PREMIÈRE EXPÉRIENCE

Le lcrJuillet j’injectai sous la peau d’un oiseau, pesant 14 grammes, le sang d'un malade, qui présentait une tumeur cancéreuse ulcérée, implantée sur la région parotidienne gauche (septième salle de chirurgie de l’hôpital de la Misericordia) . La quantité de sang injectée était d’environ 0CC,1, et dissoute dans de l’eau de manière à former un volume de Qcc,7. Le lendemain l’animal était mort. Le sang avait été tiré d’un doigt du malade, avec toutes précautions enseignées par la science.

Pour contrôler cette expérience j’injectai un autre oiseau du môme poids avec 0CC, 7 d’eau distillée. Ce deuxième oiseau ne présenta rien d’anormal.

Atténuation 1q finis cancéreux

Une longue série d’expériences m’ont prouvé que l'organisme animal peut s’habituer au virus cancéreux, pourvu qu’on le soumette à des inoculations de plus en plus virulentes, à partir d’un degré de virulence convenablement affaibli. On comprendra facilement par l’exposition suivante la méthode que j’ai employée pour arriver à ce résultat.

J’ai tiré au moyen d’une simple piqûre, faite au doigt d’uu malade cancéreux (cachexie cancéreuse), après l’avoir lavé à l’alcool et recouvert de collodium élastique, quelques gouttes de sang que j’ai recueillies dans une pipette stérilisée.

J’ai dissous dans de l’eau ce sang, dont la quantité n’arrivait pas à 0CC,3, et j’en ai fait une injection hypodermique sous l'aile d’un poulet. J’ai laissé passer trois heures. Au bout de ce temps j’ai sacrifié l’animal en lui pratiquant au cou une large incision avec un bistouri stérilisé par la chaleur, et j’ai recueilli dans un matras-Pasteur égalemént stérilisé quelques grammes du sang artériel qui coulait en arc.

Ensuite j’ai ouvert l’abdomen et le thorax de l’animal, le plus rapidement et avec le plus de soin possible, et j’ai placé dans quatre vases préalablement stérilisés un morceau du oie, le cœur et le gésier, après avoir flambé la surface de tous ces organes à la flamme d’une lampe à alcool.

Je laissai passer deux jours, au bout des quels je vérifiai que tous les organes étaient en parfait état de conservation. Je pris alors un morceau de foie, que je triturai dans de l’eau distillée, et, après avoir laissé reposer le liquide, j’en injectai 0CC,3 sous la peau d’un petit oiseau du poids de 12 grammes. Deux heures plus tard je trouvai cet oiseau presque moribond, et, fait curieux et important, attaqué de symptômes fort semblables à ceux que j’ai décrits plus haut comme caractéristiques de la ptomaîne cancéreuse.

J’autopsiai cet oiseau, et injectai avec (Jcc,4 de l’eau dans laquelle j’avais trituré ses viscères (foie, poumons, cœur) un autre petit oiseau. J’eus soin de conserver une partie des viscères du premier, dans des vases stérilisés, comme je l’avait fait pour les viscères du poulet. Le lendemain le second oiseau était mort, ce qui prouvait ia continuation de la virulence.

Je laissai passer encore ceux jours. Je triturai les viscères dans de l’eau, et en fis à un autre oiseau une première injection de 0ec,3, et à une heure d’intervalle une seconde injection de 0CC,4.

11 se manifesta des symptômes d’intoxication (agitation, respiration oppressante, puis somnolence et coma). Lue heure plus

tard je fis encore une injection de 0CC,9. Le lendemain l’animai mourut.

En même temps que ce dernier oiseau, j'avais également injecté un pigeon pesant 290 grammes, en me servant du même liquide. Je lui inoculai d’abord hypodermiquement sous l’aile 7 grammes, et une heure après 3 grammes. Dès la première injection le pigeon présenta de l’agitation, il ne pouvait tenir en place et allait continuellement d’un coté à l’autre de sa cage. A la deuxième injection sa respiration devint plus difficile et il tomba on somnolence. Une heure plus tard je lui fis une nouvelle injection de 9 grammes. Au bout d'un quart d’heure état comateux et mort.

Je gardai les viscères de ce pigeon (foie et gésier) pendant deux jours dans des vases stérilisés, puis je triturai dans de l’eau un morceau du foie et en injectai un oiseau pesant 20 grammes. La première dose injectée fut 0ce,4, et de demi-heure en deiniheure j’en injectai d’autres, également de 0CC,4, jusqu’à atteindre le total de 2 grammes.

Tant que le total des doses injectées ne dépassa pas lgr, 4 l’animal ne présenta rien d’anormal, à part une légère agitation. Mais lorsque cette quantité fut dépassée je vis commencer à se reproduire la somnolence, les tremblements convulsifs, la respiration oppressée, l’analgésie et la mort.

J’ôtai les viscères de l'animal (le foie, le cœur et les poumons) et les mis dans un vase stérilisé, où je les conservai encore pendant deux jours.

Après cet intervalle, je procédai comme précédemment : je triturai un morceau du foie dans de l’eau, et en injectai, à la quantité de 2 grammes en une seule fois, un oiseau du poids de 20 grammes. Il ne se manifesta qu’une légère perturbation après l’injection. Le lendemain l’animal était gai et bien à l'aise. Mais il succomba le quatrième jour.

Toutefois ou voit qu'il n’avait presque pas ressenti les effets immédiats de l’injection.

Par suite des transplantations répétées dans des organismes d’animaux, le virus s’était évidemment atténué. En effet, nous •avons vu que le virus le plus actif fut celui de la première expérience, puis qu’il tua un oiseau à la dose seulement de 0ce,3 (dans l’espace de 2 heures).

Celui de li deuxième expérience produisit le meme effet à la dose de 0CC,4 (dans l’espace de 24 heures).

Celui de la troisième, à la dose de 0CC,9 (dans l’espace de 24 heures) .

Celui de la quatrième, à la dose de 1 gr. 5 à 2 gr. (dans l’espace de 5 heures).

Le liquide de la quatrième expérience ne parvint à tuer un pigeon pesant 290 gr. qu’à la quantité de 19gr.,en diverses doses fractionnées, et espacées.

Or, si ce liquide avait conservé sa virulence primitive, il aurait dû, dans ce cas, occasionner la mort à la dose seulement de 6ee,2, puisque, dans la première expérience, la quantité de 0CO,3 suffit pour faire succomber un oiseau, dont le poids était de 12 grammes. Donc, la virulence du liquide de la quatrième expérience était diminuée de plus de 20 fois ; il avait atteint la vingtième dynamisation.

Dans une cinquième expérience, nous avons vu qu’un animal du poids de 20 grammes a résisté à la dose de 2 grammes, injectée d’une seule fois, et n’a succombé que quatre jours après, probablement par une cause étrangère à l’injection. L’atténuation est donc évidente. Toute la méthode se réduit à recueillir du sang d’un individu reconnu cancéreux (et préférablement dans la période finale de cachexie), et à faire passer ce sang dans des organismes de poules ou de pigeons, où on le laisse en digestion pendant 3 ou 4 heures, au bout desquelles on sacrifie l’animal pour conserver les viscères (foie, cœur, poumons, gésier) dans

dos vases stérilisés. On garde ces viscères pendant deux jcurs, puis on les triture dans de l’eau, et on en fait l’injection à de nouvelles poules où à de nouveaux pigeons, avec lesquels on procède de la meme forme que précédemment ; et l’on continue 5 fois ou davantage ces transplantations et ces cultures de viscères jusqu’à ce que l’on obtienne une atténuation extrême du virus.

On reconnaît qu’on est arrivé à cette atténuation lorsque, faisant pari passu des inoculations à de petits oiseaux, en augmentant chaque fois la dose du liquide injecté, ceux-ci résistent à l’inoculation, à la dose de 2 grammes.

Immunité acquise par î’inoculalioB du virus cancéreux déplus en pics actif

Le sang de poule infecté par le sang d’un malade cancéreux que l’on a introduit par injection hypodermique dans'son organisme, avec lequel il s’est trouvé en contact pendant trois heures, conserve pendant longtemps sa virulence quand on le tire au bout de cet intervalle, et qu’on le garde dans un matras-Pasteur ; de la même façon, les viscères gardés dans des vases stérilisés, suivant la méthode étudiée plus haut, conservent respectivement l’atténuation qu’ils ont une fois acquise.

Ainsi, douze jours après que j’eus sacrifié la première poule qui a servi à mes expériences, son sang conservait toute sa virulence, comme le preuve l’expérience suivante :

J’injectai avec 0°c,7 de ce sang, dont la conservation était parfaite, un oiseau du poids de 10 grammes. L’animal mourut en quelques heures.

D’autres expériences analogues, faites avec du sang conservé pendant un intervalle de quatre à huit jours, me donnèrent les mêmes résultats.

Après avoir vérifié ce fait, je voulus

m’assurer si l'inoculation

graduelle et progressive de cultures de plus en plus virulentes pourrait communiquer l'immunité à un animal.

Je fis à un oiseau du poids de 12 grammes une injection sous l’aile avec la quantité de 0CC,G de l'eau, dans laquelle j’avais trituré jusqu’à saturation un morceau de viscère (le foie) qui contenait le virus le plus bénin.

L’animal ne souffrit aucunement de l’inoculation.

Quatre jours plus tard, j’inoculai le meme oiseau avec 0CC,G de la culture Immédiate en virulence. Il supporta cette nouvelle injection sans donner aucune marque de souffrance.

Je laissai passer encore quatre jours, et répétai sur le meme animal l’injection, cette fois avec 0ce,7 d’une culture encore plus énergique que la précédente. Meme résultat.

Enfin, après un intervalle de plus de six jours, j’injectai le meme oiseau avec 0CC,5 de sang virulent, le même que j’avais conservé dans le matras-Pasteur, et dont j’avais déjà vérifié l’énergie morcelle.

Pour contrôler la dernière expérience, et pour avoir une nouvelle preuve de cette énergie, je pris un autre oiseau du meme poids que le précédent, et parfaitement sain; et je lui injectai une dose égale du môme sang. Or, voici ce qui arriva. L’oiseau, qui avait été soumis aux inoculations de cultures d’action graduée, ne souffrit absolument lien, tandis que l’oiseau de contrôle mourut dans l’espace de quatre heures.

Quelques minutes après l’injection, il donna des signes d’abattement et de tristesse ; au bout d’environ dix minutes, il tomba dans un état de somnolence interrompue par des sursauts ; impossibilité de voler.

Horripilations par intervalles. Enfin, respiration difficile, paralysie et mort.

On voit donc qu’il est possible d'atténuer le virus cancéreux et de le graduer de manière à le rendre propre à communiquer l’immunité quand on l’inocule à des animaux.

Nous allons voir si, au moyen des memes cultures graduées, on peut obtenir dans l’organisme cancéreux une modification vitale, de manière à rendre possible l’utilisation des mêmes cultures comme agent thérapeutique.

Examen microscopique (les lésions

Je procédai à l’examen microscopique de la tumeur abdominale, produite par l’inoculation d’une culture, que j’ai décrite au chapitre Virulence des cultures (première expérience).

Après avoir retiré la tumeur de l’alcool où elle était conservée, je fis avec la pointe d’un bistouri stérilisé une ponction qui provoqua la sortie d’une masse blanche, caséeuse, dont nous séparâmas une petite parcelle, qui, après avoir été colorée avec du carmin, fut examinée à un grossissement de 1000 diamètres. Nous vérifiâmes la présence d’un grand nombre de cellules qui ressemblaient à des cellules cancéreuses par leur aspect et leur forme spéciale.

Ainsi, ces cellules se trouvaient, les unes isolées, les autres réunies et formant des agglomérations.

Elles étaient de contours irréguliers, contenant dans leur intérieur des noyaux et des nucléoles, aplaties, tantôt déformé plus ou moins ovoïde, avec un grand noyau excentrique, et plusieurs nucléoles; tantôt ayant la configuration d’un sablier, à triangles allongés avec angles aigus ou arrondis, fusiformes, en raquette, etc.

Les contours de ces cellules étaient pâles et minces, surtout quand on les examinait sans les colorer par le carmin ; mais les noyaux offraient des contours bien accusés.

Les agglomérations présentaient la disposition alvéolaire, avec des cloisons entrecroisées.

Les cloisons de la tumeur étaient très amincies, et, en certains points, détruites totalement.

Nous ne rencontrâmes dans l’intérieur des cellules ni globules de graisse, ni matière caséeuse, ou autre dégénérescence. Mais, hors des cellules, nous aperçûmes un grand nombre de globules de graisse dispersés, qui disparaissaient sous l’action de

l’éther.

Il est probable qu’il s’agissait d’un carcinôme encephaloïde, de consistance très molle, presque pultacée, ce qui n’a pas lieu d’étonner du reste chez un animal dont les tissus sont naturellement très tendres.

De cette tumeur, nous avons conservé une lamelle avec la préparation histologique. La tumeur elle — meme est encore conservée presque tout entière, dans de l’alcool absolu.

Avec la meme culture qui m’avait servi pour produire la tumeur précédente, j’injectai encore deux autres cochons d’Inde, dont l’un pesait 664 gr. et l’autre 502 gr. Trois jours après ces animaux avaient considérablement diminué de poids: le premier n’accusait plus à la balance que 624 gr.,et le second que 464 gr.

Sept jours plus tard je remarquai, aux points où j’avais fait l’injection hypodermique, une tumeur de la dimension d’un oeuf de pigeon, sans réaction inflammatoire. Je pensai tout d’abord qu’il s’agissait d’un abcès. Mais, lorsque j’eus opéré la ponction sur l’un deux, il s’échappa un liquide laiteux, crémeux, qui examiné au microscope, me révéla la présence d’un grand nombre d’alvéoles contenant des cellules de l’aspect déjà décrit. On remarquait aussi des globules de pus.

Il faut ajouter que, dans l’intervalle des cellules, je rencontrai un grand nombre de spores, et quelques bacilles, avec les caractères que j’ai décrits ailleurs. Les animaux qui sont morts par suite des inoculations présentaient dans les reins, le foie et autres viscères des foyers durcis, où l’on rencontrait des cellules suspectes ressemblant à celles du carcinôme.

On peut tirer de ces premières études sur la nature du cancer les conclusions suivantes :

l.° Dans l’organisme des malades cancéreux que nous examinâmes on rencontre un micro-organisme, qui se présente dans le sang sous la forme de micrococcus réunis en zooglèe et qui, dans les cultures, se développe en bacilles, dont la prolifération se fait par sporulation

2° Le cancer paraît être transmissible par le moyen de cultures. Il se produit, du moins, dans les animaux sur lesquels on pratique des inoculations avec ces cultures, un état de cachexie qui se termine par la mort, et l’on trouve presque toujours dans le cardia, le pylore et d’autres points, des lésions de nature cancéreuse (carcinose miliaire aigüe ?) ;

3. ° Le virus cancéreux renferme une substance très toxique (ptomaïne), qui peut s’isoler de l’urine, par laquelle se fait en grande partie son élimination ;

4. ° L’énergie du virus cancéreux peut se graduer, au moyen de transplantations successives dans des poules et des pigeons, dans l’organisme desquels ou le laisse séjourner quelques heures (les animaux jouent alors le rôle de véritables étuves vivantes) ;

5. ° Si l’on inocule à des oiseaux du virus de plus en plus actif, ils acquièrent une immunité parfaite contre l’intoxication cancéreuse, et résistent à l’inoculation d’un virus mortel.

6.° Ces faits nous donnent l’espoir que nous pourrons trouver une thérapeutique efficace pour la cure de l’alfection cancéreuse, en employant des cultures graduées, moyen qui se devra appliquer dès que le diagnostic de l’affection aura été confirmé,, et suivre le plus près possible l’invasion du mal.

Ce dernier point occupera prochainement notre attention.

ULTZDZEIX

Avant propos . 3

Le microbe du cancer . 5

Examen microscopique du sang et sa culture . 7

Analyse chimique de Farine . 11

Expériences d’inoculation du principe alcalin à l’état de

sulfate acide . 12

Expériences sur des oiseaux — Action physiologique de la

ptomaine cancéreuse sur ces animaux . . 14

Virulence des cultures . 17

Virulence du propre sang cancéreux . 20

Atténuation du virus cancéreux . »

Immunité acquise par l’inoculation du virus cancéreux de

plus en plus actif . 24

Examen microscopique des lésions . 26

Conclusions . 23