I. — Gélatine colorée de Noeggerath. — On mé
lange dans l’ordre suivant :
Bleu de méthylène .............. Ace:
Violet de gentiane ................ 4 ce.
Vert de méthyle: 2:40: Lréc:
Chrysoïidine,.:..:4%2.%4.42.% | 4 cc.
Füchsineéis ir ineutres Lis mor Dué AUTO eC.
Eau distillée (qis.:p.):22 Rite: 200 cc.
On obtient une teinte brune tirant sur le bleu. On attend quinze jours. Il se produit des changements de coloration que l’on corrige en ajoutant l’une des couleurs précédentes.
VI à VIII gouttes sont nécessaires pour colorer un tube'de gélatine.
Sur ce milieu, le B. d’Eberth donne des colonies violet évêque.
Sur gélose fuchsinée de Gasser, les colonies coliennes ont une teinte rouge voisine de celle des -colonies typhiques.
Ramond emploie la gélose lactosée et colorée à la rubine. À la moindre trace d’acidité, il se produit une coloration rouge.
IT. — Procédé de Harrison. — Cet auteur recommande le milieu :
Peptoneide 'Witter.1.7.1...708 1 à 2 gr.
Taurocholate de soude ........ 5 gr.
Esculiné.: NT NRC 1 gr.
Gaitrate défense SE ar, 0 gr. O5
Fausses OS ENRAe 100 gr.
avec 1,5 pour 100 d’agar si l’on veut un milieu solide. Le B. Coli fait fermenter l’esculine (sucre plus esculétine), l’esculétine se combine au citrate de fer
pour donner un sel brun noirâtre.
Le Colhbacille noircit donc le milieu comme le B. lactis aerogenes.
On emploie 10 cc. de ce milieu pour 100 cc. d’eau et on cultive à une température de 37°5 à 40°.
IT. — Procédé au Neutral-Roth de Savage. — Ce procédé est applicable à la recherche rapide du Colibacille et ne saurait déceler le B. d’Eberth.
Il utilise la réaction positive du B. Coli en présence de milieux au rouge neutre : virage au jaune canari et fluorescence.
Beaucoup d’auteurs ont montré que ce virage était sous la dépendance d’une production momentanée d’ammoniaque et qu’il était loin d’être spécifique de la présence du Colibacille. Ont les mêmes propriétés les Bacilles paratyphiques (Segale, Schottmüller, Sacquépée, Sicre et Vincent), le B. de Gaërtner (Aërtryck, Moersele), les B. du tétanos et de l’œdème malin (Rothberger), B. Cloacoe (Ferrera, Hortu et Paredes), les Microbes de la fermentation ammoniacale (Rochaiïx et Dufourt), le B. flucrescens, certaines bactéries banales des eaux.
Par contre, d’après Sicre et Vincent, un certain
& 5 NPANTEE nombre d'échantillons, de B. Coli décolorent à peine les milieux au. rouge neutre.
On ne la manière suivante :
Tout d’abord, on prépare un bouillon au rouge neutre en faisant cuire dans un demi-litre d’eau 195 gr. de bœuf. Après refroidissement, on ajoute :
Peptone: Dufresne: 4722072000 10 gr.
Sel oem DE RU ERREURS LOS Glicoser ee RE en ARS 2 GE O0
On ramène à 500 cc. Où fait bouillir et, après refroidissement, on décante. Ensuite on ajoute 5 cc. de la solution :
Neutral-roth ee ARR UE bn NU SNAES
30 minutes d’autoclave à 115°.
Le bouillon a une coloration rouge rubis. On le répartit dans des tubes, d'Esmarch à raison de 6 à 20 cc. On ensemence avec 1,5, 10, 15 et 20 cc. d’eau à analyser et on porte à l'étuve à 44°. Il se forme — s’il y a du Colibacille — des bulles gazeuses à la partie supérieure-du bouillon qui devient fluorescent et jaune canari. Cette réaction, apparait en 48 heures; si elle ne se fait pas on peut affirmer. que l’eau en cause ne renfermait pas de Colibacille en quantité appréciable. Bar Li
IV. — Procédé de Lacomme. — Lacomme combine la méthode de Savage et celle d’Eijkmann :
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Éénution du rouge neutre et production de gaz en à prés
sence de solution glucosée. Es RAS Pour Lacomme, Rochaix et Dufourt, toute eau donnant ces réactions contiendrait du Colibacille.
À. Rochaix a proposé d'employer le rouge neutre non plus en vue de la recherche exclusive du Colibacille, mais de la découverte rapide de la contamination globale de l’eau par les microbes provenant des matières d’origine intestinale. L'indice de contamination concerne l’ensemble des germes faisant virer le rouge neutre. | PA On utilise le bouillon de Savage, privé de sucre, dans le but d'obtenir une réaction constante.
L’échelle à utiliser est la même que pour les méthodes ordinaires. F, AE
