Partie optique. — Elle comporte des oculaires et des objectifs

Oculaires. — On emploie partout l’oculaire de Huyghens : deux lentillesplan-convexes, l’une supérieure (frontale), l’autre inférieure (verre de champ), séparées par un diaphragme.

Les oculaires sont numérotés, par ordre de grossissement croissant : [, Il, IL. On peut se contenter des n°5 [ et IIT.

Il existe en outre des oculaires dits compensateurs, souvent préférables pour les forts grossissements. Ils sont construits pour compenser les imperfections de l’achromatisme des objectifs.

Objectifs. — C’est la partie essentielle du microscope. Il y a lieu de distinguer deux sortes d'objectifs : 1° les objectifs à sec; 20 les objectifs à immersion homogène.

Les objectifs à sec conviennent pour des grossissements modérés.

Ils sont désignés, chez la plupart des constructeurs (Stiassnie, Nachet, etc.), par les chiffres 0, 1, 2, etc., jusqu’à 9, ordre de grossissement croissant. Numéros correspondants de Zeiss : at à a°, Bà E.

Pour des grossissements plus forts, il vaut mieux employer ies objectifs à immersion homogène. — En passant successivement du verre (de la préparation) dans l’air, puis dans le verre des objectifs, les rayons lumineux se réfractent, parce que les indices de réfraction de ces divers milieux sont inégaux, d'ou perte de nelteté et de clarté. On évite cet inconvénient avec les objectifs dits à immersion homogène, en interposant entre la préparation et l'objectif un liquide dont l'indice de réfraction est sensiblement le même que celui du verre de l'objectif. Le liquide employé est aujourd’hui l'huile de cèdre (autrefois : l’eau); il est préférable de la demander au fournisseur de l’objectif, l'huile préparée par chaque fabricant étant adaptée à ses objectifs,

Les objectifs à ses ou à immersion actuellement employés sont dits achromatiques, c’est-à-dire qu'ils sont constitués de manière à éviter autant que possible la dispersion des couleurs fondamentales du spectre; la correction, sans être parfaite, est suffisante. Elle est plus complète avec les objectifs dits apochromatiques, mais leur prix est très élevé.

On doit demander à tout objectif de laisser voir nettement le contour des objets (pouvoir définissant), de même que les objets au-dessus ou audessous du foyer (pouvoir pénétrant) et des détails délicats (pouvoir résolvant). Pour apprécier ces diverses qualités, on peut examiner avec ces objectifs soit des test-objets spéciaux : Pleurosigma angulalum, Amphipleura pellucida, etc., livrés par les fournisseurs d'instruments ; soit, plus simplement, des préparations de microbes colorés sur coupes (Bacille tuberculeux, organes morveux, etc.).

Mode d'emploi du microscope.

Le bactériologiste utilise le microscope pour examiner : soit des microbes colorés sur lames (cultures ou frottis), soit des microbes non colorés, soit des coupes colorées.

Sauf indication contraire, on examine les premiers avec les objectifs à immersion; les seconds avec les objectifs à sec (parfois à l'ultra-mieroscope; voy. plus loin); les dernières, successivement, à sec et avec immersion. — On peut encore examiner, à sec, les colonies microbiennes sur milieux solides.

Dans {ous les cas, il faut s'assurer d’un éclairage convenable.

Éclairage.— Lalumière diffuse du jour constitue le meilleuréclairage. Si elle ne suffit pas, il faut recourir aux lumières artificielles. La meilleure et la moins fatigante est le bec Auer ; vient ensuite la lampe à albocarbone, puis la lampe électrique. Une simple lampe à pétrole, avec lentille condensatrice, peut suffire. Il est utile d'intercaler entre l'œil et la source éclairante un écran, qui laissera éclairé le miroir seulement.

Remarques.— Avec l'objectif à sec: miroir concave ; pas de condensateur.

Avec l'objectif à immersion : miroir plan ; condensateur.

On se rendra compte de la distance qui sépare chaque objectif de la

préparation, quand l'objectif est au point. Cette distance — distance frontale — est d'autant moindre que l'objectif est plus puissant.

Examen avec l'objectif à immersion. — Mettre en place l’oculaire et l'objectif. Tirer Le tube (p.226, b), lui donner l’inclinaison la plus favorable pour l'observation. Disposer le miroir, face plane en haut; mettre en place le condensateur.

a. Fixer Ia préparation sur la platine; y déposer, en face l'objec- Uf, une goutte d'huile de cèdre. Es PS

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