D JOUE
Pour l'interprétation des résultats, on utilise les échelles de Miquel pour la numération des germes, et de Vincent pour la numération du colibacille.
On identifie généralement les colonies microbiennes ainsi que les moisissures qui out poussé sur la gélatine et la gélose au moyen des techniques habituelles.
Dans les cas où l’on est amené à rechercher des espèces pathogènes hautement différenciées, tels que le bacille typhique et Les bacilles paratyphiques, les bacilles dysentériques, le vibrion cholérique, le bacille Proteus, le bacille pyocyanique, etc., on emploie alors les méthodes de laboratoire courantes pour l'isolement et l'identification de ces microbes.
$ 2. — Quelques analyses de puits artésiens.
Mes recherches portent sur des puits artésiens de Bordeaux et du bassin d'Arcachon. Il serait fastidieux de se livrer ici à une longue énumération. Je ne retiendrai que les puits dont les eaux m'ont paru offrir quelque intérêt.
Chacune de ces eaux peut être prise, en effet, comme type des différentes catégories que l’on trouve dans la région. |
Analyse des puits du bassin d'Arcachon.
Purrs A.
Ce puits est foré sur les bords du bassin d'Arcachon.
Les prélèvements ont été effectués Le 25 juin 1926, à 10 heures, au griffon et en deux autres points, d’ailleurs voisins, de la canalisation.
Profondeur du forage : 464 mètres.
Débit : 1.150 litres à la minute.
Température de l'eau au moment du prélèvement : 25 degrés.
Température ambiante : 19 degrés.
Les échantillons ont été transportés au laboratoire par auto-. mobile et l'analyse pratiquée aussitôt l’arrivée.
ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE.
Analyse quantitative. — Numéralion des colonies le quin= zième jour.
Nombre de colonies par centimètre cube pour les trois échantillons prélevés : 0, 10, 30.
Pas de colonies liquéfiantes. Quelques moisissures.
Anaïyse qualitative. — La recherche du colibacille et autres microbes pathogènes a été négative.
Parmi les microbes isolés, on note la présence de : Moisissures banales de l’air ; Cocci banaux; - Une levure chromogène ; Une bactérie chromogène.
Ces deux dernières espèces sont étudiées dans ce chapitre au & 4. x
Conclusion. — Cette eau doit être estimée eau très pure.
ANALYSE CHIMIQUE
Caractères physiques et organoleptiques :
Incolore, limpide, saveur spéciale non désagréable, odeur sulfhydrique à l'émergence, nulle après refroidissement (1).
Milligrammes par litre.
Réaction faiblement alcaline. —
A Ce LUE AS ONHS RE RRN R E RRRR e Te 84 Degré hydrotimétrique total..,............. LR 1205 Degré hydrotimétrique permanent....... .......... de 6° Extrait sec à 100 degrés...... M nr ae nette 190 Matléreseninérales mienne meme RSR ERS 138 Matières volatiles au rouge................. Re 52 Chlorure en NACRE es Res ei. RE ELSS 104 Solar eee SOL urine Ten Êb 8 CFO CARTE) Ver SE ONE HART AE 19 MAO SE En MO) re coment eee he dose Se 12 OR SR ON RSR Poe I PT OUI TS ATESS
SAC A 2 te ee ae nl Traces.
AlumIner rer. TR ne Rte Jar ete A Prat
(1) D'après le docteur Llaguet, Bull, Acad. méd., novembre 1924,
SULÉULES RSR EE LL RENE Néant.
ATOLATES ER TEE RE TERRE ee ir eee PA LOULESS MES PT ANT AE RRGSEe RÉ TR : Absence. Ammoniaque ...... DR MR PA RD DL ES 0 0: tc OO = Matières ORCaNUeES SR ET CEE CE ADN T Traces infimes négligeables.
Purrs B.
Ce puits est foré à 104 mètres de profondeur dans le sable.
Le prélèvement a été effectué le 11 février 1927, à 10 heures, à la canalisation branchée sur le tube de forage. Cette canalisation est très courte, environ 0"50. L'eau s'écoule régulièrement. Le débit est faible, environ 8 litres à la minute.
Hauteur du jet au-dessus du sol : 150.
Température de l’eau au moment du prélèvement : 16 degrés.
Température ambiante : 10 degrés.
Les échantillons ont été transportés au laboratoire par chemin de fer et l'analyse pratiquée le jour même, à 18heures.
ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE.
Analyse quantitative. — Numération des germes le quinzième jour.
Nombre de colonies par centimètre cube : 0.
Pas de colonies liquéfiantes.
On note deux moisissures.
Analyse qualitative. — Pas de colibacille ni autres microbes pathogènes.
Les moisissures qüi ont poussé sur gélatine appartiennent aux genres : Penicillium et Aspergillus.
Conclusion. — Cette eau doit être estimée eau excessivement pure.
L'UTRE
ANALYSE CHIMIQUE
Ces résultats sont exprimés en milligrammes par litre d’eau :
RéSIAU A LTOMORTONS. RSR A - C A 146 Résidu au rouge ........ RE ds RTL UE 140 Matières volatiles au rouge............:...... 6 SOTATES RSR AL te ee ART ne Traces.
AÏCALA TE ÉRIC ee ES RAIN: 70 CHIOFHTeSCENENACGTE RER ni Nr ere 58,5 Matières organiques (milieu alcalin)........... 1,3 ANTO I ACER ER nn A dr nn ee 0 A ZOO ES MILLE U Xe R Re nee MN eo te se 0 DAMES Mate ne rent PAS AO Pts 0 Degré hYdrotimétrhiquetotals "te re 7,6 Degré hydrotimétrique permanent............ 6 HO Une ne lea in de tuners 0 Sn A ne ER NE 0 Conclusion. — L'échantillon soumis à l'analyse doit être
estimé une eau potable de très bonne qualité (1).
- Analyse d’un puits artésien à Bassens.
Purrs C.
Ce puits est foré dans une usine sur les bords de la Garonne, à Bassens, et l’eau est destinée à l'alimentation.
Le prélèvement a été effectué le 22 juin 1921, à 10 heures, au point où jaillit l’eau du forage.
L'émergence est protégée par une cabane fermée.
Profondeur du forage : 170 mètres.
Débit : 200 litres à la minute.
Température de l’eau au moment du prélèvement : 19 degrés.
Température ambiante : 22 degrés.
Les échantillons ont été transportés au laboratoire par automobile et l'analyse est pratiquée aussitôt. ;
(1) M. le professeur Dupouy a bien voulu me communiquer les trois dernières analyses chimiques indiquées dans ce chapitre. Je suis heureux de saisir l’occasion nouvelle qui m'est ainsi offerte de lui exprimer ma plus vive reconnaissance.
ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE.
Analyse quantitative. —Numération des colonies le quinzième jour.
Nombre de colonies par centimètre cube : 76.
Les colonies liquétiantes sont rares.
Quelques moisissures. |
Analyse qualitative. — La recherche du colibacille et autres microbes pathogènes est négative.
Les colonies qui ont poussé sur gélatine sont représentées par des bacilles saprophytes de l'air.
Conclusion. — Cette eau, très pauvre en bactéries et ne renfermant pas de colibacille ni autres microbes pathogènes, peut être estimée eau très pure.
ANALYSE CHIMIQUE
Ces résultats sont exprimés en milligrammes par litre d’eau :
Résidu à 410-déprés. Re RTE eee 372 RÉSIdUAUMOUTE EEE TEE REA Pos PE 6 el ol Matières volatiles au POULE SANTE SH O 56 SULPATOS SE NN NS Rent ee Re EAN HA races.
Alcalinité (en CoCa)....... Re de DOTE 230 Chlerures fén NaGl ser Re es 58 Matières organiques (milieu alcalin)........... EE Matières organiques (milieu acide)........... à 0,12
arnMOMALAL EST TR ES 0 AZOTES IT EURE NE E LASER 0
TA TIQUER Ta SE RER PE En 0 Décréhvaroumeétniquento talent 22,9 Degré hydrotimétrique permanent ........ ee 12,8
Conclusion. — Considéré au point de vue chimique, l'échan-
tillon analysé possède les caractères d’une eau potable de bonne qualité.
ES
Analyse d'un puits artésien à Bordeaux à (Rive droite de la Garonne, quai de la Souys).
Purrs D.
Il s'agit d'un puits artésien, foré sur les bords de la Garonne, dans une usine de notre ville. Cette eau présente des caractères bien particuliers tant au point de vue chimique qu’au point de vue bactériologique.
Le puits a une profondeur de 226 mètres: il est tubé sur la plus grande partie de son trajet; l'eau vient sourdre au fond d'un puisard maçonné, protégé par des panneaux de bois. Son débit est de 75 mètres cubes à l'heure. La température de l’eau, au moment de la prise de l'échantillon, était de 22 degrés, la température ambiante ne dépassant pas 10 degrés. À l’ouverture des panneaux, on note une légère odeur sulfurée. L'eau renferme des dépôts de couleur ocracée; des flocons flottent à la surface.
ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE.
Analyse quantitative. — Numération des colonies le dixième jour (liquéfaction de la gélatine par les moisissures).
Nombre de colonies par centimètre cube : 500.
Moisissures nombreuses.
Analyse qualitative. — Pas de colibacille ni autres bactéries pathogènes.
Examen du dépôt. — Algues d’eau douce parmi lesquelles
dominent de nombreux filaments ondulés (Cladothrix). Conclusion. — Cette eau peut être estimée eau pure.
Parmi les bactéries isolées au cours de la recherche du colibacille, j'ai trouvé un cocco-bacille qui m'a paru intéressant par ses caractères morphologiques et par ses propriétés biologiques. Ce microbe sera étudié au K 3.
CNY
ANALYSE CHIMIQUE
Ces résultats sont exprimés en milligrammes par litre d’eau.
Résilum 10 degrés Re PURES PRE RESTES ‘10142 RÉSIAUSAUMOUTE ART ESPRIT 974 Matières volatiles au rouge....... .......... : 38 SINCe res OS EE AMEN EE do : 19,6 CHAUSSEE ENVIE 161,28 MAS ES te MERE eee Fier RCE tone 69 SuLidtes en SORA Er Re tree SE 302 GhlorureSencNaCi rene Enr SANTE RTE 251 Alcalinité en GO CARE MERE Eee RUE 205 Matières organiques en milieu alcalin......... 1,3 Matières organiques en milieu acide.......... 41,5 AO MONIAUE PER MER CC Ce Traces.
A 7 le AR CANTIET TES CR SRE NP AT Eee te 0 NNNATES ee ERREUR PAU EN ETeT 0 Degré hydrotimétrique total.................. 5% Degré hydrotimétrique permanent............ 36 Fer ER Etre le Ne OL DE Traces.
1 SR ER SE CO Boire Sense MD ONE Néant.
Conclusion. -— Au point de vue chimique, cette eau, par suite de son degré hydrotimétrique élevé et de La quantité de sulfates, doit être considérée comme étant de qualité médiocre.
Cette eau, qui présentait le double caractère d’être sulfurée et très riche en sulfate de chaux, avait attiré mon attention. Ces analyses ont été le point de départ de mes recherches systématiques sur la flore microbienne des eaux artésiennes.
$ 3. — Flore microbienne spéciale des eaux artésiennes.
La flore microbienne des eaux artésiennes, relativement pauvre, comme il convient pour des eaux profondes, par conséquent peu sujettes aux contaminations superficielles, offre un champ d'investigation intéressant pour l'étude des espèces qui végètent au sein de l’eau.
En étudiant cette flore dans la région bordelaise, j'ai eu l'occasion d'isoler quelques espèces nouvelles que je vais décrire maintenant.
Les microbes que j'ai isolés sont tous des saprophytes vulgaires. Quelques auteurs ont trouvé dans les eaux artésiennes des espèces pathogènes, telles que le staphylocoque ; ils n’ont pas, d’ailleurs, prêté d'importance à la présence de ce dernier dans l’eau et, en particulier, ils n'ont pas recherché de quelles variétés il s'agissait. Je rappellerai, à ce sujet, mes travaux antérieurs concernant la relativité des caractères sur lesquels on se base pour établir ces variétés.
La flore microbienne des eaux artésiennes contient des bactéries, des moisissures et des levures. L'une de ces dernières a spécialement attiré mon attention en raison de ses propriétés chromogènes. Or la trouvera décrite à la suite des espèces microbiennes étudiées dans ce même chapitre.
PREMIÈRE Espèce : Microcoque.
J'examinerai successivement les caractères morphologiques, les caractères biologiques, le pouvoir pathogène et l’identification de ce microbe.
I. CaRACTÈRES MOoRPHOLOGIQUuES. — D'une façon générale, les caractères de cette bactérie sont assez uniformes et paraissent indépendants du milieu sur lequel on la cultive.
Cette bactérie se présente sous l'aspect d’un diplococcobacille. Chaque élément a la forme d'un ovoïde mesurant 01 X 0 4. Ces cocco-bacilles se disposent bout à bout, deux par deux, ou en petites chaïnettes courtes de quatre à six éléments ou parfois se groupent en amas. Les chaînettes paraissent prédominer en milieu liquide.
Il se colore bien par les couleurs d’aniline usuelles. 77 prend fortement le Gram et présente une grande résistance à la décoloration par l’alcool-acétone. Il ne présente pas de capsule ni de spores.
ER Gr
IT. CaRACTÈRES BIOLOGIQUES. — Voici les principaux caractères de ce microbe :
a) Motilité. — Cette bactérie est immobile.
b) Cultures. — Elle se cultive très bien en aérobie et meurt en anaérobie après quarante-huit heures.
En bouillon peptoné, on note la présence d’un trouble au bout de vingt-quatre heures qui va s'accentuant. [l se forme un dépôt du cinquième au huitième jour; le bouillon reste trouble, sans voile à la surface.
Sur gélose, au bout de vingt-quatre heures, apparaît le long de la strie une nappe fine, translucide, à bords festonnés; on ne note pas de pigment. Après trois jours, la vitalité de fa bactérie diminue, son maximum est atteint vers quarante-huit heures de culture.
Sur gélatine en plaque, après quarante-huit heures, la culture est perceptible sous forme de taches rondes grisâtres atteignant 7 millimètres. La gélatine n’est pas liquéfiée.
Sur gélatine en piqûre, après vingt-quatre heures, la culture présente un aspect irisé le long’ de la strie; elle est abondante surtout en surface. Après trois jours, elle offre de petites aiguilles fines, courtes et rayonnantes, analogues à une racine avec ses radicelles. La culture s'étend en surface sans toutefois atteindre les parois du tube.
Sur pomme de terre, la culture est tardive; après quarantehuit heures, on remarque de petits points blancs qui vont s’accentuant et se présentent après trois jours sous forme de petites granulations blanches, sèches, nettement distinctes les unes des autres, formant parfois des îlots.
Sur carotte, la culture est tout à fait analogue à celle sur pomme de terre, mais elle est moins abondante.
Milieux spéciaux : Ce microcoque pousse bien sur bouillon phéniqué. Je l'ai isolé après trois passages (comme pour le coli). L'aspect du milieu rappelle celui sur bouillon ordinaire. 11 peut donc être isolé des autres bactéries de l’eau comme le colibacille.
Il fait fermenter le lactose. En bouillon lactosé tournesolé, en
Et —
vingt-quatre heures, la décoloration se produit; après quarantehuit heures, le milieu vire au rouge; après trois jours, on note un dépôt floconneux abondant rouge carmin; le milieu liquide prend une coloration acajou.
Il ne coagule pas le lait.
Il ne forme pas d'indol. Ensemencé sur eau peptonée et bouillon peptoné après dix et quinze jours, les réactions de l'indol sont négatives.
IT. AGTION PATHOGÈNE. — [noculation au cobaye. À un cobaye pesant 450 grammes, on inocule dans le péritoine { ce. d’une émulsion dans le sérum physiologique de culture sur gélose de vingt-quatre heures.
L'animal présente vers Le dixième jour un faible amaigrissement, sans autres troubles pathologiques. L'inoculation est négative.
Inoculation à la souris. On injecte à la base de la queue 1/2 cc. de la même émulsion. L'expérience reste négative.
Ce microorganisme n’est pas pathogène.
IV. IDENTIFICATION DE ce microcoque. — Les bactéries du genre Micrococcus sont très nombreuses dans les eaux. Les espèces isolées ne sont pas toujours décrites d'une façon précise et complète. Il est donc difficile de les identifier.
La bactérie que je viens de décrire peut être rangée dans le groupe des Micrococcus saprophvtes, non chromogènes, ne liquéfiant pas la gélatine et prenant le Gram.
Elle parait voisine d’autres espèces qui appartiennent à la flore saprophytique de l’eau. Parmi ces espèces, citons : Micrococcus candidans, M. candidus, M. albicans, M. fervidosus, M. nacraceus, M. viticulosus.
Les deux premières sont des cocci qui par les caractères de certaines cultures (sur pomine de terre et sur gélatine notamment) rappellent un peu mon microcoque.
M. albicans a la forme de diplocoque à chaînettes; sa culture en points blancs sur gélatine ressemble à ce dernier, mais ce diplocoque ne prend pas le Gram.
