REMARQUES

SOR l'emploi du microscope en pathologie.

Si, dans son enfance, la science n'offre, entre ses diverses parties, qu'une démarcation confuse et mal délimitée, a cette première phase du développement des connaissances humaines en succède une autre, non moins transitoire, dans laquelle une séparation artificielle des branches d'une même discipline fait étudier chacune d'elles d'une manière isolée, tandis que leur ensemble seul peut constituer une science à la fois d'une haute portée et d'une application utile.

Telle a été la marche des études physiologiques depuis Aristote, à travers la période longue et ténébreuse du moyen âge et le réveil des sciences, jusqu'au commencement du siècle dernier.

Les sciences naturelles n'étaient, avant cette époque, qu'un recueil de faits curieux, et la physiologie se composait plutôt d'hypothèses en rapport avec les doctrines des écoles philosophiques dominantes, que d'expériences faites avec discernement et de faits bien observes.

Les brillantes découvertes qui distinguent la seconde moitié du dix-huitième siècle, ont aussi exercé une heureuse influence sur les bases de la pathologie, sur les sciences qui concourent pour former la physiologie médicale.

L'anatomie descriptive avait déjà fait de grands progrès avant

cette époque; Li physiologie entra dans la voie expérimentale, et aborda sérieusement l'étude de l'anatomie comparée.

C'est à la suite de cette tendance générale vers l'observation positive, que l'aijatomie générale et l'anatomie pathologique ont commencé a être cultivées avec ardeur et avec succès.

Si, depuis le commencement du siècle, la science a été ainsi dotée de beaux matériaux pour la physiologie normale et pathologique, nous voyons cependant avec regret que, de nos jours encore , les diverses branches soient étudiées d'une manière trop isolée ; c'est pour cette raison que la médecine n'a pas encore pu en tirer tout le parti qu'elle était en droit d'attendre.

Il est donc nécessaire aujourd'hui, pour comprendre l'anatomie et la physiologie pathologiques, de faire disparaître cette séparation, et de n'aborder l'étude de ces sciences qu'après s'être bien pénétré de notions exactes de physiologie normale, d'anatomie comparée et d anatomie générale. L'anatomie descriptive, ainsi que l'anatomie topographi([ue, est malheureusement cultivée d'une manière trop exclusive dans nos écoles médicales. I.a physiologie expérimentale est négligée par la plupart des élèves , et l'anatomie générale, avec ses détails les plus importants, reste presque inconnue au plus grand nombre de ceux qui se vouent à la médecine. L'anatomie générale est cependant la véritable base de l'anatomie pathologique, et son étude est indispensable pour comprendre les altérations morbides de nos tissus et de nos organes. Il est non-seulement nécessaire que le médecin connaisse les travaux les plus importants sur cette matière, mais il faut aussi qu'il ait examiné lui-même les principaux éléments moléculaires qui composent le corps humain.

On n'a certainement aucune idée nette sur la nature de la fibre nerveuse primitive, sur la composition élémentaire du muscle, sur la structure de l'os, sur la disposition des éléments des glandes, si on ne connaît pas les détails histologiques de ces tissus par propre intuition, et pour les avoir étudiés tant par la dissection que par l'inspection microscopique. Et comment juger des changements que leur font éprouver les diverses maladies si l'on n'a pas présente à l'esprit leur composition normale?

D'un autre côté, l'étude de ranatomie générale nous permet de porter un jugement bien plus solide sur les lésions pathologiques , et nous habitue à des investigations sévères et minutieuses. C'est par ces connaissances seules que nous sommes capables de juger si un produit morbide quelconque est une simple augmentation d'un élément normal, ou si c'est réellement un produit de nouvelle formation, un véritable tissu accidentel. C'est par la connaissance exacte des éléments du sang à l'état normal, que MM. Andral et Gavarret ont été conduits les premiers à des résultats à la fois précis et d'une haute portée sur les altérations du sang dans les diverses maladies. Ce n'est que par les notions d'anatomie générale que nous avons été amené pour notre compte h reconnaître dans toutes les tumeurs bénignes des éléments qui se trouvent dans l'organisme à l'état normal, soit d'une manière permanente, soit d'une manière transitoire pendant la vie embryonaire.

Si la connaissance approfondie de Tanatomie générale est de rigueur pour comprendre l'anatomie pathologique, il faut cependant demeurer bien convaincu que c'est l'observation clinique qui lui donne sa principale valeur. Nous avons vu, il est vrai, des écoles médicales modernes vouloir subordonner la pathologie clinique à l'anatomie pathologique; mais cette tendance est tout aussi vicieuse que l'incurie des médecins du siècle passé pour les résultats des autopsies cadavériques, incurie dont la conséquence a été l'absence de bons principes , un esprit diffus dans les doctrines médicales et une thérapeutique vague, routinière, offrant une fausse richesse de remèdes nombreux et compliqués. Nous avons déjà, dans l'Introduction de notre ouvrage, insisté sur la nécessité de subordonner toute doctrine médicale à l'observation clinique, et nous ne pourrions assez répéter que le médecin clinicien seul est capable de tirer un parti utile des diverses disciplines qui concourent pour former la pathologie, et qu'il pourra le faire d'autant mieux qu'il aura une base physiologique plus solide.

Même en subordonnant l'étude des altérations que les maladies produisent dans les diverses parties de notre organisation a l'appréciation de tous ks phénomènes que nous observons au lit du

malade, Tanatomie pathologique, telle qu'elle a été cultivée jusqu'à présent, ne peut pas nous fournir des notions suffisantes pour faire bien comprendre la nature intime des maladies. En général, on s'est borné aux impressions que les sens nous transmettent sans être secondés de toutes les ressources que leur ofï're la science moderne. Il est vrai que les spécialistes qu'on désigne sous le nom de micrographes ont cherché à étendre plus loin l'investigation des produits morbides ; mais comme ils étaient, sauf quelques exceptions, trop peu médecins cliniciens, leurs travaux sont restés en partie stériles.

Il est indispensable, avant de commencer l'examen d'une pièce pathologique au microscope, de faire préalablement une dissection très-soignée des parties qu'on veut étudier. On fait d'abord cette dissection à l'oeil nu, puis on la continue sous la loupe ou sous le microscope simple. Sans une bonne dissection préalable, l'étude microscopique ne fait qu'embrouiller et répandre des erreurs, et tous ceux qui ont suivi de près les progrès récents de l'anatomie comparée savent fort bien que les naturalistes qui ont cultivé cette science presque exclusivement par l'examen microscopique, sans s'astreindre h mie dissection minutieusement exacte , sont tombés dans des erreurs plus grandes que ceux qui avaient cultivé l'anatomie comparée sans se servir du microscope. Si G. Cuvier s'est trompé quelquefois dans la détermination des organes, parce qu'il n'en étudiait pas les détails au microscope^ il a pourtant pu devenir le fondateur de la classification du règne animal d'après l'organisation intérieure; et certainement son nom est placé bien plus haut dans la science que s'il avait voulu étudier l'anatomie comparée en s'appuyant presque exclusivement sur les recherches microscopiques.

Il en est de même pour les études d'anatomie pathologique. Un pathologiste qui voudrait se rendre compte, par exemple, du siège de la phlébite, ne trouvera aucun renseignement suffisant par l'examen microscopique, s'il ne dissèque pas auparavant avec beaucoup de soin toutes les membranes de la veine, ainsi que les couches de tissu cellulaire qui l'entourent. Un médecin qui voudrait déterminer la partie des poumons dans laquelle

se trouve le siège du dépôt tuberculeux chez les phthisiques, n'y parviendrait certainement pas d'une manière exacte s'il ne cherchait auparavant à isoler, sous la loupe ou le microscope simple, la granulation tuberculeuse naissante des fibres pulmonaires, des vaisseaux, des ramifications bronchiques qui l'entourent. La dissection exacte, soit à l'oeil nu, soit a la loupe, soit sous le microscope, est donc indispensable pour pouvoir soumettre ensuite les parties suffisamment isolées à l'inspection microscopique.

Quant au choix du microscope de dissection, ceux deRaspail , de Chevalier, de Nadiet offrent certainement des avantages ; mais celui que nous préférons de beaucoup pour noire compte, est le microscope pancratique de M. Georges Oberhaeuser, qui permet de disséquer avec des grossissements de cinq à dix diamètres, jusqu'à cent et au delà. Du reste, tant pour l'anatomie comparée que pour l'anatomie pathologique, nous recommandons, pour la plupart des dissections, les grossissements faibles; ce n'est que très-exceptionnellement qu'on a besoin de forts grossissements pour faire ces dissections.

Avant d'exposer quelques préceptes essentiels sur l'emploi du microscope en pathologie, nous croyons indispensable de rappeler que celui qui veut se livrer à ces études doit savoir déjà bien manier le microscope. Une longue habitude est nécessaire pour toute espèce d'étude microscopique , mais beaucoup plus encore pour la micrographie pathologique; car bien souvent on a affaire ici à des produits très-compliqués, ainsi qu'à des éléments plus ou moins altérés. En examinant, par exemple, une tumeur cancéreuse, non-seulement vous avez les globules cancéreux à observer, ainsi que leur mélange avec des éléments graisseux, fibreux, sanguins, etc.; mais en outre les globules cancéreux eux-mêmes existent à tous les degrés de développement, soit à l'état naissant, soit à l'état de maturité, soit à celui de décomposition. Il en est de même pour les produits de l'inflammation. Dans le pus d'un abcès par congestion qui a mis plusieurs mois à se développer, les globules du pus sont souvent tellement altérés, qu'il faut un oeil très-exercé pour les reconnaître.

Avant d'aborder les études microscopiques en pathologie, nous nous sommes occupés pendant plusieurs années de recherches microscopiques sur divers sujets d'histoire naturelle, et malgré cela il nous a fallu un long apprentissage avant d'avoir pu nous former des opinions justes et exactes sur la composition microscopique de quelques produits morbides.

Il est certain que beaucoup d'erreurs ont été répandues par ceux qui se sont occupés de ces études, et cela à cause du manque d'habitude et d'expérience. Il faut examiner attentivement chaque fois qu'on observe; il faut même avoir étudié les mêmes produits morbides mi grand nombre de fois avant de se prononcer sur leur nature intime. Il nous est arrivé, après avoir examiné dans tous leurs détails les pièces pathologiques de plus de cinquante autopsies de sujets tuberculeux , de trouver à la cinquante-unième des détails qui nous avaient échappés jusqu'alors. Cela prouve combien, malgré les soins et l'attention que nous y avons apportés, nos études sur cette matière sont encore loin d'être complètes. On ne peut donc, pour ce genre de recherches, arriver à des conclusions avant d'avoir fait un grand nombre d'observations exactes. Pythagore demandait a ses disciples un silence de cinq ans avant de se prononcer sur ses doctrines. Nous recommanderions aux médecins qui appliqueront le microscope à l'étude des produits morbides de garder au moins un silence de quelques années avant de livrer au public le résultat de leurs recherches. La science y gagnerait, et leur réputation s'établirait d'une manière plus solide. Si nous insistons sur ce point, c'est que l'expérience nous a prouvé avec quelle légèreté beaucoup d'observations de micrographie pathologique ont été faites et publiées.

Après la dissection préalable, la valeur d'une observation microscopique dépend beaucoup de la manière dont on prépare l'objet qu'on veut examiner au microscope. Qu'il soit liquide ou solide, il ne faut en prendre qu'une petite quantité; lorsqu'on prend une couche trop épaisse, on a beaucoup de peine h l'étendre convenablement, et on ne voit les détails que d'une manière confuse. Veut-on examiner, par exemple, les détails mi-

croscopiques du sang ou du pus, une goutle trop volumineuse de ces deux liquides masquera complètement la forme et l'organisation interne de leurs globules, tandis qu'une très-petite quantité, étendue convenablement entre deux lames de verre, fera bien ressortir tous les éléments appréciables au microscope.

Si les parties liquides ou solides qui offrent un certain degré de transparence peuvent être beaucoup mieux examinées sans qu'on y ajoute aucun liquide étranger, on ne peut cependant pas, dans bien des circonstances, se passer d'un liquide diluant. L'eau pure est, en général, celui qui convient le mieux ; mais il y a des parties qu'elle altère promptement , par exemple, les éléments du sang et des vaisseaux. En dissolvant la matière colorante du sang, elle rend les éléments de celui-ci méconnaissables. On empêche cet effet décomposant en ajoutant à l'eau une faible quantité de chlorure de sodium, de sulfate de soude ou d'un autre sel neutre. Le sérum du sang et le blanc d'oeuf très-liquide sont également très -propres a diluer et à étendre les objets qu'on se propose d'examiner. Quant aux réactifs chimiques, il faut en être sobre toutes les fois qu'il s'agit simplement d'étudier les détails microscopiques d'un produit morbide. On peut, au contraire, les employer avec succès lorsqu'il s'agit de combiner l'analyse chimique avec l'examen microscopique, et nous savons par les beaux travaux de J. Vogel qu'on peut en tirer un grand parti. Parmi les divers réactifs auxquels on est obligé de recourir, nous mentionnerons surtout les acides et les alcalis plus ou moins concentrés. L'acide acétique surtout est souvent d'une grande utilité; il a la propriété de rendre la paroi de plusieurs espèces de cellules très-transparente, et de faire ainsi mieux ressortir les détails de leur organisation intérieure. Ainsi, dans les cas douteux, lorsqu'on veut savoir si Ton a affaire à de la matière tuberculeuse ou à du pus, l'acide acétique établit facilement le diagnostic ; en effet, avec son secours on voit qu'il existe dans les globules du pus des noyaux bien distincts, tandis qu'il n'en existe pas dans les corpuscules des tubercules. Il faut cependant savoir se servir de cet acide; mêlé directement, même en petite quantité, avec certains liquides, il les altère très-promptement. Le meilleur

12 REMARQUES SLR L'EMPLOI

moyen de le mettre en usage est donc de le faire entrer par TefTet de la capillarité entre les deux lames de verre (une de verre plus ou moins épais, recouverte d'une autre beaucoup plus pelite et très-mince), entre lesquelles on place ordinairement les objets qu'on veut examiner au microscope. Mais ici se présente une autre difficulté. Lorsque le liquide a examiner se coagule promptement, ou lorsqu'il est plus ou moins gluant de sa nature, Tacide acétique n'exerce souvent qu'une action lente et incomplète sur lui. Il faut donc encore ici, pour ne pas tirer de l'observation des conclusions prématurées, faire agir cet acide par diverses méthodes; après des essais multipliés et variés, on arrivera souvent à des résultats bien différents de ceux qu'on avait cru trouver dans le principe. On voit, par cet exposé, combien dans l'observation, il est de rigueur de tenir compte de tous les détails et de toutes les circonstances.

L'acide azotique et surtout l'acide clilorhydrique offrent le grand avantage, dans les études microscopiques, de permettre d'examiner tous les détails de parties dures et opaques, en dissolvant les sels calcaires qui, sans eux, les déroberaient en grande partie à ce genre d'investigation. C'est a leur aide qu'on peut saisir, par l'examen microscopique, les détails de structure et les altérations morbides du système osseux. C'est par la même raison que ces réactifs permettent, dans des cas douteux, de décider si un produit morbide, d'apparence osseuse, est réellement constitué par du tissu osseux, ou s'il n'est pas plutôt formé par un dépôt minéral accidentel.

Les alcalis concentrés dissolvent plusieurs espèces de globules que l'on rencontre dans les produits morbides. Lorsque leur action est lente, ils permettent d'apprécier quelques détails de structure difficiles à apprécier sans cela.

La teinture d'iode offre l'avantage de colorer en jaune les globules élémentaires qu'on veut étudier, et elle peut devenir utile pour l'examen des parties très-pâles et très - transparentes.

En résumé, nous recommandons aux micrographes d'observer l'action d'un certain nombre de réactifs sur tous les produits mor-

bides. Oîi pourra ainsi non-seulement mieux saisir quelques détails de structure, mais encore arriver a des résultats importants sur leur composition chimique.

Pour tirer des recherches microscopiques en pathologie tout le parti possible, il est indispensable de varier les grossissements, et d'examiner successivement le même objet avec les grossissements les plus faibles et avec les plus puissants.

Les amplifications de trente a cinquante diamètres sont trèsutiles pour examiner l'ensemble d'un tissu morbide, ainsi que pour étudier tout ce qui tient à la vascularité, lorsqu'il s'agit de décider, par exemple, si la rougeur d'une partie malade est consécutive à l'hyperémie ou à une simple imbibition de matière colorante du sang. Les grossissements de force moyenne, de deux à trois cents diamètres, convieinient pour étudier le groupement et la disposition des éléments moléculaires qui constituent les tissus. Il est un préjugé très-fâcheux parmi les micrographes , c'est de ne dépasser qu'exceptionnellement un grossissement de trois cents diamètres. Nous posons en fait, au contraire, que pour distinguer l'individualité, les caractères propres aux éléments pathologiques différentiels, il est de toute nécessité de se servir des plus forts grossissements que Tart nous offre, ceux de cinq à huit cents diamètres. Dans le microscope de M. Georges Oberhaeuser, un des meilleurs instruments que Ton confectionne aujourd'hui, et sans contredit le plus facile à manier et le plus commode pour des travaux longs et suivis, le système de lentilles n*" 9, combiné avec les oculaires n"* 3, 4 et 5, donne successivement des grossissements de quatre à huit cents diamètres. L'oculaire n'' 5 ne peut être que d'un usage exceptionnel. Le système n"* 9, et l'oculaire n° 4, sont indispensables pour les études exactes en micrographie pathologique. Dernièrement, M. îNachet a présenté à l'Académie des sciences des lentilles très-puissantes, qui constituent un progrès réel pour les études microscopiques. On peut, avec le plus fort de ces systèmes, atteindre huit cents diamètres et au delà sans se servir de forts oculaires, ce qui offre un grand avantage. C'est au moyen de ces lentilles que nous avons pu étudier la structure des nucléoles, déterminer la diver-

site des granules moléculaires, et étendre sur plusieurs points nos

recherches plus loin que nous ne Tavions fait auparavant.

En général, lorsqu'on se sert de forts grossissements, il faut non-seulement recouvrir la préparation destinée à l'examen microscopique d'un verre très-mince, mais encore employer le liquide diluant en fort petite quantité, et , s'il y en a trop, on fait bien d'attendre qu'il soit un peu évaporé. C'est quelquefois long, mais on a alors l'avantage devoir infiniment mieux tous les détails. Du reste, il ne faut jamais commencer un examen microscopique quelconque si l'on n'a pas plusieurs heures consécutives a y consacrer.

En parlant de forts grossissements, nous n'entendons pas ceux que les opticiens indiquent; car ils exagèrent toujours le pouvoir amplifiant de leurs lentilles. Il faut que chaque observateur ait mesuré lui-même la valeur du grossissement des divers systèmes de lentilles combinés avec les différents numéros d'oculaires.

Lorsqu'on a ainsi examiné les produits morbides avec tous les divers grossissements, on finit par comprendre a quelles formes extérieures, déjà visibles à l'oeil nu, correspondent les éléments microscopiques, et on acquiert un jugement beaucoup plus sûr par rapport aux caractères extérieius des pièces pathologiques. Ce qui distingue l'oeil exercé, c'est de comprendre en voyant. Or, le microscope, en déchiffrant les formes inintelligibles sans son secours, éclaire le diagnostic et peut devenir utile dans le choix des moyens de traitement. Bien des fois, nous avons pu nous convaincre de ces avantages dans le diagnostic des tumeurs, qui, comme tout chirurgien expérimenté le sait, présente souvent de grandes difïicultés.

Quant aux instruments a employer dans la préparation des objets pour l'examen microscopique, nous ne saurions trop insister sur la simplicité dans leur choix. Des ciseaux courbes sur le plat constituent le meilleur instrument pour obtenir des tranches fines; des poinçons très-pointus, a manche fixe, et des scalpels fins, suffisent ordinairement pour étendre convenablement les parcelles à étudier. 11 faut étendre sans déchirer^ aplatir sans écra-

ser; c'est pour cela que nous nous servons rarement du compresseur. En thèse générale, il faut que l'habileté soit dans les doigts, et non dans les instruments de l'observateur; cette habileté, du reste, ne s'improvise pas, et ne s'acquiert que par l'expérience et la persévérance. On peut donc se dispenser de la plupart de ces instruments ingénieux, qui servent mieux a orner les planches d'un manuel microscopique, qu'à procurer des commodités dans la pratique.

Depuis que les instruments d'optique ont été perfectionnés, on peut travailler au microscope aussi bien le soir à la lampe que le jour avec la lumière naturelle. Toutefois, nous conseillons de préférer le jour pour toutes les recherches importantes; on aura plus de netteté dans l'examen , on préparera mieux les objets , surtout ceux qui demandent une dissection délicate, et on se fatiguera moins les yeux. Toutefois, pour de très-forts grossissements, et pour quelques détails qu'on ne voit qu'avec une lumière trèsvive, il y a quelquefois de l'avantage à travailler avec une bonne lumière de lampe, surtout lorsque le microscope est muni de diaphragmes verticaux convenables.

Pour mesurer les objets soumis à l'examen microscopique, on a inventé plusieurs méthodes généralement connues. Nous donnons la préférence au micromètre adapté dans un oculaire. Naturellement, il faut avant tout fixer la valeur de chaque division avec les divers systèmes de lentilles, ce qui se fait facilement en mettant sur le porte-objet un millimètre divisé en cent parties, et en déterminant le rapport entre les divisions du micromètre de l'oculaire et les centièmes de millimètre. Cette méthode offre la faculté de mesurer jusqu'à un huit-centième de millimètre , et elle est d'une application facile, ce qui permet de fixer la moyenne du volume des éléments microscopiques d'après un grand nombre de mesures exactes.

Il est un autre point, dans l'étude microscopique, que l'observateur ne doit point négliger, c'est de toujours dessiner en examinant. On se rend ainsi mieux compte de ce qu'on voit, et on fait mieux comprendre aux autres ce que l'on a examiné. Parmi les diverses méthodes de dessin, nous donnons la préférence au

16 REMARQUES SUR L'EMPLOI DU MICROSCOPE EN PATHOLOGIE, dessein à la main et d'après nature, duquel il faut nécessairement avoir l'habitude. La chambre claire, aujourd'hui très-perfectionnée, peut rendre de bons services pour le dessin linéaire; mais son emploi demande de l'habitude, et il est en outre trèslimité. Le daguerréotype a fourni de fort beaux résultats entre les mains de M. Donné, et nous désirons vivement que cet observateur distingué, auquel la micrographie est déjà redevable de bien grands services, trouve les moyens d'en rendre l'application facile, en sorte que son emploi puisse devenir général.

Nous pourrions multiplier les préceptes, mais nous croyons avoir indiqué les moyens les plus essentiels. Nous nous en tiendrons là , parce qu'il faut également que chaque observateur fasse son école, et que, pour les études microscopiques, comme pour toutes les autres, du reste, les principaux préceptes sont le bon sens dans le choix des moyens, la persévérance dans leur application, et la sobriété du jugement dans les conclusions. C'est ainsi que les études microscopiques en pathologie, qui aujourd'hui méritent de ne plus être une spécialité, pourront rendre avec le temps de grands services pour le traitement des maladies.

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