ART. — 9. RECHERCHES SUR LA NATURE DU TANNIN DES FEUILLES: D'IF

Nous avons cherché à reconnaître quelle était la nature du tannin renfermé dans les feuilles de l’'If, par des réactions microchimiques. Voici quelle est l’action des réactifs ordinaires des tannins sur des feuilles fraîches :

A. Acide osmique à 1 o/o ou 2 0/0. — Il colore en noir intense la substance des vacuoles à tannins. La réduction qui se fait au niveau de l’appareil vacuolaire est accompagnée d'une bonne fixation de la forme réelle du vacuome, ce qui rend ce réactif précieux. On constate que le tannin peut apparaître dans le vacuome, alors qu'il est encore au stade filamenteux et l’acide osmique fixe ces réseaux vacuolaires dans tous leurs détails en les colorant en noir : par contre, les cellules

(1) Cette absence de tannin dans les cellules stomatiques paraît être assez générale dans le cas d’un épiderme tannifère (feuilles de Conifères, plantules).

embryonnaires ou les colorations vitales décèlent des réseaux analogues, ne se colorent pas par l'acide osmique, et leur vacuome reste invisible après fixation. La métachromatine que contient ce dernier ne réduit donc pas l'acide osmique ou, du moins, elle le réduit aussi faiblement que le cytoplasme ou le noyau, ce qui ne permet pas de la distinguer dences

derniers.

B. Bichromate de K à 3 0/0. — Ce réactif colore en brun la substance vacuolaire des cellules tannifères ; il donne une très bonne localisation de ces cellules, mais il fixe moins bien que l'acide osmique les éléments délicats du vacuome ; les filaments et les réseaux sont altérés et transformés en petites gouttelettes qui s’isolent. On peut cependant se servir de ce réactif pour obtenir une fixation en même temps qu une coloration parfaite des formes fragiles du système vacuolaire en l’'employant, mélangé à du formol à 40 0/0, dans les proportions indiquées pour le fixateur IV de Regaud (1).

C. Sels de fer. — Le chlorure ferrique colore en bleu noir la substance vacuolaire des cellules tannifères, mais ce réaclif déforme la cellule, ce qui entraîne une localisation du tannin très imprécise.

Le sulfate de fer a donné de meilleurs résultats.

D. Réactif de Braemer (Acélotungstate de Na). — Le

réaclif est mis en contact pendant quatre heures avec les jeunes feuilles fraiches.

I se produit une coloration jaune fauve des vacuoles sécré-

trices, mais il n’y à aucune coloration dans les cellules embryonnaires.

E. Réactif de Courtonne (Acétate neutre de Pb.). — Donne un précipité jaune fauve, un peu orangé, dans les cellules à tannin. Ge réactif fixe bien les cellules qui ne sont pas désor-

(1) Bichromate de K à 3 0/0, 3 volumes; formol à 4o 0/0, 1 volume,

ganisées. Ce résullat est probablement dû à l'acide acétique qui sert à neutraliser et qui reste en excès.

F. Hypochlorite de soude. — Ce réactif, au moment de sa pénétration, et avant qu'il n'ait eu le temps de détruire la cellule, communique une coloration orangée immédiate et très nette aux vacuoles des cellules tannifères.

G. Eau iodo iodurée. — Il se fait une coloration orangée des cellules à tannins et c'est le suc cellulaire des vacuoles qui prend cette coloration (1).

Dans les cellules cylindriques du tissu en palissade, il n’y a pas d'amidon : si l'emploi de l’eau iodée n'a pas été prolongé, les plastes restent verts tandis que les vacuoles à tannins prennent une teinte orangée.

Cette coloration remarquable peut ne pas être due aux tannins, mais provenir d'autres substances du suc cellulaire présentes (Alcaloïdes, Albuminoïdes) ; une solution alcoolique d'iode ne donne pas une différenciation analogue.

H. Essais de cyanure de K. — Emploi d'une solulion concentrée. — Au bout d’une heure, il n’y a aucune coloration des cellules à tannin ; après 24 heures, pas davantage de coloration, il faut en conclure qu'il n’y a pas d'acide gallique dans les vacuoles.

I. Essai des réactifs des tannins après l’action des fixateurs. — L'alcool employé comme fixateur des feuiiles dissout rapidement le tannin. Les vacuoles ne donnent plus en effet les réactions caractéristiques, ni avec l'acide osmique, ni avec le bichromate.

Après fixation au formol à 4o o/o, tous les réactifs des tannins peuvent être employés avec succès: le formol conserve donc très bien le tannin et le rend d’ailleurs insoluble, car les feuilles qui ont été ainsi fixées peuvent être ensuite conservées sans inconvénient dans l'alcool. Sur des feuilles ainsi fixées

et conservées, on pourra donc plus tard localiser le tannin,

(1) Il s’agit d’une coloration du suc vacuolaire sans précipitation.