RECHERCHE DE LA FIBRINE

La recherche de la fibrine et sa constatation sont au contraire de la plus haute importance. Celle-cin’existe dans aucune tache colorée en rouge-brun, soluble dans l’eau, et si elle n’existe pas dans une tache de sang, c’est une exception, qui a elle-même une grande valeur en médecine légale. Elle a des caractères microscopiques et des réactions chimiques qui ne permettent de la confondre avec aucun corps. Le réticulum de fibrine est le dernier témoim d’une tache qui a disparu, et dans bien des cas on est assez heureux pour pouvoir affirmer par sa simple présence qu'une tache a existé.

Si on peut détacher une croûtelette de sang, on la place sur une lame porte-objet, et on la traite avec de l'eau distillée, ou mieux, de la glycérine étendue à 10 */,. Les globules rouges sont rapidement dissous, et il ne reste qu'une substance faiblement jaunâtre, molle, c’est la fibrine. On la couvre d'une lamelle et on l’examine à un grossissement de 400 ou 500

diam. On voit un lacis de fibrilles fines, refringentes, blanches, rectilignes ou ondulées. Ces fibrilles retiennent emprisonnés de globules blancs ; en éparpillant des pièces d'argent de5 francs sur des brins de paille jetés à terre, on se ferait une idée de ces préparations (planche IT, fig. 17). Ces fibrilles se colorent par l’éosine aussi bien que les globules blancs, et sont alors plus visibles, ils ne se dissolvent ni dans l’eau ni dans l'alcool : mais, c’est là un de leur meilleur caractère, l'acide acétique les gonfle, les transforme en une masse gélatineuse, transparente.

Le réactif de Millon ala propriété de les colorer en rouge; l’ammoniaque et lesalcalis caustiquesles dissolvent à une douce chaleur, en donnant des albuminates qu'une chaleur plus forte ne précipite pas ; des solutions de sels neutres (sel marin, sulfate de soude) à 10 */, les disolvent également à 40°, mais la liqueur se trouble de nouveau à 60°. L’iode jaunit ces fibrilles.

Quand la tache est lavée, on cherche après l'avoir humectée d’un peu d’eau pour gonfler la fibrine, à enlever celle-ci avec des aiguilles pour l’examiner au microscope, puis on coupe la tache en plusieurs parties: l’une est traitée par l’éosine, qui colore seulement le point où se trouve la tache {si elle n’est pas sur des fibres animales, laine, soie); une autre est traitée par l’eau 1odée; une troisième parle réactif de Millon.

Si on s’est servi du tube de M. Cazeneuve, c'est souvent dans le liquide même du tube que nage le petit caillot de fibrine; on le recueillera avec soin pour le caractériser. La fibrine et ses fibrilles ne peuvent-être confondues qu'avec fort peu de subs-

tances, nous citerons surtout les leptotrix, champignons microscopiques, et les filaments de quelques autres algues, mais ceux-ci ne se gonflent pas par l'acide acétique ; ils ne décomposent pas l’eau oxigénée comme la fibrine, et se comportent autrement sous l'influence des réactifs colorants. En les calemant avec de la potasse ils ne dégagent pas l’odeur vive de corne brûlée. Nous attachons à la constatation de la fibrine la plus grande valeur. Lorsque nous la trouvons avec ses caractères, qu’elle est semée de globules blancs, nous affirmons qu'il y a du sang, si la tache brun-rouge, rouille, a donné par la potasse un liquide dichroïque : ces signes réunis donnent la certitude complète.

L'absence de fibrine dans une tache qui donne toutes les réactions du sang, est également un précieux indice, car ce sang privé de fibrine provenait du sang caillé, d’un cadavre probablement, ou de sang menstruel.

RÉACTION OZONOSCOPIQUE DE VAN-DEEN

C’est à Van-Deen, chimiste hollandais, que l’on doit cette précieuse réaction : elle est d’une sensibilité exquise, et réussit dans des cas où toutes les autres échouent, faute d’une quantité suffisante de sang. Taylor, qui l’a beaucoup étudiée, ainsique Day, l’a vulgarisée, a précisé son emploi et a indiqué un

#5 grand nombre de corps qui jouissent à son égard des mêmes propriétés que le sang lui-même. A quoi est-elle due? Grammatici certant... À Tozone? que l'essence de térébenthine aurait la propriété de dissoudre, opinion sûrement erronée ; à une combinaison oxydée peu stable, cédant facilement son oxygène (Berthelot), — à du peroxide camphorique (Ringizett), — à de l’antozone (Taylor, etc.), l'essence s'oxyderait aux dépens de l'ozone, mettrait de l’antozonce en liberté et c’est lui qui agirait. Toujours est-il que cette essence, quine contient que très peu d'oxygène libre, peut en céder à des corps que l'oxygène libre ne saurait oxyder directement, des quantités considérables répondant à un volume 168 fois plus grand que celuide l’oxigène libre dissous dans l'essence; souvent ce transport d’oxygène n'a pas lieu, s’il n’est sollicité par la présence d’un autre corps : phénomène catalytique eût dit Mittcherlich, échange d’un oxygène d’une électricité contre un oxygène d'électricité contraire, disonsnous aujourd'hui. Bref, en ce qui nous concerne, il nousimporte surtout de savoir que l’essence de térébenthine antozonisée et tous les antozonides, sont sans action évidente surla résine de Gayac,récemment précipitée de ses solutions alcooliques, mais qu'ils ont la propriété de l’'oxyder en présence de traces de sang, si petites soient-elles. Que l’on verse dans un peu d’eau quelques gouttes de teinture de Gayae, on aura un précipité blanc à peine jaunâtre, qui ne changera pas immédiatement par l'addition d'essence de térébenthine antozonisée : mais qu’on y ajoute une

RTE goutte de liqueur contenant une trace de sang, et en moins de quelques minutes la résine sera bleue. Tel est lé principe de la réaction qui réussit toujours si les réactifs employés sont bons.

Préparation des réactifs. — On choisit un gros morceau de résine de Gayac du commerce, et on en détache au moyen d’un couteau toute la partie externe, pour ne conserver que la partie tout à fait centrale du morceau. Là, la résine est brun jaunâtre, un peu translucide, tandis que les parties externes qui ont subi l’action de l’air et dela lumière sont foncées, brunes et sans doute en partie oxydées; elles sont moins propres à donner un bon réactif. On dissout 5 ou 6 grammes de résine ainsi mondée dans 100 gr. d'alcool bon goût, à 80° ou 83°; cette teinture doit être jaune-brun, couleur vin de madère, et donner par l’eau un précipité presque blanc, laiteux, un peu Jaunâtre.

Réactif antozone. — L'essence de térébenthine de commerce nous a toujours réussi: s1 elle était trop récemment distillée, 1l faudrait l'agiter à l'air: Nous nous contentons d'exposer un flacon non bouché à l'air, sur une croisée ; ou bien, si nous sommes pressés, nous y faisons passer pendant une heure un rapide courant d'air. On peut également la rendre propre à servir de réactif en y faisant passer un courant éléctrique, ou en l’agitant avec de l’eau oxygénée. L'essence de térébenthine francaise simplement battue ou agitée à l'air est excel-

lente et réussit toujours. On à, sans trop de raison, cherché à substituer à l'essence de térébenthime d'autres antozonides dont aucun ne vaut mieux qu'elle, et qui tous ont des inconvénients qu'elle n’a pas : difficulté de préparation, altérabilité de la liqueur, etc. Il est vrai que ces succédanés ont été proposés ailleurs qu’en France, sans doute parce que les essences de térébenthine anglaise et allemande qui se distinguent de celle que l’on connaît sous le nom d'essence française par diverses propriétés, ont une action moins nette.

Day employait l’éther antozonique : il est probable qu’il l’obtenait par simple agitation de l’éther avecune solution aqueuse de peroxyde d'hydrogène. Taylor employait d'abord directement l’eau oxygénée, mais ce réactif est altérable, peu stable, se décompose : il doit être parfaitement neutre. D'ailleurs, cet éminent médecin légiste, lui a préféré plus tard l’éther antozonisé : « Comme l’éther dissout rapidement la résine de Gayac oxydée, dit-il, la couleur dans ce cas (sur les empreintes) apparaît avec toute son intensité naturelle. Il n’y a pas de précipité de résime pour la dissimuler, comme dans les cas où l’on emploie le peroxyde d'hydrogène dissous dans de l'eau.» Nous obtenons facilement comme suit l'éther antozonizé. Dans un flacon de 120 gr. nous introduisons 15 à 20 gr. de bioxyde de baryum, et 80 grammes d’eau, nous refroidissons vers 0°, puis nous ajoutons lentement de l'acide chlorydrique en quantité insuffisante pour décomposer tout le bioxyde de baryum ; si la liqueur est acide après la réaction,

Ro — nous la neutralisons par un peu de carbonate de baryum, puis nous agitons avec de l'éther normal refroidi à 0°; enfin nous décantons celui-ci. Cet éther conserve longtemps ses propriétés.

Huenefeld emploie une liqueur que Draggendorff conseille beaucoup, et qui est ainsi composée :

Alcool :

Chloroforme ;

Essence de térébenthine française 4à 1 p. ;

Acide acétique cristall. 1/10.

On a, pour varier sans doute, employé d’autres essences isomères de l'essence de térébenthine : lavande, citron, et voire même de l’eau de Cologne ; de l’éther sulfurique méthylé, sans aucun profit bien entendu.

Essai préalable et vérification des réactifs. — Il importe d’être bien sûr des réactifs ainsi préparés : ils doivent toujours donner la réaction, par leur mélange avec des traces de sang ; ils ne doivent jamais Ja donner par leur mélange pur et simple, sans addition de cette humeur. Taylor conseille de l’essayer en versant, sur un morceau de porcelaine blanche, une goutte de solution étendue de sang, d'y ajouter une goutte de teinture de Gayac: on ne doit obtenir qu'un précipité à peme jaunâtre, mais ne tirant aucunement, même après un certain temps, au bleu ou au bleu verdâtre. On ajoute alors le réactif antozone (essence de térébenthine, eau ox ygénée, éther oxygéné, etc.), et, en un temps très court, moins de quelques minutes en général, la

teinte bleue caractéristique, doit se manifester. On dilue alors de plus en plus le liquide sanguin, pour se rendre compte jusqu'où peut aller la sensibilité des réactifs. La teinte bleue devient de plus en plus pâle, verdâtre et lente à se produire.

Il faut maintenant s'assurer encore, qu'en mélangeant dans les mêmes conditions la liqueur de Gayac et le réactif antozone, mais hors la présence du sang, on n'obtient pas de coloration, même après une heure d'attente.

Manuel opératoire. — On a recours suivant le cas à différents procédés:

1° On a assez de taches à sa disposition : on fait dissoudre le sang par macération dans un peu d’eau distillée ; quelques gouttes de la solution sont mises dans un verre de montre placé sur une feuille de papier blanc, ou bien dans une petite capsule de porcelaine blanche ; on y ajoute goutte à goutte de la temture de Gayac jusqu’à ce qu’ou ait obtenu un précipité laiteux bien opaque, eton attend un mstant; ce précipité doit garder, sans aucune modification, sa temte blanc jaunâtre; puis on ajoute 5 ou 6 gouttes d'essence de térébenthine antozonisée: sion a réellement affaire à du sang, en moins d’un instant on voitse produire une teinte bleu-cendré, verdâtre, qui devient bientôt franchement bleu-indigo. On favorise la réaction en mêlant mtimement avec une baguette de verre effilée. Nous opérons souvent dans un verre à pied : il faut nécessairement un peu plus de solution sanguime,mais aussi en raison de la masse, la réaction est

plus vigoureuse. Il suffit d'étendre de 4 à 5 cent. cubes d’eau distillée quelques gouttes de solution sangume et d'ajouter les réactifs dans l’ordre cidessus indiqué.

2 On ne dispose que de très peu de sang. — EmpreiNtes pe Tayror. — Ce procédé, indiqué par Taylor, est préférable toutesles fois qu’on setrouve en présence de traces de sang seulement. On choisit une feuille de papier blanc à filtrer (papier sans colle) et, à divers points de son étendue, on verse une goutte de la teinture de Gayac, puis une goutte du réactif antozone. On ne doit obtenir aucun changement de couleur, pas trace de bleu ni de vert, pas même par transparence ; dans ce cas le papier peut servir. On mouille avec de l’eau distillée la tache à examiner ou seulement une partie découpée dans celle-ci, et on la recouvre d’une bandelette de ce papier.

Cette bandelette doit être assez grande pour recouvrir non seulement la tache, mais encore une notable partie du support. De temps en temps on comprime doucement le papier contre la tache avec une baguette en verre bien propre, et on l’enlève dès qu'il a pris une légère teinte jaunâtre, empreinte de la tache.

Il suffit alors de verser sur cette empreinte un peu de teinture de Gayac, que l’on étend sur toute la zone mouillée, au delà des limites colorées, puis d’y ajouter le réactif antozone ; l'empreinte, si elle était due à du sang, devient bleue, et cette coloration ne doit guère s'étendre au delà deseslimites, simon ce serait

l’indice,selontoute probabilité, quelesupportlui-même a une influence sur laréaction ozonoscopique. Alors, et même cette précaution doit être toujours prise, on fait des empreintes sur divers endroits indemnes du support et on les essaie. Elles ne doivent pas changer par les réactifs; dans le cas contraire, on ne pourrait tirer aucune utilité de la réaction ; et cependant, il ne faut pas oublier que sa sensibilité est telle que si le support a été lavé imparfaitement en vue de faire disparaître les taches, l’eau ensanglantée suffit à lui donner, sur toute son étendue, la faculté d'oxyder le Gayac en présence des réactifs antozones. En lavant le support consciencieusement, pour y répéter l'expérience et en s'aidant des autres réactions délicates du sang, on arrive à savoir si on est fondé à conclure que l’action est propre au support lui-même, ou au lavage de ce support par de l’eau ensanglantée, point très digne d’in- LÉ OL.

3° On peut modifier comme suit le procédé : la tache humectée est arrosée d’un peu de temture de Gayac; on laisse un instant en contact, puis on prend une empreinte gayacquée ; on verse sur l'empreinte le réactif antozone. Ce mode d'opérer est préférable, toutes les fois que l'alcool de la teinture ne peut attaquer ou dissoudre le support : vernis, résine, certaines couleurs, ete.

Æ Enfin, il peut arriver qu'il ne reste de la tache lavée que des vestiges si faibles qu'il est impossible de prendre des empreintes. C’est un cas plus rare qu'il semble, car en laissant macérer une tache pa-

reille dans de l’eau, celle-ci finit par être assez active pour oxyder le Gayac. On suppose qu'on n'ait rien obtenu ; si la tache est sur un fond clair, on fait directement sur elle la réaction, et comme toujours on . répète l'expérience sur des points non contaminés du support.

La réaction ozonoscopique par empreintes est d’une sensibilité extraordinaire, c’est ce procédé que le docteur John Day, en Australie, employa pour décéler sur le pantalon d’un Chinois accusé d’homicide, des taches de sang, dont un habile expert, Jackson, avait vainement tenté de faire la preuve. Il y avait trente-huit jours que le crime avait été commis, et les taches avaient été si bien lavées, qu’on ne pouvait plus les voir à l’œilnu. Day fit soixante empreintes, qui lui donnèrent par les réactifs une temte bleuclair très nette; après la soixantième les taches bleues devinrent difficiles à produire, etla réaction cessa tout à fait à la soixante-dixième.

Critique de la réaction ozonoscopique. — On a beaucoup écrit pour et contre cette réaction : les uns lui reprochent, avec raison, qu’elle manque complètement de spécificité, qu'on l’obtient avec du sang et mille autres corps n'ayant aucune analogie avec le sang : — les autres, appréciant son extrême sensibilité, la facilité du manuel opératoire, s’en déclarent avec Day et Taylor chauds partisans, et l'emploieraient volontiers à l'exclusion de tout autre procédé de recherche. Tous cependant s’en servent et font figurer ses résultats dans leurs rapports; tous sont

ER aussi d'accord que quand elle est négative, c’est un indice certain, sans recours, de l'absence du sang.

Nous estimons qu’elle est le plus précieux des réactifs à employer pour ne pas errer dans des recherches souvent délicates ; elle est pour nous le chalumeau du minéralogiste : sans aucune perte de substance, par un procédé commode et facile, sûr et infaillible, ou peut en un instant savoir, ou bien qu'il n'y a sûrement pas de sang, ou qu'il y en a selon toute probabilité. Cet énorme résultat, personne ne le conteste, et on peut du reste l’obtenir sans avoir rien perdu de satache, sans l'avoir altérée, sans empêcher ni la préparation ultérieure des cristaux d’hémine, ni la preuve spectrale. Tout au plus nuirait-elle (par le procédé des empreintes) à la préparation des globules, — mais on ne l’emploie pas sur une tache entière et jamais directement sur une tache dont on n’a pas d'abord enlevé, gratté tout ce que l'on pouvait. — Ce ne sont que les hors-d’œuvre qui lui sont nécessaires ; ces résidus inutiles aux autres preuves, elle en tire des résultats admirables, et en fait quatrevingts, cent fois la preuve du sang, quand le microscope et le spectroscope lui-même sont impuissants ! Que le sang soit jeune ou vieux, qu'il ait été soumis à toutes sortes d’influences, qu'il provienne de n'importe quel animal, qu'il n'y en ait que des traces infinitésimales, toujours la réaction l'accuse : du sang en solution si diluée que nous n’avons pu en obtenir les cristaux de Teichmann qu'avec peme et après des tentatives réitérées, avait gardé toute sa puissance intacte vis-à-vis du réactif, au point que

la préparation, malgré des additions renouvelées d'acide acétique et l’intervention de la chaleur longtemps prolongée, s’est colorée en bleu intense.

La connaissance des principaux corps qui bleuissent pas ces réactifs atténuentsingulièrementles dangers de confusion; un ou deux seulement d’entre eux, peuvent donner des taches dont l'aspect extérieur a quelque analogie avec celui des taches de sang. Taylor, Lefort, Phipson et d’autres, ont cité un grand nombre de corps qui bleuissent le Gayac, directement, sans intervention d’antozone. Ce sont : d’abord des oxydants directs et indirects : les manganates et permanganates solubles, les peroxydes de plomb et de manganèse, les sels ferriques, la mousse de platine, l'acide nitreux, les hypochlorites, les sels mercuriques ; le chlore, le brome, l’iode et probablement encore d’autres oxydants indirects, bien que l’eau oxygénée, le peroxyde de baryum et les corps antozonides n'aient aucune action; puis tous les composés du cyanogène (acide prussique, bleu de Prusse imprimé sur étoffe et qui a presque disparu au soleil, acide sulfocyanique), la salive et le mucus nazal doivent sans doute au sulfocyanure de potassium leur action oxydante sur le Gayac ; enfin, l’'ammoniaque et des ammoniaques composées,anilime, fumée et jus de tabac ; — la gomme arabique — Île gluten — la pâte de farine — le lait non bouilll — les sucs d’un certain nombre de végétaux (pomme de terre), le vin rouge (?) Certains champignons (boletus cyanescens ct B. luridus) le cuir (gants de peau): dans ce cas, la méthode des empreintes met à l'abri

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AG0ASE des erreurs). Mais tous ces corps ne sont pas à craindre, car ils ne peuvent donner leu à aucune erreur, puisqu'il bleuissent directement sans l’intervention d’antozone. En opérant ainsi que nous le faisons, c’est-à-dire en mettant d'abord le Gayac en contact avec le corps suspect, on est averti de Îa présence de l’un de ces corps par l'apparition de la couleur bleue. Si celle-ci ne se produit qu'après l’addition de l’antozone, on a très probablement à faire à du sang. D'ailleurs, en chauffant les taches produites par ces corps, la plupart perdent leur action oxydante vis-à-vis du Gayac, tandis que le sang la conserve le plus souvent très bien.

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