Berlin. Klin. Woch
membrane, on le promène sur la lamelle et on fait sécher le liquide resté adhérent.
On trempe la lamelle dans un bain colorant de bleu de Loefïler ou de bleu de Roux.
Bleu de Loeffler,
Solution alcoolique saturco de bleu de méthylc 30 ce.
Solution aqueuse saturée de potasse 1
Eau distillée 100
Bleu de Roux,
Violet de dahlia 1 gr.
Solution L \ Alcool 10
Eau distillée 90
^'"ert de méthyle 1
Solution IL l Alcool 10
Eau distillée 90
f Vc
ition IL < Al
( Es
On mélange une partie de la solution I avec deux parties de la solution IL
Si l'examen microscopique laisse des doutes, il faut faire la réaction de Gram. Dans ce cas il faut employer comme matière colorante le Violet de méthyle, de gentiane ou de dahlia. Le bacille diphtérique prend le Grairii
L^eilsdmencement doit se faire sur séi*um soli* difié. Daris Ce milieu éminemment favorable aU bacille diphtérique, lés Colonies appai'aissettt au bout de di^i-huit heufes à l*étuve à 37°, soUs forme de grains brillants isolés»
Les colonies des autres bactéries de Ifii bouche n'apparaissent qu'au bout de vingt-quatre heures.
L'aspect des colonies est insuffisant pour faire le
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diagnostic, on doit compléter celui-ci par l'examen microscopique.
L'ensemencement du sérum doit être fait assez largement, de façon à ce que Ton voie à l'œil une traînée d'exsudat sur le sérum. Il m'est arrivé bien souvent de recevoir à mon laboratoire des tubes ensemencés par des médecins et sur lesquels il ne se développait aucune colonie.
Morphologie. — Le bacille diphtérique est presque aussi long que le bacille tuberculeux mais plus épais, 2ji,5 à 3ii de long sur 0ii,7 de large; ses extrémités sont arrondies.
Il est rectiligne ou incurvé, immobile. Il présente souvent un aspect granuleux dû soit à des spores, soit à des corpuscules de protoplasma appelés par Babès corpuscules mélachromatiques. Ces corpuscules, quelquefois volumineux et placés à une extrémité, font ressembler le bacille à une massue.
La forme en massue s'observe principalement dans les fausses membranes et dans les vieilles cultures. L'arrangement des bacilles dans la préparation est un élément important de diagnostic. Ils sont habituellement groupés en amas dans lesquels ils sont disposés en rangs de soldats placés côte à côte, ou bien enchevêtrés comme une pincée d'épingles qu'on laisserait tomber sur une table. Les groupements en V ou L sont très fréquents.
Cultures. — Le bacille diphtérique se cultive bien sur tous les milieux pourvu que la température soit suffisante, 30« à 37°.
Dans le bouillon y les colonies n'apparaissent guère avant trente-six heures. Elles forment à la surface un voile léger que l'agitation ou le temps font facilement tomber; le bouillon reste clair au-dessus du dépôt et au-dessous du voile. Le bouillon, primitivement neutre ou alcalin, devient acide au bout de quelques jours, puis redevient alcalin. Cette acidité est due à la formation d'acide aux dépens de la matière glycogène du bouillon, et la réaction alcaline est due à la production d'ammoniaque.
Le sérum solidifié, additionné ou non de peptone, est le milieu de choix. Nous avons dit plus haut qu'on pouvait s'en servir comme moyen de diagnostic.
La gélose ordinaire ou glycérinée est un très bon milieu; les colonies y poussent avec les mêmes caractères que sur sérum, mais plus lentement.
La gélatine ne convient pas en raison de la température trop basse, 200-21° à laquelle on est obligé de la maintenir. Elle n'est pas liquéfiée.
Le lait (Schottelius), le blanc d'œuf cuit (Sanharoft) l'urine (Guinochet) peuvent être employés.
Vitalité. Virulence. — Le bacille diphtérique vit longtemps; des cultures vieilles de six mois ou un an peuvent se repiquer. De fausses membranes desséchées et tenues à l'obscurité ont pu donner des cultures au bout de dix-huit mois (Roux et Yersin).
Dans la gorge, le nez de malades ayant eu la
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diphtérie, Sevcstre et Méry *, Hellstrom •, Tobiesen', Ritter ♦, Tezenmas du MonteH, Martha*, etc., ont retrouvé le bacille diphtérique après une période variant de trois à six semaines. Dans un cas Legendre'' l'a trouvé vivant plus de quinze mois après la guérison de l'angine.
Cette persistance assez longue du bacille comporte une précaution prophylactique : les malades même après la guérison doivent être isolés pendant un certain temps. Sans doute, retiré de la gorge des convalescents, ce bacille n'est pas toujours virulent à l'épreuve sur le cobaye, mais rien ne prouve qu'il ne le serait pas dans la gorge d'un enfant.
Le contraire peut aussi se présenter. Aaser®, à l'occasion d'une épidémie survenue dans une caserne, examine la gorge de soldats bien portants ; il trouve que 17 d'entre eux ont dans la gorge des bacilles virulents pour le cobaye ; or sur ces 17 hommes, 5 seulement ont eu une angine diphtérique légère. Les influences extérieures modifient la vitalité et la virulence du bacille diphtérique.
Chaleur. — En milieu humide le bacille diphtérique est tué par une température de 58°, mais des-
