I. — Trypanosomes

Les trypanosomes sontdes flagellés à membrane ondulante bordée par un flagelle qui se termine en avant par une partie libre ; noyau, blépharoplaste ou centrosome. Ce sont des parasites du sang des vertébrés.

A.— Recherche des trypanosomes dans le sang.

— 19 Examen du sang entre lame et lamelle à l’état frais ; 20 coloration des frottis de sang.

Etaler sur une lame, en couche mince, une goutte de sang de l'animal trypanosomé. Dessécher rapidement en het la lame.

Procédé de Giemsa.

Fixer le frottis en le recouvrant pendant une dizaine de minutes d'alcool absolu jusqu'à évaporation, puis colorer par la solution de Giemsa.

a) Coloration rapide. — Colorer pendant 40 à 50 minutes par la solution de Giemsa obtenue en mélangeant un centimètre cube de colorant de Giemsa avec 20 centimètres cubes d’eau légèrement alcaline. Verser ce mélange dans une boîte de Laveran, où l’on dépose la lame, frottis en bas, de façon à éviter le dépôt des précipités. Laver rapidement à l'eau.

b) Coloration lente. — Diluer le colorant de Giemsa à 1/2 centimètre cube pour 20 centimètres cubes d’eau. Laisser en contact pendant 16 heures dans une boîte de Laveran. S'il y a surcoloration, différencier rapidement au tanin à 5 p. 100.

Procédé paroptique. — Sur un frottis non fixé, verser

TRY PANOSOMES 463

XV gouttes de la solution de May-Grünwald. Recouvrir d’un couvercle de boîte de Pétri pour empêcher l’évaporation. Après 3 minutes de contact, ajouter XV gouttes d’eau distillée. Au bout d’une minute, rejeter le colorant et, sans laver, verser sur le frottis la solution de Giemsa diluée (III gouttes pour 1 centimètre cube d’eau de robinet). Laisser une heure, laver et sécher.

3° Coloration des coupes (par exemple de Schizotrypanum Cruzi dans les muscles).

Procédé de Laveran. — Préparer le mélange suivant au moment de l'emploi :

Éosineanlip li 000 SR 4 parties.

FOUT OISUIC OR NN RE ET O0 10 parties.

Verser ce mélange dans une boîte de Laveran, ajouter 1 partie de bleu Borrel à l’argent, déposer la coupe face en bas. Laisser colorer 20 minutes. Laver rapidement à l’eau

Fig. 14 (à gauche). Trypanosoma gambiense dans le sang du rat : 1 et 4, formes adultes ; 2, 3, 8, 9, différents stades de la division en deux ; 5, 6, divisions multiples ; 7, forme jeune sans flagelle (d'après Brumpt).

Fig. (en haut à droite). Spirochètes de la tick fever abyssine dans le sang du rat ; £g, b, globule blanc ; g, r, globules rouges (d’après Brumpt).

Fig. (en bas à droite) Corps de Leishman dans un frottis de pulpe splénique ; C. Leis. Leishmania, gr, globule rouge, N, noyaux de mononucléaires (d’après Brumpt).

courante et différencier quelques secondes au tanin orange ou à la solution aqueuse de tanin à 5 p. 100. Laver à l’eau, sécher.

B. — Culture des trypanosomes. — Se fait dans le liquide de condensation de la gélose au sang de Novy et Mac Neal-Nicolle (Milieu N. N. N.) (voir page 48).

La culture des trypanosomes non pathogènes est facile. Celle des trypanosomes pathogènes est difficile, sauf Schizotrypanum Cruzi.