TABLEAU IX

Action du mélange : Toxine + Sérum de chevaux indemnes dascarides ayant donné une réduction oculaire lors de l’instillation de la toxine pure.

NATURE DU LIQUIDE NOMBRE | RÉACTION | RÉACTION INTILLÉ DE CHEYAUX POSITIVE NÉGATIVE.

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Pour nous assurer d’une façon certaine que ces différences d'action des mélanges toxine-sérum et

toxine-eau physiologique tenaient bien à l’action antitoxique du sérum, mous avons demandé à MM. Weinberg.et Séguin de bien vouloir effectuer des recherches histologiques sur les lésions oculaires observées.

Voici le résumé de ces recherches. Lorsqu'on examine au microscope des coupes histologiques de ces paupières, on retrouve à peu près les mêmes lésions, aussi bien du côté qui a reçu la toxine-sérum que du côté témoin qui a reçu la toxine-eau physiologique. Pour trouver une différenc®, il ne faut retenir que les

chevaux qui ont été éprouvés avec une toxine très

diluée, et ne choisir que les cas où la toxine-eau phy-

siologique seule a provoqué des phénomènies oculaires faibles. | |

Dans ces conditions, on constate alors que la ioxine-eau physiologique a provoqué un œdème léger de la paupière et une éosinophilie marquée, tandis que du côté opposé, c’est-à-dire au niveau de la paupière qui a reçu le mélange toxine-sérum, les lésions sont nulles. Ces faits ne sont pas isolés, ils ont été observés plusieurs fois dans les mêmes conditions d’expérimentation, Ils nous permettent donc d’affirmer que le sérum des chevaux porteurs d’ascarides renferme des anticorps capables non seulement ide donner lieu au phénomène de fixation du complémet, mais aussi de neutraliser in vitro une certaine quantité de toxine ascaridienne.

Cette étude histologique a montré aussi que, dans

certains cas, la réaction oculaire, d'apparence néga-

tive, doit être classée comme positive, car on peut très bien ne pas constater d’œdème apparent, alors que le microscope montre une éosinophilie aussi marquée que dans les cas à réaction macroscopique positive. Cette dissociation des phénomènes réactionnels montre bien que parmi les substances actives du liquide péri-entérique, les unes agissent directement sur les leucocytes, et ien particulier sur les éosinophiles, les autres sur les nerfs vaso-moteurs.

Enfin l'examen des coupes des paupières a également mis en évidence un fait intéressant qui nous permet de comprendre pourquoi, dans certains cas, les porteurs d’un grand nombre d’ascarides sont sensibles à l’action du liquide péri-entérique. Il a été, en effet, constaté que les sérums de certains chevaux porteurs d’un grand nombre d’ascarides très jeunes provoquent des lésions microscopiques de la paupière, alors que le sérum de cheval sain ne donne jamais lieu à aucun phénomène oculaire. Nous ne pouvons expliquer ce fait que par le passage simultané dans l'organisme d’une grande quantité de toxine, dont une partie seulement serait neutralisée par le sérum, et dont l’autre resterait libre dans le courant circulatoire.

Avec Rübinstein, nous avons recherché, par la méthode d’Abderhalden, si le sérum des animaux porteurs d’ascarides renfermait également des ferments spécifiques vis à vis des substances albuminoïdes des toxines vermineuses. Nous avons opéré d’après la technique suivante :

« Le liquide péri-entérique d’ascaride est porté à l’ébullition ; la substance coagulée est jetée sur filtre et lavée à l’eau courante pendant 30 minutes. L'albumine lavée est bouillie pendant cinq minutes avec cinq fois son volume d’eau. Cette dernière opération est répétée plusieurs fois, jusqu’à ce que 5 centimètres cubes de liquide, filtré ne donnent plus de teinte bleue avec un centimètre cube d’une solution aqueuse de ninhydrine à 1 pour 100. L’albumine est conservée dans de l’eau stérilisée, entre une couche de chloroforme et une couche de toluol. Avant de s’en servir, il est nécessaire de vérifier si cette albumine préparée est utilisable pour la réaction (bouillir l’albumine et voir si l’eau d’ébullition après filtration donne la teinte bleue avec la ninhydrine).

Les sérums ont été utilisés le jour même où le sang a été recueilli ; on ne s’est servi que de sérums absolument exempts d’hémoglobine.

Nous nous sommes servis de sacs- à dialyse vérifiés d’une part, par une solution de peptone de soie à 1 pour 100, et d’autre part, par une solution albumineuse à 5-pour 100. »

Pratique de l'expérience. — On verse dans un sac à dialyse deux centimètres cubes de sérum de cheval et on y ajoute un bloc d’albumine de 0,5 à 1 gramme. Le sac de contrôle ne reçoit que 2 centimètres cubes de sérum. On dialyse contre 20 centimètres cubes d’eau distillée stérile. L’eau distillée est protégée contre la souillure microbienne par une couche de chloroforme et de toluol : on verse également dans les sacs à dyalise une couche de toluol, On laisse l’appareil à dialyse pendant 20 heures à l’étuve à 37°. Au bout de ce temps, on prélève 10 centimètres cubes de dialysat qu’on fait bouillir avec 0,2 centimètre cube d’une solution de nin-

hydrine à 1 pour 100 pendant une minute. On commence à faire bouillir à la grande flamme de Bunsen, puis on continue pendant une minute à la veilleuse. On laisse refroidir, et on note la coloration du liquide au bout de trente minutes. Quelquefois on obtient immédiatement après le chauffage une teinte brune, à laquelle succède: la coloration bleue caractéristique de la réaction. Parfois aussi le tube garde une coloration mauve non spécifique. »

Nous avons étudié par cette méthode 31 sérums provenant de chevaux tués à l’abattoir. La plupart de ces sérums ont été recueillis au moment même de l’abatage; à l’autopsie des chevaux on notait tous les parasites qui se trouvaient dans leur appareil digestif.

Sur 20 sérums provenant de chevaux infestés par les ascarides, 18 ont donné une réaction d’Abder-halden franchement positive. Dieux fois le sérum seul a donné aussi une réaction positive, fait qui ne nous surprend pas, car Weinberg et Séguin ont montré que le sérum de chevaux porteurs d’un grand nombre &'ascarides peut renfermer une certaine quantité de toxine ascaridienne. Or, le liquide péri-entérique (riche en peptones) donne à lui seul la réaction de la ninhydrine. y

De 11 sérums témoins, provenant de chevaux infestés par d’autres parasites, 8 ont donné une réaction négative, les 3 autres ont. donné des résultats erronés.

De ces expériences, il résulte que le sérum de che-

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vaux infestés par les ascarides renferment des ferments capables d'attaquer in vitro les substances albuminoïdes du liquide péri-entérique du parasite hébergé.

Ces faits prouvent une fois de plus que les sujets porteurs d’helminthes résorbent leur toxine vermineuse et élaborent des substances spécifiques vis à vis de l’antigène.

Avant de terminer cette question de la toxine ascaridienne, nous devons mentionner un travail paru récemment en Amérique (1924).

Ransom, Harrison et Couch ont expérimenté avec le liquide péri-entérique de l’ascaride du porc.

Après avoir rappelé les travaux dé Goldschmidt et de Weinberg concernant l’action des ascarides sur les personnes qui les manipulent et ceux de Ransom et Foster sur l’action sur les personnes du liquide péri-

‘ entérique de l’ascaride du porc (application de liquide

sur une scarification fraîche), ces auteurs ont essayé l’action de l'extrait aqueux de ce même ascaride. Ils ent constaté que certaines personnes étaient sensibles à l’action de cet extrait. À la suite d’une application äe ce liquide sur une plaie superficielle, il se produit une réaction cutanée se manifestant par de l’œdèmre, de l'urticaire et dans quelques cas de symptômes d'asthme. Sur 20 personnes ainsi traitées, 4 présentèrent une réaction très nette.

A la suite de ces constatations, Ransom, Harrison

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et Couch ont recherché si ces personnes sensibles à l’action de l'extrait aqueux d’ascaris lumbricoïdes étaient égalenrent sensibles à l’action des extraits de viande provenant de pores infestés par ces parasites. Les résultaits de leurs expériences furent négatifs; ils “en conclurent que la viande provenant de porcs. infestés id’ascarides ne renferme pas la substance qui produit une réaction cutanée chez les personnes sensibles. rte

Ils ont cherché vainement à isoler cette ou ces substances et la question de savoir si c’est une protéine naturelle n’a pas été résolue. Avec cet extrait aqueux, ils ont reproduit chez le porc et le mouton des réactions oculaires similaires à celles que nous

avons obtenues chiez le cheval.

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ANAPHYLAXIE

Au cours de nos précédentes expériences, nous avons relaté qu'un cheval ayant reçu en instillation dans l'œil 1 centimètre cube de liquide péri-entérique,

avait succombé au bout de trente heures environ. Get

animal avait d’abord présenté des accidents généraux très violents : dyspnée intense, sueurs profuses, diarrhée, abattement ; mais au bout de deux heures il

paraissait complètement remis. Sa mort étant sur-

venue assez longtemps après l'instillation, nous n'avions pas cru pouvoir l’attribuer à l’action du liquide péri-entérique.

Cependant, nous nous sommes demandé si tous ces symptômes généraux graves (dyspnée, diarrhée, sueurs, etc.), observés chez un certain nombre de nos chevaux ne relevaient pas de l’anaphylaxie. IL se pourrait, en effet, que ces chevaux eussent été sensibilisés par les produits toxiques d'un ascaride qui n'aurait fait qu’un court séjour dans leur intestin grêle.

Pour vérifier cette hypothèse, nous avons saigné des chevaux avant l'instillation de liquide péri-

entérique, et nous avons retenu pour nos expériences les sérums de deux chevaux qui ont présenté une réaction oculaire et une diarrhée intense à l’épreuve de la toxine. Les essais d’anaphylaxie in vitro, d’après la méthode de Ch. Richet, nous ont donné des résultats négatifs. Nous avons eu le même insuccès avec des cobayes préparés par injection intra-péritonéale de sérum de ces chevaux et éprouvés au bout de quarante-huit heures avec un liquide péri-entérique très actif. |

Mais deux nouveaux accidents mortels, observés chez des chevaux à I suite de l’instillation de toxine ascaridienne, sont venus renforcer notre première hypothèse concernant l’anaphylaxie.

Un cheval très vigoureux et paraissant en bon état de santé, reçoit dans l'œil 1 centimètre cube de liquide péri-entérique dilué au quart; au bout de dix minutes on constate la réaction oculaire caractéristique, puis cinq minutes après, le cheval s'affaisse brusquement et meurt après s'être débattu quelques instants.

Un autre cheval, du même lot, ayant reçu la même dose de liquide ascaridien, présente de l'œdème des paupières et des synuptômes généraux très graves dyspnée, diarrhée, sueurs profuses. Le sujet tombe sur le sol et fait, en vain, de violents efforts pour se relever; il se soulève très bien sur les membres antérieurs, mais les deux membres postérieurs restent inertes : il était manifestement atteint de paralysie du