I. — Corpuscules de Guarnieri de la vaccine

Le meilleur procédé d'étude consiste à inoculer la vaccine sur la cornée du Lapin, par stries superficielles ou par insertion dans Tépaisseur de la cornée. On récolte le meilleur matériel du deuxième au quatrième jour :

1. Froilis par apposition en touchant la cornée avec une lame ou une lamelle, sécher, fixer à l'alcool, et colorer au P.omanovsky ou mieux traiter par la méthode des frottis humides et colorer au Romanovsky (procédé spécial, p. 413) ou à l'hématoxyline ferrique. Bien entendu, on peut employer aussi tous les procédés indiqués ci-dessous pour l'étude des corps de Negri.

2. Fixation et inclusion de la cornée par les procédés habituels. Colorer à l'hématoxyline alunée ou ferrique, au Maliory, au Gram, au trichromique de Cajal et surtout au Romanovsky modifié pour les coupes •.

IL — Corpuscules de Negri de la rage.

Les très nombreux procédés, proposés pour colorer les corpuscules de Negri, peuvent se ramener à quatre sections.

/''•^ section. Coloration par la méthode de Mann.

Méthode de Negri. — Fixer au Zenker des fragments de la corne d'Ammon de l'animal suspect. Inclure à la paraffine. Colorer par la méthode de iMann (p. 430).

1. Pour plus de détails voir von Prowazek, Tasclienbucli der Protistenuntersuchung, -2, Aufl., p. 78. — Mayer et Keysselitz, Arch. f. Proiisienkunde, 1908, et Beihefte z. Arch. /'. Schiffes- u. Trop. Hyg., 1909.

CHLAMYDOZOAIRES 541

Kraïouclikine ' préfère lixer les fragments de corne d'Ainmon dans l'acétone, à l'étuve à 31^ pendant 30 à 45 minutes. On passe directement à la paraffine à 48° ou bien on intercale un bain de xylol de 10 minutes. On colore ensuite au Mann. Cette méthode rapide permet le diagnostic en deux heures.

3^ section. Coloration par action successive de l'éosine et

du bleu de méthylène

Métliode de Lenlz. — Fixer (d'après Bohne) pendant une heure dans l'acétone à 37°, inclure en une heure et demie à la paraffine à 55°, chauffée à 58'. Colorer une minute par :

Alcool à tiO 100 cin^

Eosine extra BA de Hochst 0,5 gr.

Laver à l'eau, puis colorer une minute dans :

Potasse à 0,01 p. 100 100 cm3

Sol. alcoolique sat. de bleu de méthylène B Patent de Hochst ' 30 —

Essorer au buvard, différencier d'abord dans de l'alcool alcalinisé :

Alcool absolu 30 cm^

Soude caustique à 1 p. 100 dans l'alcool absolu . . V gouttes Il est essentiel que cet alcool soit parfaitement anhydre.

jusqu'à obtention d'une faible teinte éosine, puis dans de l'alcool absolu acétifié (1 goutte d'acide acétique à 50 p. 100 pour 30cnr^ d'alcoolj jusqu'à ce que les tractus ganglionnaires apparaissent encore comme des lignes bleues. Déshydrater et monter au baume.

Lentz fait aussi des frottis avec des parcelles enlevées sur la section transversale de la corne d'Ammon, en prenant de préférence la région de grandes cellules. On fixe humide à l'alcool méthslique, on lave à l'alcool absolu et on colore comme ci-dessus.

Les corps de Negri sont colorés en rouge vif et leurs inclusions en bleu.

Méthode des frottis. — Harris fait des frottis avec la corne d'Ammon de l'animal suspect, fixe à l'alcool méthylique une minute, passe à l'eau, colore de une à trois minutes dans une solution alcoolique d'éosine saturée et ancienne, lave quelques secondes, plonge cinq à quinze secondes dans une solution récente de bleu