Alcool absolu, .xylol, baume
Les corps de Negri doivent présenter une belle teinte rouge violacée brillante, se détachant nettement sur le fond bleu pâle du cytoplasme el sur le bleu foncé des noyaux des cellules nerveuses.
Les hématies sont colorées en rose vif, non violacé. On doit voir, à l'intérieur des corps de Negri, les corpuscules basophiles colorés en bleu ^
La méthode d'Ag-alli, employée par Lentz - dès 1907, repose sur le même principe. On colore d'abord, comme dans la méthode de Lentz (p. 541), puis on mordance dans le Lugol pendant une minute (eau 300, Kl 2, iode 1); on lave à l'eau, on dilîérencie dans l'alcool mélhylique jusqu'à teinte rouge, on lave à l'eau et on colore encore trente secondes dans le bleu de métliylène, puis on termine comme dans la méthode de Lentz, par double dilTérenciation dans les alcools alcalin et acide.
4^ section. Coloration au Romanovsky des frottis
et des coupes.
Employer les méthodes générales qui ont été décrites p. 404 à 416.
m. — Corpuscules de Prowazek du trachome.
On fait des frottis avec le produit du grattage des granulations ou, si la lésion s'y prête, on fait des frottis par apposition.
La méthode de Romanovski est certainement un des moyens les plus sûrs de colorer ces corpuscules.
Tout récemment, Lindner^ a montré qu'au début on ne trouve,
1. D'Amato et Faggella, qui nient la nature parasitaire des corps de rs'egri, les colorent, sur coupes de pièces fixées au Zenker, en trente minutes dans le vert de méthyle-pyronine de Pappenlieim. On différencie par l'alcool absolu acétique (2 gouttes pour 10 cm'). Ztschr. f. Hyg., LXV, p. 353, 1910.
2. Lentz, Ein Beitrag zur Farbung des Negrischen Korperchen, Centralbl. f. BakL, Orly., XLIV, pT 374-378, 1907.
3. Lindner. Zur Farbung der Prowazekschen Einschliisse. Centralbl. f. Bakt., Oriy., LV, p. 429, 1910.
dans ces inclusions, que le corps initial colorable en bleu par le Giemsa. Un peu ])lus lard, on voit apparaître des granulations métachromatiques azurophiles qui ne prennent pas de coloration élective. Le corps initial est donc une formation plasmatique, fortement basophile, mais non métachromatique. Cette basopbilie permet d'obtenir une coloration élective. Pour cela, Lindner conseille d'acidifier le mélange de Giemsa, de façon à supprimer la réaction de Téosinate d'azur et à faire agir l'azur de méthylène comme colorant basique. Lindner propose deux formules. Tune lente (A) qui réussit toujours et une autre rapide (B) moins sûre.
Formule A. Eau distillée 10 cm3.
Solution de Giemsa V gouttes.
Acide acétique à 1 p. 100. . . I —
Formule B. Giemsa X —
Acide acétique à 0,5 p. 100. . . X —
Fixer les frottis pendant 10 minutes par l'alcool absolu. Colorer une heure au moins dans la solution A ou 10 minutes dans la solution B. Pour les coupes, fixer les pièces au sublimé ou au formol, colorer les coupes douze à quarante-huit heures dans la solution A, puis laver une heure à l'eau distillée.
Les Bactéries, les labrocytes et les corpuscules de Prowazek sont colorés en bleu foncé, les noyaux des leucocytes sont bleuâtres et ceux des cellules épithéliales sont un peu moins roses que le cytoplasme.
L'examen sur fond noir ne paraît pas avoir donné encore de résultats pratiques. Bàhlman ^ a vu nettement trois sortes de corpuscules qu'il considère comme caractéristiques : des éléments bactériformes, des masses protoplasmiques mobiles et des globules jaunâtres. Mais il ne sait auxquels conférer le rôle }>athogène. Au point de vue du diagnostic microscopique, tout reste à faire de ce côté.
1. Rahlman, Ueber Trachom. Beitr. z. Aurj enheilkunde , LXII, 1905.
