MÉTHODES DE CULTURE IN VIVO

(Procédé des sacs de collodion ou de moelle de roseau.)

A. — Préparation des sacs de collodion pour cultures in vivo.

La meilleure technique pour préparer les sacs de collodion consiste à utiliser comme moules soit, comme l'a fait Maurice Nicolle, des cylindres en sucre candi fondu, bien secs et lisses, auxquels il est facile de donner les formes et les dimensions les plus variables, soit des tubes à essai ou des tubes fermés en cul-de-sae à l’une de leurs extrémités, puis perforés de dehors en dedans, au milieu de cette extrémité, d’un seul orifice de 1 à 2 millimètres de diamètre.

On bouche ce trou du verre avecune solution épaisse de gélatine. On laisse sécher à l’étuveà 370.

Lorsque la gélatine est bien sèche, on plonge le tube dans un bain de collodion, en évitant avec soin de faire des bulles d'air, on le retire aussitôt pour l’égoutter et on lui imprime un mouvement de rotation transversale entre les doigts. pour que lévaporation de l'éther s'effectue rapidement et régulièrement.

Dès que le collodion est sec, on plonge le tube dans de l’eau tiède, à 40° environ, et on en remplit l’intérieur. L'eau dissout peu à peu la gélatine et on attend que le sacde collodion apparaisse libre à la surface du verre. En soufflant légérement par l'extrémité ouverte du tube, on le démoule avec la plus grande facilité. |

Il ne reste plus qu’à fixer le sac sur un support formé. par exemple, d’un tube de verre de même diamètre, étranglé et pouvant être scellé ou obturé par un bouchon, avec une couche de collodion appliquée à sec, au pinceau, ou avec une ligature au fil de lin ou de soie. On le stérilise ensuite dans un tube à essai contenant un peu d’eau.

Procédé d'Auguste Lumière et Jean Chevrotier :

Pour éviter les ruptures qui se produisent au moment du décollementdu sac, ces auteurs ont modelé, au moyen d’une pâte plastique, consistante et soluble dans l'eau, de petits moules ayant la forme etles dimensions que l’on désire donner aux sacs. Le mélange est constitué par 1 partie de sirop de glucoseet 2 parties de sucre en poudredit« sucre glace ».

La manipulation et le modelage de ces moules doivent s'effectuer avec les doigts, légèrement imprégnés d’eau, ou des instruments mouillés, pour éviter l’adhérence de la pâte aux mains de l'opérateur ou aux outils de modelage.

Ces moules sont fixés à l'extrémité d’agitateurs en verre ou de tiges métalliques et immergés dans un collodion à 4 p. 100 de nitro-cellulose. On imprime à la tige de soutien un mouvement de rotation pour répartir uniformément la couche de collodion ; on laisse sécher, puis on suspend le dispositif ainsi préparé à la partie supérieure d’un récipient rempli d’eau.

Le liquide traverse l'enveloppe perméable, dissout la masse sucrée et, au boutde 2 heures environ, le sac se trouve libéré.

L’orifice de ces sacs peut être très petit, permettre seulement le passage d’une aiguille creuse, de sorte que leur occlusion est aisément réalisée et leur étanchéité peut être assurée.

B. — Préparation du collodion pour disques et sacs dialyseurs.

Pour un litre :

Coton azotique (bien échardé, sans gru- IMCAUX DT ANUS) NC A NE 40 gr.

Alcholabsolu.s'ti 0 CEROART TR E5 00 cc:

Laisser tremper au minimum 24 heures, agiter de temps en temps. Ajouter :

Ethers tt fanuethe ee CR RSR PRES O0 cé

La dissolution sefait en une demie-heure environ. Remuer avec une baguette de verre. Ajouter:

Giscérine ARSOSBe NE. DÉPIT 90 cc.