Annales '/<• l'Institut Pasteur, 1904, p. ~>x

Les divers venins sont Ions hémolytiques, niais à des doses 1res variables. On peut les étudier comparativement avec une grande précision à ce point de vue spécial, en prenant pour hase pour chaque venin, comme l'a fait Noc, la dose unitaire de I milligramme (ou t dixième de centimètre cube d'une solution à I pour 100 fraîchement préparée et non liltrée, la filtration sur porcelaine retenant une partie appréciable de la substance active), et en notant le temps strictement nécessaire pour que cette dose de 1 milligramme dissolve complètement, in vitro, 1 centimètre cube d'une dilution de globules rouges de cheval à à pour 100 dans l'eau salée physiologique.

Il est très important, avant de l'aire agir le venin sur les globules rouges, de laver d'abord ceux-ci par plusieurs centrifugations successives avec de l'eau salée physiologique à 8 pour 1000.

On doit aussi préférer les globules de cheval à ceux d'autres espèces animales, parce qu'ils présentent une sensibilité moyenne à peu près constante. Les globules de bœuf, de chèvre, de mouton, de lapin, sont moins sensibles. Ceux de l'homme, du cobaye, du rat, sont au contraire plus sensibles.

En effectuant les expériences avec des globules lavés, on constate que le venin seul est incapable de dissoudre ceux-ci. Pour que la dissolution ait lieu, on est obligé d'ajouter au mélange, soit une petite quantité de sérum normal de cheval, chauffé de préférence et, par suite, privé d alexine (Cal nielle), soit 0 ce. 5 d'une solution de Iécithine à 1 pour 10 (MM) dans l'eau salée physiologique P. Kyes).

Le venin n'est donc capable d'héinolyser les globules rouges ipie lorsqu'il est activé soit par du sérum normal chauffé, soil par la lécilhine. La solution de Iécithine que l'on emploie alors doit être préparée en dissolvant I gramme de Iécithine dans 100 grammes d'alcool méthylique pur. On prend 1 centimètre cube de cette dilution que l'on porte dans 9 centimètres cubes d'eau salée à 8 pour 1000, et on fait une seconde dilution de

l't/YSIOLUUΠDE l.k.Xl /:.X IM.\ ll< >.\ 207

I centimètre cube <ln précédenl mélange dans !l centimètres cultes d'eau salée. Cette dernière dilution au dix millième esl ni ilisée pour la réaction.

Commenl agil ici le sérum ou la lécithine?

/'. Kyes a montré qu'avec l'une ou l'autre de ces substances le mécanisme de l'action hémolytique esl le même, car le sérum n'active le venin que grâce à la lécithine libre qu'il contient. Et la lécithine intervient dans la réaction en se combinant au venin pour former un lécithide hémolysant, plus résistant à la chaleur que ses deux composants, car il supporte plusieurs heures de chauffage à 100 degrés sans rien perdre de ses propriétés.

Lorsqu'on met en présence le venin avec certaines espèces de globules rouges très sensibles, ceux de rat par exempte, ces globules, quoique lavés et débarrassés de sérum, peuvent subir l'hémolyse. Cela lient alors à ce que ces globules renferment des quantités suffisantes de lécithine qui se déplace dans le protoplasma des hématies pour s'unir au venin et constituer le lécithide actif.

( )n savait déjà que la lécithine esl capable de se combiner aux diverses matières albuminoïdes et avec les sucres pour former îles lécithides. On ne doit donc pas être surpris que celte combinaison puisse s'effectuer avec les matières protéiques du venin. Il s'agit là d'une véritable combinaison chimique. La lécithine en nature, ou celle qui se trouve normalement dans les sérunis activants du venin, comme le sérum de cheval, même chauffé à 65 degrés, joue donc le rôle de complément d'après la théorie d'Ehrlich, ou celui d'aleviné d'après la théorie de Bordel, alors que le venin lui-même serait un ambocepteur ou une sensibilisatrice.

Ce n'est cependant pas ainsi qu'il faut comprendre le phénomène, car on ne saurait admettre l'identification du sérum chauffé ou de la lécithine avec les substances complémentaires ou alexines, attendu que celles-ci ont pour caractère essentiel d'être thermolabiles et de perdre toute activité par le chauffage à 58 degrés ou

208 LES VHNIA'H

même par la simple conservation pendant quelques jours à l'air et à la lumière. II faul donc admettre avec P. Kyes et //. Sachs qu'il existe dans les globules rouges eux-même des corps capables de jouer le rôle de complément endo-compléments et que c'est avec eux que le venin se combine lorsqu'il est activé par la présence de lécithine ou de sérum chauffé, ce dernier n'agissant d'ailleurs que parce qu'il renferme de la lécithine libre.

Toutes les substances qui renferment de la lécithine. telles que la bile, le lait chauffé, la céphaline, sont capables d'exercer la même action activante et, par elles-mêmes, elles ne sont douées d'aucun pouvoir hémolytique.

Par contre, la cholestérine représente une sorte d'antidote de la lécithine. comme aussi des sérums normaux. Elle empêche l'hémolyse des globules rouges dans un mélange d'hématies lavées -fvenin. Et pourtant elle ne modifie en aucune manière les propriétés des véritables alexines ou compléments.

Il n'existe d'ailleurs aucune corrélation entre les lécithides et la neurotoxine tics venins. La combinaison lécithine -+- venin est hémolysante mais nullement neurotoxique. Inversement, le venin peu! être débarrassé de ses groupements moléculaires combinables à la lécithine et rester neurotoxique.

Le lécithide est insoluble dans l'éther et l'acétone, mais soluble dans le chloroforme, l'alcool, le toluène et l'eau. Ses propriétés sont donc tout à fait distinctes de celles de ses deux composants. 11 se précipite lentement de ses solutions aqueuses, sans perdre son pouvoir hémolytique; il ne donne pas la réaction du biuret; il dissout également les globules rouges de toutes les espèces animales et ses effets, comme ceux du venin, sont empêchés par la cholestérine.

Kyes a réussi à obtenir des lécithides avec tous les venins liémolytiques qu'il a pu étudier : il a préparé ainsi des lécithides de Lachesis lanceolatus, de Naja haje, de Bungarus, de Lachesis flavoviridis riukianus du Japon cl de Croit/lus. Le groupe lécithinophile

PHYSIOLOGIE DE L'ENVENIMATION 209

existe donc vraisemblablement dans tous les venins, alors même que ceux-ci diffèrent par leurs autres propriétés.

Les différences que présentent entre eux les divers venins, au point de vue de leur pouvoir hémolysani eu présence de sérum normal chauffé ou de lécithine, sont très variables. Le venin de Naja et celui de Bungarus sont les plus actifs. Ceux de Viperidae, surtout ceux de Crotalus, ont une action très affaiblie. Alors que I milligramme de venin de Cobra par exemple dissout en 5 à 10 minutes 1 centimètre cube de dilution de globules rouges à 5 pour 100 en présence de lécithine ou de sérum normal chauffé, la même dose de venin de Vipera russelii met trente minutes à effectuer celle dissolution et le venin deLachesis lanceolatus met trois heures.

P. Kyes et II. Sachs ont constaté ce t'ait en apparence paradoxal que, si l'on ajoute aux globules rouges de certaines espèces animales du venin de Cobra à doses croissantes, l'hémolyse augmente jusqu'à une certaine limite optima, au delà de laquelle la destruction globulaire diminue progressivement. A dose massive, le venin de Cobra n'exerce plus aucune action sur les globules de cheval par exemple, alors même que le venin est ajouté en présence d'un grand excès de lécithine ou de sérum chauffé. Il semblerait donc que, d'après la théorie cYElniich, sous l'influence d'un apport exagéré de venin-ambocepteur, il se produit une déviation du complément (sérum ou lécithine), et ce dernier, au lieu de se fixer sur les globules, s'unirait à la fraction des ainbocepteurs en excès, demeurée libre dans le liquide.

Noguchi1, reprenant l'étude de cette action si curieuse des fortes doses de venin, observa que les globules rouges de certaines espèces animales (cheval par exemple), préalablement lavés et mis en suspension dans une solution physiologique de sel marin contenant 4 pour 1(1(1 de venin de Cobra, acquièrent une augmentation considérable de résistance à l'égard de divers agents phy-