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dépôt sont des bacilles petits, très chromophiles, mais toujours dépourvus de granulations.
2 Milieux solides. -— Nous avions remarqué qu'une solution d'acide nueléique et de phosphates, ajoutée en petite quantité à une culture âgée de bacilles diphtériques vrais devenus peu granuleux, augmentait le nombre de corpuscules métachromatiques très sensiblement.
L'addition aux sérums coagulés d’une combinaison phosphorée ou d’un composé nucléo-protéique restait à essayer. Nous. avons utilisé, pour préparer de nouveaux milieux, la technique décrite par Costa (1),, mais en remplaçant le sucre par les substances dont on voulait ‘éprouver l’action
a) Milieu Costa, additionné de nucléo-protéides d’origine végétale (extrait total de levure de bière).
Trois variétés de bacilles pseudo-diphtériques, vérifiés sans granulations, sont ensemencées.
Au bout de vingt-quatre heures, les frottis des trois cultures donnent une réaction de Neisser positive; la coloration vitale détermine la métachromasie de ces granulations. |
La présence de ces corpuscules métachromatiques ne persiste pas au delà du troisième où quatrième jour certains bacilles conservent assez longtemps leurs granulations.
Les témoins ensemencés sur Costa glucosé demeurent dépourvus de corpuscules métachromatiques.
b) Milieu Costa lécithiné à 3 0/0 :
(4) CosTA, TROISIER et DAUVERGNE, loc. ci.
UD
Trois variétés de bacilles pseudo-dipthériques sont ensemencées sur ces milieux.
En vingt-quatre heures : cultures abondantes; au frottis, on voit les dimensions des bacilles légèrement accrues (1). Granulations très abondantes, bipolaires, aussi nettes que celles des diphtériques vrais. En coloration vitale, métachromasie positive.
Ces granulations persistent plus longtemps sur ces milieux.
Toutes ces observations paraissent concorder pour faire admettre que la présence de substances phosphorées comme les nucléo-protéides ou les lipoïdes, tels que la lécithine, détermine l'apparition de corpuscules métachromatiques chez des bacilles qui en étaient. dépourvus.
3° Cultures sur sérum de cobayes
Nous avons eu l'occasion de remarquer qu'un
C. pseudo-diphteriticum sans granulations donnait des formes granuleuses quand on le cultivait sur du sérum coagulé de cobaye. Ce sérum contenait encore beaucoup d'hématies; on pouvait supposer qu'elles étaient la cause du phénomène, \ En obtenant du sérum pur de cobaye, et en le faisant coaguler dans de petits tubes, il nous a été possible d’avoir à chaque ensemencement des résultats positifs (nombreuses granulations).
(1) Cf. pl. I, n° 2, une reproduction d'une préparation.
SCT
4° Cultures simultanées sur un même milieu
Nous avons tenté de faire, sur un même milieu, l’ensemencement de deux races de bacilles pseudo-diphtériques pour essayer de fixer un caractère transitoire.
1° Ensemencements simultanés sur milieu Costa glucosé de deux bacilles pseudo-diphtériques sans granulations, et provenant de cultures sur sérum normal:
Au bout de vingt-quatre heures : granulations très rares. — Bacilles de 3 à 4 plus grands que les bacilles des souches respectives. Cytoplasme très chromophile, présentant la striation zébrée aussi nettement que certains diphtériques vrais. Certains grands éléments paraissent formés par l’accolement bout à bout de deux bacilles et figurent un losange allongé, strié transversalement. Ces caractères n’ont pas persisté.
2° Repiquages simultanés sur milieu Costa glucosé, de deux bacilles pseudo-diphtériques provenant de cultures sur milieu Costa phosphoré, mais après raréfaction ou disparition presque totale des granulations.
En vingt-quatre heures : bacilles moyens, avec des granulations très abondantes.
Ces corpuscules métachromatiques deviennent rapidement très rares.
3° Repiquages simultanés sur milieu Costa phosphoré de bacilles pseudo devenus très granuleux.
En vingt-quatre heures : culture abondante; bacilles moyens, avec corpuscules métachromatiques persistants.
Repiqués sur sérum normal, les bacilles perdent rapidement leurs granulations.
La présence des corpuscules métachromatiques chez les Corynébactéries semble donc liée à des influences trophiques; on peut les faire apparaître expérimentalement au moyen de substances phosphorées incorporées aux milieux de cultures, particulièrement aux milieux solides. |
Ces granulations ne paraissent pas devoir être considérées comme un caractère spécifique absolu, à cause de l’inconstance de leur présence et de leur labilité.
Si, au cours du développement des cultures ou dans certaines conditions, elles semblent disparaître, il serait vraisemblable d'interpréter le phértomène comme Reichenow. Des bacilles très granuleux seraient donc susceptibles d’une multiplication très intense, mais cette division cellulaire entraînerait la raréfaction de leur granulation par suite de l’utilisation de ces matières de réserves.
