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Fig. 159. — Dispo;itif pour l'examen de nombreuses colonies suspectes.
sur toute la surface, puis, au besoin, sur une deuxième et mème une troisième boîte semblable de gélose-ascite, sans recharger l’üse. On met à l'étuve pendant vingt-quatre à quarante-huit heures, en ayant soin de placer les boîtes face en dessous, pour éviter l’humidification de la surface par l’eau de condensation.
DIAGNOSTIC BACTÉRIOLOGIQUE DE L'INFECTION. Want
Après ce délai, on observe habituellement de nombreuses co'onies isolées. Porter l'attention sur les colonies rondes, transparentes, grisâtres, de 1 à 2 millimètres de diamètre (fig. 160).
On prélève une parcelle de plusieurs colonies suspectes ; on l’émulsionne dans une gouttelette d’eau déposée sur une lame de verre.
Fig. 160. — Boite de Petri avec; gélose-ascite ensemencée avec du mucus rhino-pharyngé. Au milieu de colonies diverses, on perçoit/des colonies de Méningocoque, M, semi-transpaÿ Ç à Fr (e] ?
rentes (grandeur naturelle).
Si l’on a de nombreuses colonies à identifier, il est commode, pour gagner du temps, de faire sur la même lame de quinze à vingt préparations (fig. 159) d’égale épaisseur (1). (Il est bon d’y ajouter sur un coin une émulsion d’un microbe prenant le Gram, qui servira de témoin). Sécher, fixer, colorer par le Gram avec suraddition de Ziehl. Le microscope montre ensuite lesquelles parmi ces colonies
(1) Chaque préparation peut être étiquetée à l'aide du crayon gras par un numéro cor-
respondant à celui qui a servi à repérer sur la boite de Petri les colonies auxquelles elles se rapportent. :
Doprer et SACQUuÉPÉE. — Bactériologie, 22 édit. 22
338 ©: ! MÉNINGOCOQUE.
sont constituées par des cocci en grains de café, ne prenant pas le Gram : on ensemence ces dernières sur tubes de gélose-aseite, que l’on place à l’étuve pendant vingt-quatre heures, pour obtenir une culture destinée aux épreuves d'identification.
Daos le sang. — On pratique une hémoculture dans les eonditions habituelles, et on ensemence #4 à 5 centimètres cubes de sang dans un ballon de 250 centimètres cubes de bouillon-ascite, ou de tout autre milieu favorable (bouillon à l’œuf, bouillon Martin glucosé). Quand la culture a été fertilisée, on p'atique un isolement sur tubes de gélose-ascite, comme précédemment.
Dans Iles viscères. — Au niveau des viscères, le prélèvement est simple : ils’effectue comme pour la recherche microbienne dans toute maladie infectieuse.
Ce prélèvement, pratiqué au niveau de l’endocarde, du péricarde, du poumon, de la plèvre, des articulations, etc., est suivi d'examen microscopique direct, puis d’une mise en culture sur milieu solide (milieux signalés), en vue d'obtenir des colonies isolées, capables de permettre l'identification.
identification.
Les recherches précédentes doivent être complétées par les épreuves d'identification ayant pour but de savoir :
10 Si le germe isolé est un Méningocoque:
20 À quel type de Méningocoque il appartient.
Les cultures obtenues après ensemencement des colonies reconnues suspectes doivent être soumises aux épreuves des fermentations sucrées et de l’agglutination.
Épreuves des fermentations sucrées. — Ensemencer sur l’un des milieux suivants :
Milieux tournesolés. — ProcéDEÉ DE Von LiINGELSHEIM.
On prend 135 centimètres cubes d'un mélange de gélose à 3 p. 100, additionnée, à la température de 606, de liquide d’ascite. On y ajoute 45 centimètres cubes de tein:ure de tournesol contenant 10 p. 100 de sucre : lévulose, glucose, maltose. On coule ces milieux sucrés encore liquides dans des boîtes de Petri, où ils se solidifient après refroidissement. On ensemence sur ces milieux une üse de culture (fig. 161, 162, 163).
MÈME PROCÉDÉ SIMPLIFIÉ (Dopter).
Préparer de la gélose sucrée (lévulose, glucose, maltose) en ayant soin
de la stériliser à 105° pendant 30 minutes pour éviter la caramélisation. Ajouter du liquide d’ascite dans les proportions habituelles (1/3 du vo-
lume total de gélose) et additionner de tournesol stérilisé dans la même proportion que ci-dessus, pour obtenir la teinte bleue désirte. Préparer ainsi 3 boîtes de Petri (ou 3 tubes).
Après vingt-quatre heures de séjour à l’étuve à 37°, on observe les résultats: si pas de fermentation, la culture qui à poussé reste bleue; si fermentation, elle prend une teinte rose.
Méningacoque
M Catarrhalis A
N-Paraménin:
\ guCuqUE
(ALI LEERS Cinereus }
Dipl. flavus I
; à | Dipl.flavès 11
Fig. 164. — Épreuve des fermentations sucrées (Méning:goque et germ?s similaires", Gélose-ascite Zévulosée tournesolée,
Ilest prudent de surveiller les fermentations avant que le délai de vingt-quatre heures ne soit expiré. Il arrive parfois en effet (question de germes, question de qualité des sucres) que la fermentation soit assez précoce, mais transitoire. Un examen tardif risque, dans ces cas, de laisser passer inaperçue la fermentation qui s’est en 'éffectuée.
; Procévé pe BruNs ET Houx.
Mélanger, à parties égales, du bouillon ordinaire et du liquide asci- . tique. À 100 centimètres cubes du mélange, on ajoute:
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PATES gr RRQ, RE SR TS LANCE Ne ESSOR
340 MÉNINGOCOQUE. | 2 UN
19 45 centimètres cubes de la solution sucrée à 10 p. 100, 29 15 centimètres cubes de tournesol. On répartit en tubes stériles et on ensemence.
La culture étant plus longue à s’effectuer, les résultats sont plus | tardifs. RES Milieux au rad rote (Dopter et R. Koch).
* Dans 75 centimètres cubes de gélose à3 p. 100,on fait dde gr amme de lévulose, dextrose, maltose. Après. un séjour de vingt minutes à lPauto- .
Méningocoque = /
M.Catarrhalis
Paraméningocaque Dipl | Cinereus. \ Dipl.
A Siccus Dipl. < favus] re . Crassus Dal Ve flavus IX
dé HE . :
Dipl.flavus III Fig, 162. — dm. — Gélose-ascite glucosée tournesolée,
clave à 1059, on ajoute 25 centimètres cubes d'ascite et 1 St cube
d'une solution de neutral-roth à 4 p. 100. Le milieu prend une teinte
orangée. On le maintient au bain-marie à 60° pendant une heure envi-
ron ; au bout de ce temps, un précipité se forme. On agite les récipients, et l’on coule le milieu en boîtes de Petri; sous une faible épaisseur, il
prend une teinte jaune.
Après ensemencement et séjour à l'étuve à 37° pendant vingt-. quatre heures, on observe: sur les milieux qui n'ont pas fermenté, la culture est jaunâtre comme le milieu; sur ceux qui ont subi la fermentation, la culture est rouge vif (groseille ou carmin).
