‹ Manipulations de physiologie; guide de l'étudiant au laboratoire pour les travaux pratiques et les démonstrations de physiologieChapitre 50 sur 84 · II. — Urine de cdeval · texte numérisé non relu

II. — Urine de cdeval

169. Préparation de l'acide hippurique. — Évaporez dans une capsule (dans la cage d'évaporation) un quart de litre ou un demi-litre d'urine fraîche de cheval, de manière à réduire le liquide au dixième du volume primitif. Laissez refroidir complètement, et ajoutez 20 (ou 40 centimètres cubes) d'acide chlorhydrique; mélangez les deux liquides, et attendez jusqu'au lendemain le refroidissement complet : dépôt d'acide hippurique cristallisé.

Filtrez, de manière à recueillir sur le filtre les cristaux d'acide hippurique : le liquide filtré servira à la préparation du phénol et du crésol (n° 172). Lavez l'acide hippurique sur le filtre avec un peu d'eau froide, dissolvez les cristaux dans un peu d'eau bouillante : l'acide hippurique cristallise par le refroidissement.

170. Réactions de l'acide hippurique. — Les cristaux obtenus au n° 169 sont séchés au moyen d'un peu de papier à filtre, et servent aux essais suivants :

a) Chauffez modérément dans un tube à réaction, un peu d'acide hippurique : l'acide fond, et se transforme en un liquide huileux, qui se prend en cristaux par le refroidissement. Chauffez plus fort : la substance fond et se colore en rouge, monte le long des parois du tube, donne un sublimé d'acide benzoïque, et développe une odeur assez agréable, rappelant d'abord celle du foin, puis celle de l'acide cyanhydrique.

b) Chauffez modérément dans un tube à réaction, gros comme un pois d'acide hippurique avec quelques gouttes d'acide nitrique : il se forme du nitrobenzol qui présente l'odeur d'amandes amères. [Réaction de Liicke.)

c) Dissolvez un peu d'acide hippurique dans l'eau, ajoutez quelques gouttes d'une solution neutre de chlorure ferrique : précipité brun d'hippurate ferrique.

171. Acides aromatiques. — L'urine de cheval, acidulée par 5 p. 100 d'acide sulfurique (ou le liquide filtré provenant de la préparation de l'acide hippurique n° 169, et dilué avec deux volumes d'eau) est distillée dans un matras, sur le trépied en

fer garni d'une toile métallique (fig. 168). Arrêtez la distillation, quand un tiers environ du liquide a passé dans le récipient.

Les produits de la distillation sont condensés au moyen d'un réfrigérant de Liebig, et recueillis dans un récipient constitué par un second matras. Le tube inférieur du réfrigérant est relié par un tube en caoutchouc à la distribution d'eau ; le tube supérieur est relié par un caoutchouc à la coquille servant de décharge.

L'acide sulfurique décompose le jjhénylsulfate et le crésylsulfate de potassiimi^ forme du sulfate acide de potassium, et

Fig. 168. — Distillation de l'uriue de cheval additionnée d'acide sulfurique.

met \e^ phénol (CgHg.OH) et le crésol [C^ H4.CH3.OIi) en liberté. Ces deux corps sont volatils, et passent avec la vapeur d'eau dans le récipient.

172. Phénol et crésol. — Le liquide recueilli par distillation au n°171,a une forte odeur de phénol. Exécutez avec ce liquide les réactions suivantes, qui sont communes au phénol et au crésol :

a) Mélangez dans un tube à réaction, 2 centimètres cubes et demi de ce liquide avec un égal volume d'eau de brome : il se forme bientôt un précipité cristallin blanc jaunâtre (mélange de tribromophénol, CgH^BrgOH et de bromure de tribromocrésol, C^H,.CBr3.0Br). '

b) Mélangez dans un tube à réaction, 2 centimètres cubes et demi de liquide, avec un égal volume de liqueur de Millon : coloration rouge. Chauffez, si la coloration ne se montrait pas déjà à froid.

c) Mélangez dans un tube à réaction, 2 centimètres cubes et

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demi de liquide, avec quelques gouttes de solution de perchlorure de fer neutre : coloration d'encre.

173. Indigo. — Mélangez, dans une capsule, 25 à 50 c. c. d'urine de cheval, avec égal volume d'acide chlorhydrique fumant. A joutez, goutte à goutte, au moyen d'une baguette de verre, de la solution d'iiypochlorite de sodium, jusqu'à formation d'un dépôt bleuâtre d'indigo. Le mélange doit être agité après addition de chaque goutte d'hypochlorite, et il est essentiel de ne pas en ajouter trop. Un excès d'hypochlorite décompose l'indigo : le liquide perd sa teinte bleuâtre, et se décolore.

La meilleure façon d'opérer consiste à avoir à sa disposition une seconde capsule de porcelaine, dans laquelle on verse de temps en temps une petite quantité du mélange, que l'on essaye en y ajoutant une goutte d'hypochlorite. Si cet échantillon bleuit davantage, on peut continuer à verser de Thypochlorite dans le mélange de la première capsule. Si au contraire, l'échantillon se décolore par addition d'une seule goutte d'hypochlorite, c'est un signe que le point d'oxydation correspondant à la formation de l'indigo a été dépassé. Arrêtez l'addition d'hypochlorite, et filtrez le mélange sur un entonnoir (sans filtre) garni d'un petit tampon de verre filé fortement tassé, que vous enfoncez au moyen d'une baguette de verre à l'entrée de la douille de l'entonnoir. Le verre filé fait office de filtre, et retient les particules d'indigo ou tout au moins une partie notable de l'indigo. Faites au besoin repasser le liquide deux ou trois fois sur le verre filé. Lavez à l'eau, puis à l'alcool ; détachez le tampon et laissez-le sécher. Quand le tampon chargé d'indigo est sec, vous le divisez en deux parties.

Chauffez la moitié au fond d'un tube à réaction bien sec : vapeurs violettes, et sublimé d'indigo (aiguilles cristallines qui se déposent en enduit bleuâtre sur les parties froides du tube).

Traitez l'autre moitié, au fond d'un tube à réaction, par quelques centimètres cubes de chloroforme : solution violette.

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