‹ Manual technique de microbiologie et sérologieChapitre 10 sur 241 · A. — PROCÉDÉ AU PAPIER DE TOURNESOL · texte numérisé non relu

A. — PROCÉDÉ AU PAPIER DE TOURNESOL

Les bouillons préparés avec des peptones commerciales, et surtout avec la peptone Martin, ont généralement une réaction acide qui convient mal à É Te des bactéries. Pour les amener à la neutralité au tournesol, on ajoute peu à peu de petites quantités de solution normale de soude (à 40 pour 1.000) en mélangeant intimement, par agitation de la masse, avec une baguette de verre. Après chaque addition de soude on prélève une goutte de bouillon qu’on porte sur du papier de tournesol bleu et sur du papier de tournesol rouge. La teinte lilas correspond à la neutralité. Comme un grand nombre de bactéries se multiplient plus activement en milieu alcälin qu’en milieu acide, on ajoute, à partir du point neutre, 5 centimètres cubes de solution normale de soude par litre de bouillon.

B. — PROCÉDE A LA PHENOLPHTALÉINE

Ce procédé n’est applicable qu'à des liquides froids. Verser 10 centimètres cubes de bouillon à alcaliniser dans une fiole de Fourneau. Ajouter un volume suffisant d’eau distillée pour que le liquide apparaisse faiblement coloré en jaune, puis quelques gouttes de solution à 2 pour 100 de phtaléine du phénol dans l'alcool et agiter. Neutraliser en laissant tomber goutte à goutte de la solution décinormale de soude contenue dans une burette graduée, en mélangeant très intimement jusqu'à ce qu'une faible teinte rouge orangé apparaisse. À ce moment, on note le volume de solution sodique employé et on en ajoute deux nouvelles gouttes qui accentuent le virage. Pour neutraliser un litre de bouillon, il suffira d'y ajouter une quantité de soude cent fois plus grande que la quantité employée dans le précédent titrage.

C. — MÉTHODES ÉLECTROMÉTRIQUE ET COLORIMEÉ- TRIQUE POUR LA DÉTERMINATION DES CONCENTRA- TIONS IONIQUES DES MILIEUX

Les méthodes au tournesol et à la phénolphtaléine ont l'inconvénient de ne pas indiquer l'acidité ou l’alcalinité vraie. Elles sont actuellement remplacées, dans les laboratoires, par les méthodes électrométrique et colorimétrique qui permettent de mesurer exactement la concentration en ions H+ et OH- libres des solutions.

Dans une solution aqueuse d'acide fchlorhydrique par exemple), il existe à la fois des ions HT et CI- libres, et une fraction non dissociée de la molécule HCI d'acide. Le rapport entre le produit des ions libres et la fraction non dissociée exprimé en molécules-grammes, est constant pour

une température donnée Rs — K. Cette constante de

dissociation est caractéristique de chaque acide. De même pour des ions OH — des bases.

On choisit comme unité de concentration en ions H, la solution normale d’un acide qui renferme, par litre, 1 gramme d'hydrogène susceptible de sescombiner avec une quantité équivalente d'ions OH.

L'eau pure est neutre et renferme, à la température ordinaire, environ 1 X 10-7 atomes grammes d'ions H+ et 1 x 10-7 molécules grammes d'ions OH-. Le nombre de molécules d'eau non dissociées étant constant, le produit ionique devient K, = H+%X OH, soit 1 X 10:14, Pour éviter lemploi de nombres si infimes, Sôrensen les a remplacés par le logarithme du nombre inverse désigné par le symbole pH. La concentration des ions H+ par litre

; 1 gs (1-7 7 dans l'eau pure étant de 1 X 10-7 ou 10-000 00° l'inverse

de 10.000.000 a pour logarithme 7, pH = 7.

Toute solution, quelle que soit son acidité ou son alcalinité, renferme une certaine teneur en ions H+ dont la concentration sert de mesure dans les deux cas.

Une solution N d'acide complètement ionisée a une concentration en ions H+ de 1 X 1, pH= O.'

Une solution . d'acide a une concentration en ions H de 1 X 10-1pH = 1:

Une solution 7 d'acide a une concentration en ions H de 1 X 10-2pH — 2.

ce solution ; on d'acide a une concentration en ions H de TO 10% pH — 3.

Une solution N d’alcali complètement ionisée aurait une concentration en ions H+ de 1 X 10:14 pH — 14.

: N = é 2 Une solution 1 d’alcali aura une concentration en ions

LD deal ="):

Pour transformer en pH une concentration H+ de

n X 10P, on additionnera le logarithme n à n — p. F2 0" los. Fi on aura 0,3 + (— 7) = — 6,7 DHE=6,7

Page 1