V. — Facteurs de croissance extraits de tissus végétaux
79 EAU DE POMME DE TERRE DE KoLLATH.
Des pommes de terre fraiches sont lavées, pelées et, après un nouveau lavage dans l’eau de conduite ordinaire, brûlées avec un bec Bunsen.Ces pommes deterre brûlées sont coupées en tranches minces dans une boîte de Pétri, de façon à offrir la plus grande surface possible, et les tranches sont placées dans des flacons d’Erlenmeyer avec un volume double d’eau distillée stérile. On fait bouillir ces flacons au bain-marie pendant 5 minutes pour
chasser les germes de l’air. L’extrait dans l’eau distillée, faible dans les premiers jours, devient plus actif plus tard. L’extrait employé peut être remplacé en substituant à la quantité prélevée une quantité égale d’eau distillée.
Toutes les pommes de terre ne conviennent pas pour donner de bons extraits. Les meilleures semblent être les pommes de terre jaunes quelque peu savonneuses. Les vieilles pommes de terre ne conviennent pas.
La solution n’est pas susceptible, dans les premiers jours, de favoriser la culture du B. de Pfeifler. [l faut que les facteurs de croissance aient diffusé dans le liquide.
Une légère réaction acide paraît favorable, car l’addition d’une certaine quantité d’alcali détruit facilement l’activité du facteur de croissance. 11 est donc indiqué, en raison de cette réaction acide, d'utiliser de la gélose un peu plus alcaline que pour les plaques de Levinthal (pH : environ 7,4 — 7,6).
L'eau de pommes de terre, filtrée à travers une bougie Berkefeld, conserve toute son activité.
89 MiLiEU RÉACTIF DU FACTEUR V, D'APRÈS KOLLATH.
Pour rechercher la présence du facteur V de Thjôtta et Avery dans des sucs ou des tissus végétaux, KOLLATH prépare un milieu au sang contenant le facteur X, mais très dilué, de façon que, pratiquement, ce milieu ne contienne plus de facteur V. L’absence de facteur V est révélée, par l’impossibilité de cultiver le B. de Pfeiffer sur ce milieu.
Si, donc, le suc d’un végétal ajouté à ce milieu permet la culture de B. de Pfeiffer, c’est que ce suc contient le facteur V.
KozLarx lave soigneusement (pour enlever le sérum qui a des propriétés empêchantes) des globules rouges de cheval. Il les hémolyse par l’eau distillée. Il mêle la solution de sang, dans des proportions variées, à des tubes de 10 eme. de gélose à 2 %. Ebullition 10 minutes. Il titre l’activité de cette solution de sang, en notant la plus petite quantité de solution qui donne des colonies
de B. de Pfeiffer visibles à Ja loupe. Si une quantité de solution
sanguine qui ne donne plus de colonies est réactivée par l'addition
«de 2 eme. par exemple de sue ou d’extrait de plantes, on conclut … que cette plante contient le facteur V de Thjôtta et Avery, prin- … cipe activant le facteur X du sang.
. J° MILIEU À LA FARINE DE POIS (TRYPAGAR) DE M. H. Gorpox PLAGES MeCHINE, #4 l. Extrait de farine de pois verts.
: PAPE AE SISTER M Nine 100 gr.
a DO AR se Le NN RUN Saut à MAT 100 gr.
EE PTS ICE Re ire MN 1.000 cc.
L Mesurer et faire bouillir une demi-heure en agitant de temps en - temps. Laisser déposer, filtrer, stériliser et étiqueter : «extrait … salé de pois». Cet extrait de pois sera fraîchement préparé pour - chaque manipulation.
