CHAPITRE II

Etude expérimentale de la méthode d'isolement à l'acide sulfurique

La méthode de culture que nous allons exposer, fait appel à l’action de l’acide sulfurique. 11 semble, en effet, que parmi tous les essais proposés pour débarrasser les produits pathologiques des germes d’infection secondaire et réaliser un véritable isolement du bacille de Koch, ce soit elle qui corresponde le plus au but recherché. Celui-ci est double, il s’agit de tuer les germes d’infections secondaires et de ne pas altérer la vitalité du bacille de Koch. On doit également demander à la technique employée de faire appel à un minimum de manipulations et d’être rapide. Ajoutons une condition supplémentaire : il y a avantage à ce que le produit pathologique ainsi traité convienne aussi bien à l’ensemencement qu’à l’inoculation. Les résultats deviennent alors parfaitement comparables et peuvent être recherchés simultanément.

Nous ne revenons pas sur les étapes parcourues depuis les premiers essais d'isolement du bacille de Koch dans les produits secondairement infectés. Mais, précisons,

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par contre, le procédé à l’acide sulfurique et ses bases expérimentales. Après Baussan et Bondy, Loewenstein, Holhn, Saenz et Sadettin étudient systématiquement les bases expérimentales de la méthode. Is partent d’une solution d’acide sulfurique à 15 % dont le titre s’abaisse de moitié au cours des manipulations par addition du produit à ensemencer, ils neutralisent ce produit acide par de la soude à 30 % ajoutée goutte à goutte en présence de tournesol.

Action de l’acide sur les bacilles tuberculeux

Dans une première expérience, une émulsion de bacilles de la souche Ratti est mélangée avec des solutions d'acide sulfurique à 10, 20, 30 et 40 %. Le temps de contact variable était de 30, 45 et 60 minutes. Après neutralisation à la soude en présence de tournesol, ensemencement sur Lowenstein et Pétragnani à l’asparagine. Les bacilles de la première série (temps de contact 30 minutes), donnaient des colonies de développement identiques quelque soit la concerftration d’acide avec celles obtenues à partir de bacilles témoins.

Mêmes résultats après 45 et 60 minutes de contact, mais les tubes ensemencés avec les bacilles correspondants aux concentrations de 30 et 40 % sont restés stériles.

Deuxième série d’expériences. Pour mettre en évidence l’action nocive de l’acide sulfurique sur le bacille de Koch, Saenz et Sadettin recommencent une nouvelle série de culture en employant des émulsions plus diluées contenant 0,001 à 0,000.01 me. de bacilles par centimètre cube laissé pendant demi-heure au contact de l'acide sulfurique à 10, 15 et 20 %. Les résultats sont donnés par le tableau suivant: |

Nombre de colonies après 39 jours

Quantité de bacilles ensemencés en mgr

Traités par Témoins | SO{4 H2 à 10 % ——— innom- innombrables brables 150 150

Traités par SO4 H 2

innombrables

Traités par SOMTHIE

innom=brables

Troisième expérience avec des bacilles aviaires.

Nombre de colonies après 30 jours

Quantité de bacilles ensemencés (mgr.)