Laver à l'alcool absolu deux ou trois fois

5. Laver à l'éther deux ou trois fois en le laissant écouler, sans souffler.

0. Laisser sécher ou insuffler de l'air chaud (avec une double poire). Si on fait des numérations successives, on se contente, entre chacune,

de laver la pipette à l'eau distillée (2 ou 3 fois) puis au liquide de dilution (2 fois).

Ne jamais laisser sécher le sang dans la pipette; si cet accident se produisait, nettoyer le tube capillaire avec un crin de Cheval ou aspirer un peu de solution de potasse caustique à 10 p. 100 et laver ensuite comme ci-dessus, après dissolution du caillot, ou mieux dissoudre ce dernier par digestion artificielle (p. 260), à 37°, avec une solulion de 0 gr. 1 de pepsine pour 100 cm'^ d'acide ehlorhydrique à 1 p. 100.

Laver les chambres graduées à l'eau distillée puis à l'alcool.

Numération des globules rouges.

Liquide de dilution : on peut prendre de la solution physiologique, mais le meilleur liquide est celui de Marcano ^

Sulfate de sodium 5 gr.

Eau distillée 100 cm^

Formol à 40 p. 100 1 —

1. Piquer la face dorsale du doigt, près de Tongle, assez profondément pour que le sang s'écoule librement. Ne pas presser pour éviter le mélange avec la lymphe (p. 621).

1. Benario {Dtsche. med. Woch., p. 57-2, 1894), Marcano (Arch. de méd. expér., XI, p. 434, 1899), puis Armand-Delille et Launoy (Annales Inst. Pasteur. XXV, p. '■22-2, 1911) ont montré lactiou stabilisante du formol sur les hématies. Cette action est telle, que les globules, lavés et stabilisés, fonctionnent aussi bien que les hématies fraîches pour la déviation du complément.

2. Poser la pointe de la pipette dans la gontle de sang, aspirer doucement, jusqu'au trait 1 (dilution à 1 p. 100) pour le sang anémique et jusqu'au trait 0,5 (dilution à 1 p. 200) pour le sang normal. Eviter les bulles d'air; s'il y en a, recommencer l'opération.

3. Avec du papier Joseph, essuyer le sang autour de la pointe et enlever Texcès de sang, s'il yen a, dans le tube capillaire, de telle sorte que l'af fleure ment se fasse exactement au niveau du trait choisi.

4. Aspirer rapidement le liquide de dilution jusqu'au Irait 101 exactement. Enlever doucement le caoutchouc. Il ne doit pas y

Fig. 218. — Compte globules de Thoma-Zeiss. E, perle de verre ; S, extrémité de la pipette; G, tube do caoutchouc; M, embout d'aspiration; 6, coupe de la chambre graduée; o, lame; XV, pourtour de la cellule: r. rigole; B, chambre graduée proprement dite; D, lamelle; a, ensemble de la chambre graduée; c, un des grands carrés du réseau quadrillé.

avoir de bulles d'air dans le réservoir, sinon il faut recommencer l'opération.

5. Tenir le jtouce et l'index sur les deux ouvertures de la pipette et secouer quelques secondes, pour effectuer le mélange de sang et de liquide de dilution, au moyen de la perle de verre.

6. Remettre le caoutchouc. Cliasser doucement le contenu de la tige (2 gouttes), puis déposer une très petite goutte au centre de la cellule graduée.

7. Soufller sur la lamelle, appliquer un des côtés sur la lame et abaisser l'autre rapidement en le soutenant avec une pince ou une aiguille et appuyer légèrement'. Le disque central de la

1. Avec les nouvelles chambres de Bùrker, la lamelle est placée d'avance et on remplit la cellule par les deux côtés, sans aucune difficulté.

cellule doit être complètement recouvert parla goutte de sang; il ne doit pas y avoir de bulles d'air et le liquide ne doit pas passer entre la lame et la lamelle, entre lesquelles on doit voir les anneaux de Newton. Les globules doivent être uniformément distribués dans les carrés. Si ces conditions ne sont pas exactement réalisées, laver et sécher la cellule et remettre une nouvelle goutte.

8. Attendre que les globules soient déposés, puis compter les hématies dans le plus grand nombre possible de petits carrés * et appliquer la formule donnée plus haut, ou, plus simplement, avec la dilution à 1 p. 100, compter les hématies dans cinq des grands carrés, limités par les lignes d'orientation, et multiplier par 5 000 pour trouver le nombre d'hématies au millimètre cube, car les cinq carrés représentent I/o 000" de mm\

Pour compter, il faut suivre une marche méthodique. Employer un grossissement de 200 à 400 diamètres et diaphragmer assez fortement le condensateur. Dans chaque grand carré, compter en suivant les petits carrés, par tranches horizontales ou verticales : pour chaque petit carré, ne compter les hématies qui sont à cheval sur les lignes de séparation que sur deux côtés, par exemple sur la ligne du haut et sur celle de gauche. De cette manière on est sûr de ne pas compter deux fois les mêmes éléments-.

Numération des leucocytes.

Liquide de dilution : acide acétique à 0,5 p. 100, additionné de cinq gouttes de solution à 1 p. 100 de violet pentaméthylé (5B) ^ Ce liquide détruit les hématies et ne laisse subsister que les leucocytes colorés en violet.