RECHERCHE DO SUCRE DANS LES URINES

Un des réactifs les plus anciennement connus, est le réactif de Moore. Il consiste à ajouter à l’urine que l’on soupçonne être diabétique, environ 1/10 de son volume de solution concentrée de soude ou de potasse caustique, et à chauffer graduellement jusqu’à l’ébullition. Sous l’influence de l’alcali et de la chaleur, la liqueur se colore peu à peu, et si la proportion de glucose est élevée, la coloration devient d’un brun foncé.

Ce réactif, assez sensible il est vrai, laisse cependant beaucoup à désirer, en ce sens que des substances autres que le sucre, peuvent, dans les mêmes circonstances, rendre l’urine légèrement brunâtre. On ne doit compter qu’à demi sur sa valeur, et toutes les fois qu’il s’agira de déceler de faibles quantités de sucre, il faudra nécessairement avoir recours à d’autres procédés d’une exactitude plus parfaite.

Ces procédés sont au nombre de trois, savoir : 1° Par la liqueur de Fehling ; 2" par le s. nitrate de bismuth ; 3' la solution de carmin d’indigo.

1" Rcciierclic du sucre pnr la liqueur de Fehling:.

La liqueur de Fehling, les solutions Barreswil, Trommer, Payne, ne sont que des modifications du môme réactif. Toutes sont basées sur la réduction du bioxyde de cuivre en solution dans la potasse, à l’état de protoxyde rouge insoluble, par le sUcre de glucose. La liqueur de Fehling étant la modification la plus heureuse et la moins altérable, nous nous en servirons de préférence aux autres, ét nous iudiquerons son mode de préparation :

On pi-end d’une part 34 gf. 64 de sulfate do cuivre bien pur et parfaitement cristallisé, et, d’autre part, iTfS gr. tartrale de potasse et de soude, on les fait dissoudre dans quantité suffisante d’eau distillée, et on ajoute à cette solution 500 à 600 gr. de lessive de soude caustique, présentant une densité de 1,12 et par conséquent contenant 80 à 90 grammes de soude fondue. On agite le mélange, de manière à le rendre bien intime, et on complète le volume exact d’un litre par l’addition d’une nouvelle quantité d’eau distillée. On obtient ainsi une belle liqueur bleue, qui peut se conserver pendant longtemps, sans formation d’aucun dépôt d’oxyde rouge de cuivre, surtout si on a soin de la conserver dans un endroit frais et obscur.

Pour arriver à déceler le sucre diabétique par ce réactif, on peut procéder de deux manières il" on verse un peu d’urine parfaitement limpide dans un tube à expérience, puis quelques gouttes de solution Fehling, et on porte à l’ébullition. Si l’urine renferme du sucre, on voit alors la liqueur se troubler peu à peu, et un précipité rouge d’oxyde cuivreux se déposer au fond du tube.

Le second mode de faire, qui est bien plus sensible, consiste à verser dans un tube à expérience 5 grammes environ de liqueur cupro-potassique, à porter à l’ébullition sur une lampe à alcool, et à faire tomber le long des parois, au moyen d’une pipette, quelques gouttes du liquide sucré. On voit alors se former a la surface de contact des deux liquides, un anneau vert, qui passe rapidement au jaune, puis au rouge, et qui contraste vigoureusement par sa couleur orangée et son opacité avec la couleur et la transparence du liquide sous-jacent.

Ce procédés, si excellent qu’il puisse être, n’est pourtant pas exempt de tout reproche. On sait, en effet, qu’une foule de substances organiques, et entre autres l’allantoïne, l’indicane, l’acide urique, les urates, produisent tout aussi bien que le sucre, la réduction du sel de cuivre. D’un autre côté, on a reconnu que les matières albuminoïdes et les sels ammoniacaux empêchaient cette

réduction, lors même que la liqueur contenait de la glucose. Pour rçndrece procédé applicable, il faut donc savoir obvier à l’inconvénient offert pour la présence de ces diverses substances dans les urines,

9i l’urine diabétique à examiner est simplement albumineuse, on commencera par se débarrasser de l’albumine par le sulfate de soude et la chaleur, ainsi que nous l’avons vu précédemment, on filtrera et on recherchera le sucre dans la liqueur filtrée.

Si au contraire,l’urine renferme de l’acide urique et des urates en grande quantité, de l’indicane, etc., on précipitera toutes ces substances par l’addition de quantité suffisante sous-acétate de plomb liquide, et après quelque temps de repos, on décantera le liquide surnageant. L’excès du sel de plomb sera enlevé par l’acide sulfhydrique, ou mieux par le carbonate de soude, on filtrera et on pourra déceler, sans crainte d’erreur, la glucose dans la liqueur recueillie. Au besoin, si la quantité dq sucre est très-faible, on concentrera l'urine par évaporation.

Enfin, dans le cas où la présence de sels ammoniacaux serait un obstacle à la réduction du sel de cuivre par la glucose, on paralysera leur action par l’addition d’une plus grande quantité de soude caustique. En effet, dans la liqueur de Fehling, la réduction de l’oxyde cuivrique dissous, en oxyde cuivreux rouge, n’a lieu qu’à la faveur de l'alcali fixe libre: si donc on verse un liquide ammoniacal, une urine par exemple dans la liqueur de Fehling, c’est comme si on neutralisait la soude caustique libre qu’elle contient, avec l’acide du sql ammoniacal. Il suffira alors, comme il est facile de le comprendre, dq mettre un excès de soude caustique, pour que la réduction puissq se faire comme auparavant.

Recherche du sucre par le sons-nitrate de bismuth.

L’action réductrice de la glucose se manifeste à un haut degré vis-à-vis de l’oxyde de bismuth en présence d’un alcali. Cette propriété, récemment reconnue par Bœllger, en fait un des réactifs

les plus sensibles du sucre diabétique. Il a de plus l’avantage de n’être réduit par aucune des substances dont nous avons parlé à propos de la liqueur de Fehling. La présence de l’albumine peut seule induire en erreur, à cause du soufre qu’elle renferme, lequel donnerait un précipité noir de sulfure de bismuth, qu'on pourrait confondre avec la poudre noire de bismuth métallique, mais dû réellement à la réduction de l’oxyde blanc par la glucose. Dans ce cas,on devrait alors se débarrasser auparavant de l’albumine, par le sulfate de soude et l’ébullition.

Cette précaution prise, a 5 grammes d’urine sucrée ou supposée telle, on ajoutera à peu près 0,05 centigrammes de sous-nitrate de bismuth, puis huit à dix gouttes d’une solution concentrée de potasse ou de soude caustique, exempte de tout sulfure, et on fera bouillir ce mélange dans un tube de verre pendant plusieurs minutes. La moindre coloration en noir ou en gris, qui se produira sur le sel de bismuth blanc de neige, indiquera d’une manière certaine l’existence du sucre de diabète dans l’urine en question.

3" Recherche du sacre »n moyen de In solation de Carmin d’indigo.

Ce procédé, assez peu connu et malheureusement trop négligé, est dû à Mulder, et permet, de découvrir des traces de sucre dans une urine. Si l’on chauflé, en effet, une urine sucrée jusqu’à l’ébullition avec une solution de carmin d’indigo,rendue alcaline au moyen du carbonate de soude, et non par de la soude caustique, qui sufirait à elle seule à déterminer la décoloration, peu à peu le liquide bleu passe au vert, au rouge, enfin au jaune ; puis, si l’on cesse de chauffer et qu’on agite la solution encore chaude, de manière à ce que l’oxygène de l’air puisse agir, le changement de couleur se produit en sens inverse, et la liqueur redevient bleue. Cependant, lorsqu’on abandonne le liquide au repos, la couleur jaune réparait promptement. Cet effet de décoloration est dû à l’oxydation de la glucose aux dépens de l’oxygène de l’indigo bleu, qui passe alors à l’état d’indigo blanc,

Lorsqu’on n’aura que des traces de sucre à décéler, on ne devra naturellement employer qu’une solution d’indigo très-faiblement colorée.

DOSAGE DU SUCRE DANS l’üRINE.

On apprécie la richesse en sucre d’une urine, par divers procédés. Les plus usités sont: 1® la fermentation., 2® le saccharimètre ; 3® la liqueur de Fehling.

1° Dosage par la rcrmcntatioii.

La fermentation du sucre, outre qu’elle a l’inconvénient d’exiger beaucoup de temps et de nécessiter de nombreuses corrections, ne donne que des résultats généralement imparfaits. Aussi passerions-nous pour ainsi dire ce procédé sous silence, si nous n’avions à présenter à ce sujet une modifleation très importante, qui n’est pas décrite dans tes différents ouvrages sur les urines et qui donne d’assez bons résultats. Cette modification a l’avantage de supprimer du même coup toutes les corrections rendues nécessaires par l’emploi du procédé primitif, et par conséquent permet d’arriver à un dosage plus exact et plus pratique. Elle consiste à agir comparativement sur un volume connu d’urine diabétique, et une solution titrée de glucose pure.

A cet effet, on prend deux tubes gradués, on les remplit de mercure, puis on les renverse sur la cuve, et on y introduit une quantité déterminée des deux liquides en question, dans lesquels on a préalablement délayé un poids égal de levure de bière. Si l’on a soin d’opérer dans un milieu d’une température de 30 degrés environ, la fermentation peut être considérée comme achevée au bout de 10 à 12 heures. On lit le volume d’acide carbonique produit dans chaque tube, et au moyen d’une proportion, on arrive à connaître la. quantité de sucre contenue dans l’urine.

Malgré cette modification, la fermentation étant rarement absolument complète, cette méthode de dosage est encore inférieure aux deux suivantes, qui sont beaucoup plus exactes et plus

rapides. Ces deux méthodes, avons-nous dit plus haut, reposent sur l’emploi du saccharimètre et de la liqueur de Fehling.

Oosage par le saccharimètre.

Tout le monde connaît la forme et le maniement de cet appareil. Nous nous dispenserons donc de le décrire.

Pour essayer une urine diabétique par ce procédé, si elle est foncée, on la décolore en la filtrant sur du charbon animal. Quelquefois même la coloration est si intense, qu’il est utile de faire intervenir le sous-acétate de plomb. On prend alors une quantité déterminée d’urine, 50 centimètres cubes par exemple, et on l’additionne d’un volume également connu de sel de plomb liquide, 2 centimètres cubes par exemple. On filtre de nouveau, et on remplit un tube de 20 centimètres avec ce liquide. L’appareil étant au zéro, on place le tube entre les deux parties du saccharimèlre, et on observe le changement produit dans la coloration des deux moitiés du disque. S’il ne se produit aucun changement de coloration, c’est que le liquide essayé ne contient pas de sucre. Si il y a au contraire un changement de coloration, on tourne le bouton jusqu’au rétablissement de l’égalité des teintes. On note le nombre de degrés et les fractions de degrés,pois on multiplie ce nombre par 2,256 pour avoir le poids du sucre, puisque chaque degré du saccharimètre correspond à 2 gr. 256 de glucose séchée à 100®. Inutile de dire que dans le calcul, on devra tenir compte du volume de sous-acétate de plomb qn’on aura ajouté à l’urine.

Si l’urine à essayer contenait de l’albumine, il faudrait de toute nécessité s'en débarrasser au moyen de la chaleur et de l’acide acétique,attendu que l’albumine agit sur la lumière polarisée en sens contraire de la glucose.

Cette méthode est très exacte et très facile à pratiquer. Toutefois, elle exige un appareil dispendieux, que peu de personnes peuvent se procurer. A son défaut, on aura donc recours à la liqueur de Felhing, qui donne aussi, d’ailleurs, d’excellents résultats.

3° Dosage pnr la liqueur Felliiiig.

Nous avons indiqué plus haut la composition de cette liqueur. La proportion de sulfate de cuivre a été calculée de telle sorte, que 20 centimètres cubes de cette solution, sont complètement décolorés à la température de l’ébullition par 1 décigranime de glucose. Mais le titre de la liqueur étant sujet à varier, par suite de son altérabilité plus ou moins grande, il 'est bon de s’assurer de son véritable titre, chaque fois qu’on aura un essai à faire, a6n de pouvoir se baser sur des données exactes pour opérer son dosage. Cette connaissance acquise, pour savoir la richesse en sucre d’une urine diabétique, il n’y a plus qu’à déterminer quel est le volume de cette urine, qui décolore 20 centimètres cubes de liqueur de Felhing, ou ce qui revient au môme, quel est le volume d’urine qui contient 1 décigramme de glucose.

A cet effet, si l’urine à examiner est albumineuse, on commence par précipiter l’albumine au moyen de la chaleur et de l’acide acétique, et on filtre pour avoir un liquide parfaitement transparent. On en mesure 10 centimètres cubes dans une éprouvette graduée, et on y ajoute plus ou moins d’eau distillée suivant la quantité de sucre qu’elle contient. Dans tous les cas, on fait en sorte que la liqueur ne contienne pas plus de I pour 100 de sucre, car l’expérience a montré qn’en opérant sur une longue colonne, on arrive à un dosage plus parfait.

L’urine convenablement étendue d’eau, on en remplit une burette divisée en dixièmes de centimètre cube. D’un autre côté, on verse 20 centimètres cubes de liqueur de Felhing dans un matras pouvant contenir 150 grammes au moins, et on l’étend avec de l’eau distillée au volume de 100 centimètres cubes. On chauffe alors le matras jusqu’à l’ébullition à l’aide d’une lampe à alcool, puis on verse graduellement le liquide sucré de la burette dans la liqueur bleue. A mesure que le liquide sucré arrive dans la liqueur bleue, on voit se produire un trouble de plus en plus abondant, dû ù la réduction de l’oxyde cuivrique soluble

dans la soude caustique, en oxyde cuivreux insoluble. En môme temps la liqueur bleue se décolore de plus en plus. Pour faciliter la précipitation du protoxyde de cuivre et rendre sa déshydratation plus rapide, on ajoute à la liqueur bleue quelques grammes d’une solution concentrée de soude caustique. Sur la fin de l’opération, il faut redoubler d’attention, et ne plus verser le liquide sucré que goutte par goutte, en laissant reposer la liqueur pendant quelques secondes après chaque addition, pour voir si la décoloration est complète.

Une remarque importante, c’est qu’on ne devra jamais interrompre l’opération au-delà de quelques secondes nécessaires à la précipitation de l’oxyde rouge de cuivre. Sans cette précaution, l’opérateur pourrait être induit en erreur, à cause de la grande tendance du protoxyde de cuivre à se transformer, au contact de l’air, en bioxyde qui, en se redissolvant dans la potasse, colorerait de nouveau la liqueur en bleu.

Si on avait dépassé la quantité de solution sucrée nécessaire pour produire la décoloration complète, on en serait averti par la teinte jaune que prendrait le liquide surnageant le précipité, teinte dûe à l’action de l’alcali sur le sucre en excès. D’ailleurs, il sera facile de s’en assurer, en filtrant la liqueur bouillante du matras, et voyant si l’addition de quelques gouttes do réactif Fehling, ne détermine pas un précipité d’oxyde cuivreux.