. Pflnnzen II, 1881. (1) Ehrlicli, Zeitschr. f. kl. Med., 1881.

(8) Koch, lieitr. z. Biol. d. l'flunzen, t. II.

(9) Friedlande?, Microscopische Technilc, Berlin, 1883, et 2' édition, 1884.

(10) Firlcet a ajouté h sa traduction française du Traité de microscopie clinique de Bizzozéro un chapitre relatif !i la tcclini()ue et au diagnostic des microbes para, sitaires. Bruxelles, 1883 et seconde édition française, 1885.

62 TECHNIQUE IlISTOLOGIQUE.

à grand angle d'ouverture et de lentilles à imnaersion dans l'eau et dans l'huile (lentilles à immersion homogène).

Nous nous sommes servis des microscopes et des lentilles à immersion dans l'eau et dans l'huile fabriqués par Zeiss à léna, Vérick et Pra7mo\vsky à Paris, Leitz à Wetzlar, Hartnack à Postdam, Reichert à Vienne. Ross, Powel et Lealand, à Londres, fabriquent aussi des lentilles à immersion homogène.

11 est toujours nécessaire de commencer par examiner les préparations colorées avec un grossissement faible, de 50 à 100 diamètres, avec le condensateur Abbé et un diaphragme à faible diamètre pour étudier la topographie des lésions; lorsque les coupes sont colorées doublement, les bactéries en violet par exemple, tandis que le tissu est teint en rouge, on peut déjà apprécier le siège des premières avec un grossissement de 150 à 200 diamètres par les taches et agglomérations violettes qu'elles présentent, ou même les reconnaître à leur forme lorsqu'il s'agit de grosses bactéries comme celles du charbon. Il est même possible de très bien étudier avec un grossissement de 20 diamètres la répartition des bactéries de la tuberculose lorsqu'elles sont en masses considérables, comme cela a lieu dans la tuberculose des poules et des faisans. Pour les grossissements de 50 à 300 diamètres, on peut se servir aussi des lentilles ordinaires et de la lumière directe donnée par un miroir concave.

Mais lorsqu'il s'agit de déterminer la forme et l'espèce des bactéries soit dans un liquide, soit sur des coupes, il est nécessaire d'employer des lentilles qui possèdent une grande clarté en môme temps qu'elles grossissent de 300 «, 1200 ou 1500 diamètres. Les lentilles à immersion dans l'eau, avec la lumière simple ou le condensateur Abbé, donnent de très bons renseignements pour les bactéries non colorées et étudiées dans les liquides. On peut aussi étudier les bactéries non colorées avec un condensateur Abbé muni d'un diaphragme. Mais lorsqu'on examine les bactéries colorées, surtout sur des coupes, il est nécessaire de se servir de la lumière Abbé, et des objectifs à immersion homogène. Ceux dont nous usons le plus habituellement sont les lentilles ~ de Zeiss, le n° 10 de Vérick et le de Leitz. Ces lentilles ont l'avantage de donner, en baissant ou élevant le tube, en changeant l'oculaire depuis l'oculaire n" 1 jusqu'au n« des grossissements qui varient de 300 diamètres à 1000 diamètres. Pour les grossissements supérieurs nous avons employé le de Leitz, le n" 12 de Vérick, le 78 de Zeiss, le ~ de Reichert ou le système 25 de Powel et Lealand. Ces grossissements sont très clairs, même avec l'oculaire n" 4, le tube étant élevé. Les objectifs de Zeiss fournissent des images extrêmement claires et très précises; les plus forts grossissements sont donnés par Powel et Lealand. Le microscope de Powel et Lealand est muni d'un excellent porte-