CHAPITRE IV

Recherche d'une toxine chez quelques autres champignons pathogènes.

Après la constatation de Texistence d'un poison produit par VAspergillus fumigatus dans ses cultures, il convenait de soumettre aux mêmes investigations, un certain nombre de champignons voisins qui se distinguent comme lui par une action pathogène des plus marquées. De ce nombre sont : VAspergillus orizse^ VAspergillus sulphureus, le Rhizomucor parasiticus, le Rhizopns equmuSy champignons que M. le D'' Bodin a bien voulu mettre constamment à ma disposition.

Le degré de virulence de ces espèces parasites se rapproche beaucoup de celui de VAspergillus fumigatus ; les inoculations de spores au lapin et au cobaye, amènent invariablement la mort de Tanimal dans d'assez brefs délais. Le tableau de l'action morbide est sensiblement le même que pour VAspergillus fumigatus.

Dans un récent travail, MM. Bodin et Savouré (4) ont étudié l'évolution de la mycose expérimentale relative à quelques-unes de ces espèces. D'après ces auteurs, les troubles et les accidents qui surviennent seraient les suivants :

Aspergillus orys^œ, — L'injection à un lapin, dans les veines, de 2 ce. d'émulsion de spores, occasionne les désordres suivants : l'animal ne mange plus dès le quatrième jour et présente quelques phénomènes convulsifs : il meurt dans la soirée. L'autopsie révèle un foie volumineux avec lésions tuberculiformes. Les reins sont couverts d'un semis de points jaunes, très serrés, qui pénètrent dans la substance corticale sous forme de fines traînées blanc-jaunâtres.

Aspergillus sulphureus, — Deux ce. d'émulsion de spores sont injectés dans la veine de l'oreille d'un lapin. Dès le lendemain, l'animal ne mange pas ; le quatrième jour au matin, il est pris de pliénomènes convulsifs violents, portant sur les membres et sur le globe oculaire, et se poursuivant par des crises qui se renouvellent à quelques minutes d'intervalle.

(1) BoDw et Savoché : Mecherchès expérimentale» sur les mycoses internet, Arch, de pftrtDt t VU, p. llO, 1904*

En dehors des crises, il persiste de la contracture musculaire avec opîsthotonos. Dans Taprès-midi, l**s convulsions augmentent de violence, l'animal a des soubresauts qui le retournent complètement ; les crises deviennent de plus en plus nombreuses et de plus en plus rapprochées, jusqu'à quatre heures de l'après-midi, instant où l'animal est sacrifié. L'autopsie montre que le foie est un peu gros, parsemé de points tuberculiformes.

Rhixomucor parasiticus. — Un lapin reçoit dans une veine de l'oreille, 1 ce. d'une émulsion de spores de ce champignon ; le quatrième jour, l'animal ne mange pas ; le cinquième jour, il est à l'agonie et reste couché sur le côté ; les pattes sont agitées de mouvements convulsifs ; surviennent enfin des convulsions, puis la mort. A l'autopsie, on remarque un foie volumineux congestionné, avec semis de petits nodules jaunâtres en quelques points. Les reins sont également couverts de tubercules miliaires. Un cobaye inoculé de la même façon, meuit le sixième jour après l'opération. A l'autopsie, mômes constatations que pour le lapin.

Rhisopus equinus, — Un lapin est inoculé dans une veine, avec 3 ce. d'une émulsion de spores. Au bout du quatrième jour, l'animal est pris de convulsions, suivies de contractures ; il meurt dans l'après-midi. A l'autoppsie, le foie est gros, congestionné ; la rate et les reins sont recouverts de tubercules blancs qui pénètrent en traînées dans la substance corticale du rein. Un cobaye, ayant reçu une injection analogue de spores dans la cavité péritonéale, présente six jours après, de violentes convulsions, et succombe dans l'après-midi. L'autopsie révèle un foie et des reins volumineux, avec les petits tubercules blanchâtres classiques.

La mort de tous ces animaux, à la suite d'inoculations expérimentales, ressemble assez comme symptômes et comme lésions, à celles que ron observe avec VAspergillus fumigatus ; les accidents surviennent dans un délai sensiblement voisin, ainsi que la mort.

Je me suis demandé si cette frappante analogie, ne se poursuivait pas jusque dans les résultats d'inoculation des filtrats de cultures.

Mais, je dois dire dès maintenant, que seul, parmi tous les Aspergillus, et parmi les autres espèces que j'ai examinées à ce point de vue, VAspergillus fumigatus s'est montré producteur d'un principe toxique dans-ses milieux de culture.

Les expériences qui m'ont permis de faire cette constatation sont les suivantes :

Aspergillus orizœ. — Un lapin de taille moyenne reçoit 10 ce. d'un filtrat d'une culture de 16 jours, en inoculation intra-veineuse. Mis en constante observation, l'animal n'a jamais rien présenté d'anormal.

Aspergillus sulphureus. — Mêmes opérations en tous points, et même résultat.

Rhigomucor parasiticus. — Un lapin de 1500 gr. reçoit dans la veine marginale postérieure de Toreille, 20 c.c« de Tiquide d'une culture àe 40 jours .

développée à l'étuve à 30*, et flltrée à la bougie Garros : L'animal ne présente absolument aucun symptôme.

Un autre lapin pesant 1937 gr. reçoit sous la peau, 10 ce. de liquide d'une culture de 13 jours sans manifester aucun trouble ; six jours après, il reçoit 20 ce. de filtrat de culture d'un mois. Il reste normal. Enfin, douze jours après cette seconde inoculation, il reçoit 20 ce. de liquide d'une culture d'un mois. L'animal reste encore normal.

Pensant que le principe toxique pouvait être intimement fixé au protoplasma cellulaire, j'ai dilacéré au broyeur Borrel une culture de Rhizomucor parasUicuSy d'un mois et demi. Le produit du broyage est mis à macérer dans de Teau distillée, puis filtré 12 heures après à la bougie Garros. Six cent, cubes du filtrat sont injectés dans les veines d'un lapin moyen, sans résultat.

Rhisopus cquinufi. — Un lapin de 1830 gr. reçoit dans la veine de l'oreille, 20 ce d'un liquide de culture de 40 jours. Le plus léger symptôme ne peut être observé.

Ces divers essais ont été multipliés avec des cultures de divers âges ; ils ont toujours donné des résultats négatifs en ce qui concerne l'existence d'un principe soluble toxique.

Gomme on le voit, ces dernières inoculations sont bien loin de rappeler les phénomènes de convulsions violentes et de paralysie qui se produisaient chez le lapin avec la minime dose de 2 ce. de filtrat de culture d'Aspergillus fumigatus.

Je ne chercherai pas à expliquer cette étrange anomalie, et je me bornerai à indiquer qu'il suffit peut-être, pour déceler d'autres poisons mycosiques, d'adopter des méthodes nouvelles d'expérience, ou de faire varier toutes les conditions de* ces expériences, milieu, température, voie d'inoculation etc.

Là encore, un vaste champ reste ouvert à l'hypothèse en même temps qu'à l'expérience.

Mais, pour être quelque peu déconcertants, ces faits n'en restent pas moins fructueux. Ils ofl'rent l'avantage de pouvoir mieux définir l'espèce pathogène Aspergillus fumigatus ; car, en dehors des considérations générales d'ordre biologique et médical, la production d'un poison par V Aspergillus fumigatus dans des conditions bien déterminéeSy à l'exclusion d'un certain nombre d'Aspergillus pathogènes voisins, pourra intervenir utilement dans des déterminations délicates et laborieuses.

En efi'et, ne sait-on pas combien la détermination rigoureuse des espèces aspergilliennes est parfois longue et difficile ? Les caractères morphologiques (diamètres de spores, longueurs de stérigmates, etc.),

sont d'une telle variabilité, qu'il ne faut pas moins que toute la science et la patiente sagacité d'un spécialiste pour trancher la difficulté.

Les autres caractères auxquels on a quelquefois recours, n'ont pas davantage la fixité et la constance désirables. La couleur des spores, par exemple, est un facteur des plus variables avec la température, le milieu, etc. Le pouvoir pathogène du parasite lui-même ne peut être non plus avantageusement invoqué; car il est des Pénicillium, des SieAgmatocystis qui, comme nombre d'Aspergillus, deviennent pathogènes spontanément ; ils peuvent causer, sinon la mort, du moins des accidents appréciables.

La faculté, pour VAspergillus fumigatus^ de produire une substance toxique dans des conditions données, constitue donc un caractère important, susceptible de rendre les plus grands services pour la détermination de cette espèce. Sans doute, la question n'est pas complètement élucidée de savoir si cet Aspergillus est, parmi les espèces pathogènes, seul capable de sécréter un poison dans la plupart de ses liquides de culture ; mais il est certain déjà que plusieurs Aspergillus très pathogènes sont incapables de le faire dans des conditions identiques. Le même fait resté à vérifier pour quelques autres espèces.

Il résulterait de travaux récents de M. Paladino-Blandini (i) que le distillai du liquide de culture de VAspergillus fumigatus et de certains champignons, est susceptible de déterminer des accidents lorsqu'on l'injecte à quelques animaux comme le cobaye. Mais, comme it se forme dans la vie des champignons de nombreux composés volatils, provenant de la transformation des aliments de ces plantes, et que certains de ces composés peuvent être toxiques pour diverses espèces animales, cette question demande à être reprise avant que l'on en déduise des faits définitifs. Cependant, un point est actuellement bien net à cet égard ; les expériences que j'ai faites avec MM. Bodin et Lenormand, établissent que les accidents provoqués chez le cobaye par rinjection du distillât des liquides de culture deV Aspergillus fumigatus ne sont pas dûs au poison découvert récemment dans ce cryptogame. Les affirmations de M. Paladino-Blandini, qui tendraient à prouver que ce poison est volatil, ont sans doute trait à une substance volatile élaborée par le champignon dans la culture, substance qui se retrouve dans les cultures de champignons voisins, sinon dans toutes.

(1) Pai.adino-Blandim : Tossici di ifomiceti. — Archvio di Fariracologia sperimentale e scienze affmj. Anno, V. Vol. V, 1906.