PRÉPARATION DES COUPES

pendant plusieurs jourssans inconvénients (jusqu’à8 jours). On les reporteensuite dans de l'alcool à 90° qu’on change 2 ou 3 fois. C'est un excellent fixateur, très recommandable pour toutes les recherches bactériologiques et particulièrement pour celles qui portent sur les protozoaires.

i) Fixateur de Bouin-Duboseq (recommandé par Chatton pour les amibes) :

AlGoGien OO AR TE Leurs #15) cc:

Foro CONTIReErE A PER RTE RAR 60 cc.

Acide acétique glacial. . . . . . . . 15 cc.

Acide racriqueicristallisé 2.2. Mn ler

j) Fixateur de Stamm (recommandé pour les arthropodes) : Mélange bouillant, à parties égales de formol au quart et de sublimé saturé.

Nota. — Les fixateurs à base d'acide osmique, d’acide chromique, de bichromates, de chlorure d’oret le mélange de Flemming, gênent plus ou moins les colorations. Celles-ci ne sont pas défavorablement influencées par les alcools, l’éther, le sublimé, l'acide picrique, le formol et le liquide de Bouin.

B. Inclusion des fragments d'organes destinés à la microtomi»:.

a) Déshydratation de la pièce.

Porter dans alcool à 90° (6 à 12 heures), puis dans l'alcool absolu (6 à 24 heures suivant les dimensions des pièces).

On peut supprimer le bain d'alcool à 90° et faire passer directement la pièce du fixateur dans l'alcool absolu, mais dans ce cas, changer une ou deux fois le bain d’alcool absolu

Imbibition parle xylol. Placer dans le xylol (6 à 12 heures).

Inclusion dans la paraffine. Plonger d’abord la piècedans un mélange de xylol et de paraffine molle à parties égales, à l’étuve à 370 et l'y laisser 3 à 6 heures.

Puis, dans la paraffine fondue, à l’étuve à 50-550; ne pas dépasser 600. Durée de séjour : 3 à 6 heures.

Enfin, porter dansun second bain deparatfine fondue pour éliminer toutes traces du dissolvant dela paraffine.

MIC?ORIOLOGIE

Couler dans les moules et immerger dans l’eau froide dès que la paraffine a fait prise.

Nota. — On prend en été de la paraffine fusible à 55°, en hiver de la paraffine molle (point de fusion 45-50) 1.

On peut remplacer le xylol par le foluène ou mieux, pour les objets délicats, par l'essence de bois de cèdre qui éclaircit parfaitement, sans durcir.

c) Collage des coupes sur lames par l'albumine de Mayer :

Albumibe d'œuf eme ere 30 ce.

Eau”distiliée te 000 ERIC RE 5 cc.

Glyéérinegr SORTE. IUICcC:

Bien mélanger et ajouter :

Menthol ou thymol, un cristal, ou 1 gramme de salicylate de sodium dissous dans un peu d’eau, puis filtrer sous verre à l'abri des poussières. (Cette filtration est très lente.)