TECHNIQUE

Pour fixer nos pièces nous avons fait usage des trois fixateurs suivants : |

Liquide de Boun :

Solution aqueuse saturée d'acide picrique.....,.. 15 vol. FOPROUQUTE 0. en Neue ere see ei .. 20 — Acide acotique glacial... eea.s 2 5 —

fixation 8 à 24 heures.

Liquide de TELLYESNICZKI :

Bichromate de potasse (solution aqueuse à 3 °/,)... 100 vol. AéPUE ACONIQU-au nl ee s sos ed eee Re 5 —

fixation pendant vingt-quatre heures. Lavage à l'eau courante durant.le même laps de temps. Alcools.

op

Liquide de ZENKER :

Bichromate de potassium (solution à 3 °/.)... 95 vol.

fixation pendant vingt-quatre heures. Lavage à l'eau courante pendant vingt-quatre heures. Alcool 1odé. Alcools.

‘Les liquides de Bouin, et de Zenker nous ont donné surtout de bons résultats pour l'emploi de l’'hématoxyline au fer. Le liquide de Tellyesniczki pour l'emploi du procédé de MaLLoRy.

Après avoir laissé séjourner dans leur liquide fixateur les yeux entiers, nous avons eu soin, en les plaçant dans les différents alcools, d'enlever au moyen d’un coup de rasoir un segment plus ou moins grand de l'organe.

Par ce moyen, la déshydratation s’effectuait plus aisément. Le corps vitré, très riche en eau, se rétractait lentement, en cédant son eau aux alcools. Cette rétraction : progressive nentrainait pas un décollement de la rétine et de la choroïde, comme cela arrive souvent quand on déshydrate un œil fermé. Les yeux de nos oiseaux ont été inclus dans la celloïdine et dans la paraffine.

Coloralions. — Pour colorer nos coupes, nous avons fait appel à plusieurs procédés de coloration.

D'abord aux procédés ordinaires (hématéine, éosine, hématéine van Gieson), ensuite à des procédés spéciaux.

1° Procédé de MarLory, qui teint les fibres zonulaires en bleu (coloration de 10 minutes à la fuchsine acide avec une solution à 0 gr. 10 p. 100), les noyaux sont colorés

Pl — en rouge, fixation dans une solution d'acide phosphotungstique à 1 p. 100. Lavage à l'eau, enfin coloration avec liquide de Mallory, 1 minute (mélange de bleu d’aniline 0 gr. 5, orange, G 2 gr., acide oxalique, 2 gr., eau 100. Lavage et décoloration dans alc. à 80).

2° Procédé de l'hématoxyline au fer de HEINDENHAIN (mordançage durant 24 heures dans alun de fer à 10 p. 100 d'eau). Lavage à l'eau, puis séjour durant vingtquatre heures dans solution d'hématoxyline. (IV de RE- GAUD.)

Dépigmentalion. — Comme la question des rapports des fibres zonulaires avec l’épithélium pigmentaire n’est pas encore complètement élucidée et comme il est très difficile de faire des observations microscopiques sur les cellules pigmentaires, nous avons eu recours à l'emploi des dépigmentants d'usage en histologie et spécialement du procédé indiqué récemment par Mawas à la Société de Biologie, car les autres procédés ont l’Inconvénient d’altérer profondément les éléments anatomiques.

Aussi avons-nous employé l'acide chromique, qui nous a donné de bons résultats. En solution dans l'eau, à la dose de ! ou 2 p. 100, l'acide chromique est un puissant décolorant. Nos coupes à la celloïdine ont séjourné durant vingt-quatre heures dans cette solution. Nos coupes à la paraffine, beaucoup plus minces, 10 ou 12 heures environ.

L'acide chromique est un dépigmentant dont l'action est beaucoup plus rapide que celle de l'eau oxygénée. Celle-ci, en effet, n'agit que très lentement, au bout de plusieurs semaines et demande un renouvellement constant.

FOOT L'acide chromique est aussi d'un emploi plus simple que le permanganate de potasse, puisqu'il ne nécessite aucun traitement complémentaire pour la dissolution du sel réduit sur les coupes. Il ne décolle pas ces coupes comme c'esi la règle par les procédés au chlore et au permanganate.

Enfin, loin d'empêcher aucune coloration, il semble au contraire favoriser certaines d’entre elles (le procédé de Mallory, par exemple).