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face de chaque lamelle, se dessèche rapidement.
5° On saisit à l’aide d’une pince chaque lamelle et on la passe trois fois dans la flamme d’une lampe à alcool, en ayant soin de ne pas tourner du côté de la flamme la surface recouverte de sang.
Le sang desséché peut être examiné sans autre préparation, sans coloration, et ce procédé donne d’excellents résultats pour certains éléments parasitaires. La lamelle couvre-objet est placée sur une lame porte-objet et l’on borde à la paraffine; la préparation est montée à sec; le baume rendrait les éléments trop transparents.
Lorsqu’on se propose de soumettre les préparations desséchées à l’action des réactifs colorants en solution aqueuse, il est bon de fixer les hématies plus complètement qu’elles ne 1 ont été par la
dessiccation et parla chaleur.
Le mélange à parties égales d’alcool et d’éther, conseillé par Roux, fixe très bien les hématies ; on verse quelques gouttes de ce mélange à la surface delà lamelle recouverte de sang desséché, on laisse en contact pendant quelques secondes; on sèche après avoir fait écouler le liquide en excès.
Les vapeurs d’acide osmique fixent bien les hématies, mais elles sont d’un emploi moins commode que le mélange d’alcool et d’éther. Le sang desséché est laissé pendant quelques secondes
au-dessus de l’orifice d’un flacon à large tubulure renfermant une solution d’acide osmique au centième.
On peut obtenir aussi la fixation des hématies par l’action prolongée de la chaleur (étuve sèche, température de 100 degrés pendant 15 à 30 minutes), ou par les solutions des acides picrique ou chromique (acide picrique en solution concentrée, acide chromique en solution au 1000 e ).
Réactifs colorants. — Lorsqu’on veut colorer les éléments du sang frais, il faut avoir soin d’employer des réactifs colorants qui ne déterminent pas la coagulation du sang et qui n altèrent pas les hématies. Les matières colorantes seront dissoutes dans du sérum naturel ou artificiel ou bien introduites directement dans le sang.
Le procédé, suivant a été recommandé par Soulié : on dépose une goutte de la solution alcoolique de bleu de méthylène sur une lame porte-objet e^ on laisse évaporer; la goutte de sang est déposée au niveau de la tache formée par le bleu de méthylène et recouverte avec une lamelle, le bleu se dissout dans le sérum (Bulletin méd. de l’Algérie, 1890, p. 250).
En général il est préférable de faire agir les matières colorantes sur le sang desséché et fixé par un des procédés indiqués plus haut; on obtient des préparations persistantes.
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Les procédés de coloration du sang et des hématozoaires sont aujourd’hui très nombreux; nous aurons à y revenir à propos de chaque hématozoaire en particulier; nous ne pouvons indiquer pour le moment que les réactifs colorants les plus employés pour l’étude du sang.
L’éosine en solution aqueuse colore rapidement les hématies en rose ; elle a une grande affinité pour l’hémoglobine et par suite elle constitue un précieux réactif pour l’observateur qui étudie le sang et ses parasites.
L’éosine a aussi une grande affinité pour les granulations de certains leucocytes qui ont reçu à cause de cela le nom d’éosinophiles. On emploie la solution aqueuse d’éosine à l pour 100; il suffit de placer les lamelles de sang desséché pendant 20 à 50 secondes dans cette solution pour obtenir une belle coloration rose des hématies.
Le bleu de méthylène est également un réactif très précieux; il se fixe sur les noyaux des leucocytes et , sur les noyaux des hématies (sang des oiseaux, des reptiles et des batraciens), sans colorer les hématies.
En faisant agir sur le sang d’abord la solution aqueuse d’éosine et ensuite une solution concentrée de bleu de méthylène on obtient une double coloration très belle et qui rend de grands services dans l’étude du sang.
La lamelle colorée à l’éosine est portée dans la
solution aqueuse concentrée de bleu de méthylène pendant 30 secondes environ, lavée de nouveau et séchée ; on monte dans le. baume.
L’hématoxyline préparée par le procédé de Latteux donne d’assez bons résultats; elle se fixe sur les noyaux des leucocytes et des hématies nucléées et elle s’associe bien comme le bleu de méthylène à l’éosine.
Le violet de gentiane et le violet dahlia sont utiles dans quelques cas particuliers.
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