CHAPITRE TI
EYTOLOGIE EXPERIMENTALE
CONDITIONS FAVORISANT L'APPARITION DES CORPUSCULES MÉTACHROMATIQUES: A) VARIATIONS DES FACTEURS PHYSIQUES; B) VARIATIONS DES CONDITIONS BIOLOGI- QUES ET TROPHIQUES.
Si l’absence de granulations dans des bacilles isolés de la région amygdalienne d’un malade, jointe aux autres caractères bactériologiques récemment ajoutés par divers auteurs (1), permet le diagnostic clinique différentiel des bacilles diphtériques vrais et des bacilles pseudo-diphtériques, la possibilité de voir apparaître les corpuscules métachromatiques chez Corynebacterium pseudo-diphteriticum met en relief la variabilité de la morphologie bactérienne.
L'assimilation des granulations des Corynébactéries aux corpuscules métachromatiques des autres microorganismes permet de mieux comprendre leur genèse :
Les hypothèses de Meyer, les analyses de Kossel, les observations de Guilliermond, ont autorisé à penser que ces formations cytoplasmiques chez les levures,
(4) MARTIN et LOISEAU, COSTA, TROISIER, DAUVERGNE, DEBRÉ el LETULLE, AVIRAGNET, ete., loc. cit.
THÈSE 3
étaient composées surtout de nueléo-protéidés, subslances complexes riches en phosphore, comme tendaient du reste à le faire supposer les affinités pour les colorants (Giemsa).
Reichenow, dans l'intéressante étude sur Hæmatococcus pluvialis avait montré qu'en eultivant cette algue dans un milieu riche en azote, mais dépourvu de phosphore, on assistait à la disparition complète des corpuseules métachromatiques.
Par contre, Lesieur (1) avait conelu, à la suite de ses expériences : «nous avons vu des bacilles diphtériques perdre leurs granulations, jamais nous n'en avons pu faire apparaître chez ceux qui en sont dépourvus ».
Neisser avait noté la nécessité de la culture sur sérum coagulé pour l'obtention des granulations abondantes des bacilles diphtériques et Lesieur, à son tour, remarque encore que les cultures en bouillon et sur agar ne prètent guère à la constatation du phénomène.
De plus, les granulations semblent disparaître peu à peu à mesure que l'âge de la culture s'avance.
Enfin, certaines espèces de Corynébactéries (type Hoffmann) se signalent par l'inconstance ou même l'absence de ce caractère.
L'irrégularité de ce phénomène, sans doute conditionné par des causes mal connues, nous a poussé à chercher à le déterminer en faisant varier quelquesuns des facteurs complexes présidant au développement des colonies bactériennes.
Nous nous occuperons des influences physiques, bio-
(1) LESIEUR, in thèse : Les bacilles pseudo-diphtériques, p. 98.
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À se : . . . 3 .
lôgiques, chimiques ou trophiques vis-à-vis de nombreux échantillons des trois espèces de Corynébactéries diphtériques.
A) Variations des conditions physiques Pression, concentration saline et température
On sait que la tension gazeuse influe sur la morphologie des organismes inférieurs et sur la végétabilité des microbes.
S. Arloing et Neumann (1) avaient montré, en 1898, que des cultures de bacilles diphtériques soumises à la pression de huit atmosphères sont retardées dans leur évolution et ont un aspect plus jeune que les témoins développés à l’air libre.
Cependant, le degré de concentration saline semblait influencer davantage la morphologie et, en tous cas, on pouvait penser que la pression agissait surtout en facilitant la dissolution des gaz dans le liquide des cultures, ces gaz ayant alors une influence chimique.
On rapprochait de ce fait que certains auteurs (2) considéraient les granulations comme des substances oxydables, qu'en coloration vitale, la métachromasie de ces formations semble particulièrement intense sur les bords de la préparation, zônes plus riches en oxygène.
D'autre part, nous avons observé que les bacilles gra-
(4) NEUMANN. Influence de la tension gazeuse sur les microbes et en particulier sur les b. dipht. Thèse de Lyon, 1898. (2) Drerrion et LIEBERMEISTER, Centralblalt f. Bakt., 1902,
Evo
nuleux sont fréquents sur les voiles et rares dans les
dépôts des cultures sur milieux liquides.
1° Pression et concentration saline
Nous avons donc soumis à la pression de trois atmosphères, pendant plusieurs jours, trois espèces de Corynébactéries \ Cultures liquides : bouillons salés à 9 0/00 et bouillons non salés.
Milieux solides : sérum de cheval normal coagulé et milieux Costa.
Des témoins sur milieux semblables sont mis à l'air libre.
Au bout de vingt-quatre heures : aucune différence avec les cultures-témoins, en ce qui concerne les gra-
nulations.
Au bout de quatre et huit jours : mêmes résultats. Particularités. — Aucun développement dans les
milieux non salés; la fermentation des sucres a été légèrement retardée pour les cultures soumises à la
pression (1).
2° Concentration saline et température
Milieux liquides et solides à divers titres de concentration saline, soumis à des températures différentes, variant entre 37° et 40° :
4° À 39-40, bouillons non salés : commencement de culture en dépôt.
(4) Thèse Neumann, Lyon 1898, Loc. citat.
— P. REGNARD. Nole sur les conditions de la vie dans les profondeurs des mers. (Wémoire à la Société de Biologie, 1881.)
