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Il faut éviter de se servir de pinces, qui déterminent une attrition des tissus.

Le suintement minime déterminé par la dénudation ainsi faite cesse en quelques instants. L’anticoagulant injecté dans lheure qui suit n’a aucune action nuisible. Si ces précautions ne sont pas prises, un suintement en nappe de toute la plaie peut se produire ; il dure souvent pendant toute la dialyse et oblige parfois à faire une transfusion en fin d'expérience pour

réparer l’anémie.

a) Préparation de l'animal en cas de prélèvement artériel,

Le plus souvent l’artère utilisée est une des grosses artères des membres, fémorale ou humérale. Quelquefois, cependant, nous avons, utilisé l'artère carotide.

Une canule, de verre ou de métal, est, après incision de la paroi artérielle au bistouri, introduite dans la lumière du vaisseau et soigneusement ligaturée.

Si l’on utilise une canule en verre, il faut remplir celle-ci préalablement de sérum hépariné (10 mg. d’héparine environ) ; aucune coagulation ne peut se produire dans la canule pendant que se poursuivent les autres préparatifs et que -l’anticoagulant n'a pas encore été introduit dans la circulation générale.

Ceite précaution n’est pas nécessaire si on emploie une canule de métal dont la lumière est obturée par un mandrin.

Quand le prélèvement du sang de l’animal se fait au niveau d’une artère, la canule artérielle est reliée à l’appareil par un

. tuke de caoutchouc. Ce tube est muni d’une dérivation en T,

sur laquelle est branché un manomètre à mercure qui inscrit sur un cylindre enregistreur les variations de la pression artérielle de l’animal. :

La dénudation de la veine au niveau de laquelle a lieu la réinjection n'offre pas de difficulté : le plus souvent nous utili- Sons ue veine profonde, satellite de l'artère dénudée.

Quelquefois, nous avons voulu utiliser pour la réinjection, non la veine satellite de l’artère, mais une veine superficielle, et notamment la veine par laquelle l’anesthésique a été injecté. Cetie méthode doit être proscrite.

“En effet, dans la plupart des cas, la réinjection du sang s’est heurtée à une résistance sérieuse (exp. n° 26, 36, 38, 42), et il a

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même été nécessaire de dénuder en un deuxième temps une veine profonde (exp. n° 36, 38).

Cette résistance opposée par la veine à la réinjection du sang est due aux altérations des parois et aux thromboses qui obturent en partie la lumière du vaisseau.

Ces altérations sont dues, d’une part, à l'injection de l’anesthésique, faite à une température assez élevée (40°) pour éviter sa précipitation dans la seringue ; d'autre part, au maintien en place, pendant une heure et plus, de la canule veineuse, qui supprime toute circulation dans la veine en amont, sur plusieurs centimètres.

8) Préparation de l’animal en cas de prélèvement veineux.

Le sang est ici prélevé au niveau d’une veine et non d’une artère. Ce prélèvement se fait au niveau de la veine cave inférieure. Il est réalisé par l'intermédiaire d’un cathéter.

La technique d’expérimentation n’est guère différente de la technique de prélèvement artériel.

L'appareil est monté de la même facon ; la seule différence est l'incorporation au circuit interne d’une pompe aspirante et foulante, permettant le prélèvement du sang dans la V.C.L et son refoulement dans l’appareil.

Les vaisseaux fémoraux sont mis à jour : au lieu d’introduire dans la veine une canule de verre ou de métal, c’est un cathéter de matière plastique de 25 à 30 cm. de long qui y est glissé ; il est introduit dans le vaisseau- sur la plus grande partie de sa longueur. Seuls les derniers 5 centimètres sont laissés hors du vaisseau ; nous disposons de plusieurs cathéters de diamètres différents (2 à 4 mm.) et nous employons le plus gros qui soit admis par la veine fémorale.

Une ligature est placée sur la veine autour du cathéter, serrée pour que le sang ne puisse s’écouler entre la paroi du vaisseau et le cathéter, sans cependant écraser le cathéter, toujours assez souple. En pratique, ce dernier peut être déplacé dans la lumière veineuse avec difficulté. Il est monté lui-même sur une canule de verre à laquelle fait suite un tube de caoutchouc de quelques centimètres de long. Avant que le cathéter ne soit introduit dans la veine, du sérum physiologique hépariné (10 à 20 mg.) est introduit dans la canule et le cathéter, et une pince. Mohr est serrée sur le caoutchouc. Ainsi, lorsque le cathéter est

en place, le sang ne peut pénétrer dans sa RICE et s’y coaguler.

La veine utilisée pour la réinjection est habituellement une des veines axillaires profondes.

Cette méthode d’éexpérimentation ne dispense d’ailleurs pas d'utiliser une artère ; en effet, la dénudation de celles-ci est chez le chien le seul moyen d'étudier de façon permanente la pression artérielle ; aussi, une artère, habituellement l’artère fémoraie, est dénudée et reliée par une tubulure de caoutchouc, ou mieux de matière plastique, au manomètre à mercure.

3) ANTICOAGULATION.

C’est seulement un quart d’heure après la fin de la dénudation que la substance chargée de prévenir la coagulation dans l'appareil est injectée. L’anticoagulant dont nous nous servons

“est l’héparine [10, 96, 207, 211/ 221, 222.

L’héparinisation doit être courte, mais forte : les doses initiales varient avec les auteurs et la durée du traitement ; elles sont habituellement de 200 à 400 milligrammes et sont complétées par de petites doses horaires ou bi-horaires, suivant les modifications du temps de coagulation.

Il est préférable d'éviter une charge d’héparine, pour éviter les accidents suivants [388] : Inhibition de certains enzymes [409], et surtout hémorragies, contre lesquelles le Bleu de Toluidine [176] ou le sulfate de Protamine [95, 107] doivent être utilisés. Ce dernier corps, surtout, est efficace ; « in vitro », il neutralise l’héparine à raison de i gramme pour 1 gramme 50

d’héparine [84].

-Pour notre expérimentation animale, nous ‘injectons l’héparine par voie veineuse, de préférence dans la veine où aura lieu la réinjection du sang : l’héparine est diluée dans 50 à 100 cc. de sérum physiologique apyrogène. La quantité à injecter varie avec le poids de l’animal. Nos premières expériences nous ont permis de définir avec une grande exactitude ces quantités d’anticoagulant :

N° de 2 Dose Concenl’expé- FOR initiale tration Observations rience kg. mg. par kg.

15 50 200 4 Coagulation au bout de 20 minutes. .

9 50 200 4 Coagulation. 3 17 45 300 6,6 Coagulation.

10 18 200 11 Fonctionnement satisfaisant.

16 40 ? 400 10 d° 7 17,2 100 5,8 Coagulation.

14 18 120 6,6 Baisse de débit.

8 17 | 150277 9 Fonctionnement satisfaisant.

11 12,2 140 11,2 Coagulation au début.

35 17,2 340 20 Hémorragie.

13 12,5 100 8 Coagulation. .

6 10 200 20 ” Fonctionnement satisfaisant.

Nous constatons donc que :

— des quantités d’héparine inférieures à 10 milligrammes par kg. sont insuffisantes pour empêcher la coagulation du sang au cours de sa traversée de l’appareil ;

— des quantités d’héparine élevées, de 20 milligrammes par kg.;sont parfois bien tolérées, mais en d’autres cas entraînent des hémorragies ;

— des quantités d’héparine de 10 à 20 milligrammes par kg.

n’entraîinent jamais d’accidents.

C’est pourquoi, au cours de nos expériences ultérieures, nous avons utilisé des doses d’héparine de 12 milligrammes par kg. qui nous ont permis de faire circuler le sang dans l’appareil sans que se produise la moindre coagulation ; en outre, jamais nous n’avons observé d’hémorragie chez l’animal en expérience.

Néanmoins, cette dose d’héparine doit être injectée un quart d'heure à une demi-heure avant le début de l'expérience, de telle façon qu’elle ait le temps d'agir sur le sang-cireulant. Faute d’avoir respecté cette règle, nous avons, dans un cas, assisté à la formation de caiïllots dans l’appareil pendant les premières minutes de fonctionnement.

La quantité d’héparine injectée permet d’assurer pendant trois heures la circulation du sang dans l’appareil, sans que la

fermeture ultérieure de la paroi entraîne la moindre hémorragie.

Si l'expérience doit se prolonger plus de trois heures, une nouvelle injection de 60 à 80 milligrammes d’anticoagulant permet un fonctionnement satisfaisant pendant les trois heures suivantes.