V. — PROPRIÉTÉS DU SÉRUM ANTIDIPHTÉRIQUE

Mesure du pouvoir préventif du sérum antidiphtérique.

- La propriété que possède le sérum antidiphtérique de préserver un animal contre une dose mortelle de microbes ou de toxine a été une de- premières connue et étudiée; il faut dire du reste que cette étude est facile etqu'on peut aisément mesurer le pouvoir préventif. Prenons [tour cela un cobaye de N grammes, il nous sera facile de lui injecter sous la peau 1/10, 1/100, 1/1000 de son poids, et vingtquatre heures après d'injecter un nombre tixe de doses mortelles de toxine ou de microbes. Si le cobaye survit, on dit que le sérum est actif au 1/10, au 1/100, au 1/1000. Le sérum sera d'autant plus fort que la dilution sera plus grande, que le nombre qui divisera N sera plus grand.

Cette méthode qui a été tout d'abord employée par Behring, puis par MM. Roux et Martin, a été remplacée par la méthode d'Ëhrlich qui dose l'antitoxine.

La mesure du pouvoir préventif était simple, mais tous les laboratoires ne pouvaient pas la pratiquer avec des facteurs toujours identiques. Si l'on employait la toxine pour éprouver les cobayes, il était difficile d'injecter une dose de toxine toujours équivalente ; si on se servait de microbes, il aurait fallu pour tous le- laboratoires

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le même microbe, cultivé dans des conditions semblables, dans des milieux toujours les mêmes ; ce n'était pas réalisable, aussi les dosages variaient avec chaque laboratoire.

Malgré tout on doit rechercher le pouvoir préventif ; car on doit étudier toutes les propriétés des sérums et en tenir compte dans la pratique.

Mesure du pouvoir aulitoxique du sérum antidiphtérfque. — C'est Ehrlich qui, le premier, a proposé de doser les sérums en mesurant le pouvoir antitoxique; pour cela il cherchait au début quelle quantité de sérum neutralisait 100 doses mortelles de toxine. Si un centimètre cube de sérum neutralisait 100 doses mortelles, on disait que ce centimètre cube contenait une unité antitoxique. On s'aperçut bientôt qu'une unité antitoxique ne neutralisait pas toujours 100 doses mortelles ; ainsi présentée, la méthode n'était pas précise.

Puis Ehrlich a montré que si on prend différentes toxines X, Y, Z, et un même sérum A, le sérum A neutralise 60 doses toxiques de X,100 doses toxiques de Y, 120 doses toxiques de Z.

On ne peut donc pas avoir des résultats comparables, en partant de cette idée qu'une unité est la dose de sérum capable de neutraliser 100 doses mortelles.

Ehrlich a indiqué, en outre, que pour une même toxine, un sérum A neutralise 120 doses mortelles quand la toxine est fraîche et 60 doses mortelles quand la toxine est ancienne.

On ne peut donc pas se servir de la toxine comme point de départ.

Au contraire, lorsqu'on se sert d'un sérum qui a été bien dosé, on voit que ce sérum se conserve avec toutes ses propriétés lorsqu'il est maintenu bien desséché au froid et dans le vide.

Ehrlich, après de longs travaux, a défini et déterminé une unité antitoxique, et c'est à cette unité que tous les laboratoires ont actuellement recours quand ils veulent rechercher la valeur d'un sérum.

Ce serait trop long d'expliquer comment Ehrlich a déterminé son unité, qui, dans la notation, s'écrit : l.E. Il n'est, du reste, pas nécessaire de savoir comment on a déterminé le mètre pour mesurer une route; on accepte généralement le mètre comme unité de mesure. Acceptons de même l'unité de mesure d' Ehrlich.

Pour permettre le dosage des sérums, Ehrlich envoie dans les laboratoires des solutions glycérinées de sérum qui contiennent par centimètre cube 17 unités; pour avoir une unité) on prend tin centimètre cube du mélange glycérine qu'on dilue dans 16 d'eau.

MESURÉ DU POUVOIR ANTITOXlQUE DÛ SÉRUM. 151

ce qui donne un total de 17 centimètres cubes du mélange contenant 17 unités. En prenant 1 centimètre cube on aura l unité ou I.E.

Avec cette unité de mesure, on détermine d'abord la limite mortelle ou L + d'une toxine X.

Dans la pratique, voici comment on opère: on prend un LE. et on mélange cette unité à 1 centimètre cube de toxine, puis, à 0,9 ; 0,8; 0,5; 0,1 ; le mélange est ramené à un volume toujours le même : 4 centimètres cubes.

Ces 4 centimètres cubes sont inoculés sous la peau à des cobayes dont le poids est voisin de 300 grammes.

En suivant l'expérience, on voit que tous les cobayes de 1 à 0,5 meurent en moins de 4 jours;

Que le mélange I.E. -h 0,4 de toxine tue en 3 jours 1/2 ;

Que le mélange I.E -+- 0,3 tue en 4 jours 1 /2.

La limite L -f , qui, par définition, est pour une toxine la quantité X dont le mélange avec LE. tue un cobaye en 4 jours, se trouve donc entre 0,4 et 0,3.

Alors on recommence l'expérience et on prend LE. + 0,31 ; 0,33; 0,35; 0,37 ; 0,39 ; et on voit que le mélange l.E + 0,35 tue le cobaye en 4 jours.

Pour plus de précision, on inocule 3 cobayes avec des mélanges de LE et 0,33; 0,34; 0,35 ; 0,36; 0,37 de toxine et on voit que 0,35 est bien le L-K

Quand L -h est bien déterminé, on dose alors le nouveau sérum de la façon suivante : on mélange dans un verre L -f- soit 0,35 de toxine avec 1 centimètre cube d'une solution de sérum au deux centièmes, on inocule le mélange à un cobaye. Si le cobaye meurt en moins de 4 jours, c'est que le sérum a plus de 200 unités.

Pour rechercher 300, 500, 1 000 unités, on fera des solutions de sérum au 1/300, au 1/500, au 1/1000.

Dans la pratique, voici comment nous opérons : nous essayons le sérum de tous les chevaux à 200 et 300 unités; nous rejetons tous ceux qui ne tiennent pas à 200 unités antitoxiques au centimètre cube.

Les sérums pettVent avoir 500 unités lorsqu'ils sont très actifs; quelquefois mais très rarement on a eu des sérums titrant I 000 unités.

Valeur des sérums — La méthode d'Ehrlîch telle que nous

venons de L'indiquer est actuellement universellement adoptée pour koser les sérums antidiphtériques el on dit couramment tel sérum a

200, 500 unités (l'Ll.rlich.

Sans préjuger la question dé -avoir si Les sérums qui ont les pins fortes unités sont les meilleurs en thérapeutique, nous devons indi-

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quer quelle est, d'après nos expériences, la meilleure méthode pour obtenir de fortes unités.

xM. Prevot a fait à Garches des expériences comparatives en inoculant des chevaux avec de la toxine iodée et d'autres avec un mélange de sérum et de toxine suivant le mode indiqué plus haut ; les essais de sérum ont été pratiqués par le D1 Georges Loiseau. Voici les résultats :

Avec la toxine iodée, on a inoculé 17 chevaux du 30 janvier au 14 mai, soit pendant 103 jours ; ils ont reçu environ 1 300 centimètres cubes de toxine et à l'essai.

2 tiennent à 300 unités.

3 tiennent à 200 unités.

11 tiennent à 100 unités.

1 ne tient pas à 100 unités.

En suivant la méthode de Park (sérum et toxine mélangés), on voit qu'en cinquante-cinq jours, 14 chevaux reçoivent 2 905 centimètres cubes de toxine et à l'essai.

1 tient

i tient

1 tient

1 tient

i tient

1 tient

2 tiennent 2 tiennent 4 ne tiennent pas à 100 —

En comparant les résultats des deux essais, il est manifeste que la méthode de Park permet de gagner du temps (55 jours au lieu de 103 jours) et que les résultats sont meilleurs.

Étude comparative des pouvoirs préventif et aotïtoxique. — Nous avons fait, avec nos collègues L. Momont et G, Loiseau, de nombreux essais pour savoir s'il y a parallélisme entre le pouvoir préventif et le pouvoir antitoxique.

Pour apprécier le pouvoir préventif, nous avons injecté, vingtquatre heures après l'injection de sérum, 1/3 de centimètre cube d'une culture en bouillon franchement alcalin, fait avec de la peptone Chapoteaut et qui reste vingt-quatre heures à l'étuve. Le microbe employé est le 261 qui a servi à produire nos premiers sérums.

Nous donnons ci-desSQUS des expériences portant sur les (rois rhevaux 19, 40 et I). 29. Les tableaux oui élé dressés par M. Prevot Il esl facile de voir que le cheval 19 qui, le 30 septembre, a 300 unités. a un sérum préventif à 1/250.000 comme Le cheval D. 29 qui le24octobre n'a plus que 50 unités.

1000 unités

COMPARAISON DES POUVOIRS PRÉVENTIF ET ANTITOXIQUE. 153 Cheval 49.

Datas des saignées

Nombre o'ejours

après la dernière

injection

+ Mort en moins de 96 heures 0 Œdème 9 " " plus " " " I Fken

Chcrnl U).

Dates des saignées