‹ Recherches spectrographiques sur l'absorption des rayons ultra-violets par les albuminoïdes, les protéides et leurs dérivésChapitre 39 sur 51 · SUR · texte numérisé non relu

SUR

Conclusions : Une solution d'oxyhémocyanine interposée en couche suffisamment mince absorbe les radiations ultra-violettes comprises entre les raies À 2927 A et 4 2628 À. En augmentant l'épaisseur, il apparaît une nouvelle bande qui s'étend de À 3640 A 71 282À (largeur moyenne).

Quelle est Ja signification de chacune de ces deux bandes ?

La bande la plus réfrangible coïncide avec celle que montrent toutes les substances albuminoïdes ; or, l'hémocyanine présente toutes les réactions de coloration des albuminoïdes, il est donc tout naturel qu'elle ait aussi en commun ce caractère spectral.

Quant à l'autre bande, elle semble caractéristique de l'oxyhémocyanine. Elle est probablement signalétique du groupement prosthétique cuprifère.

L'oxyhémocyanine, comme l'oxyhémoglobime, offre donc, dans la portion invisible du spectre, deux bandes d'absorption. Remarquons que, quand on examine, sous des épaisseurs croissantes, une solution d'oxyhémoglobine, Fapparition de la bande du groupement prosthétique (hématine) devance celle de la bande du groupement protéique (globine) : dans le cas

de l'oxvhémocvanine, c'est l'inverse que lon observe.

Grâce à la collaboration de M. Lapicque, j'ai pu tout récemment (septembre 1908) étudier aussi le spectre d'absorplion ultra-violet de l’oxyhémocyanine de poulpe {Octopus vulgaris).

Du sang de poulpe fut recueilli, sur Fanimal vivant, dans un flacon contenant un peu de fluorure de sodium pulvérisé (NaFT pur et neutre de Merck), au moyen d'une canule de verre introduite dans un tronc artériel. Au moment d'être soumis à l'examen spectrographique — 48 h. environ après avoir été recueilli —, cet échantillon de sang était dans un état de conservation parfaite (coloration d'un bleu vif. aucune odeur anormale): 11 y avait seulement, au fond du flacon, un léger précipité de fluorure de calcium et un dépôt de leucocvtes agglutinés (caillot plasmodial où syncytiuin) qu'on élimina par filtration. La réaction du sang était nettement alcaline au tournesol.

En couche de 0""92 d'épaisseur, ce sang laissait passer tout lultra-violet jusqu'à la raie À 294S A, où commencait une bande d'absorplion s'étendant jusqu'à la raie 2 2599 À : les rayons plus réfrangibles étaient transmis jusqu'à À 2502 À. En couche de 1"",8, l'extrême ultra-violet, à partir de à 3044 À était intercepté, ce qui entrainait la disparition de la bande d'absorption précédente : mais on constatait l'apparition d'une nouvelle bande d'absorption comprise entre les raies À 3573 À et 1 3345 À. Enfin, en couche de 2"m,9, cette dernière bande d'absorption s'étendait de 2 3640 À à 4 322 À, et les rates plus réfrangibles que À 3072 À étaient offusquées.

Jai examiné, de plus, le spectre d'absorption de loxry-

hémocyanine de poulpe recristallisée \, et Jai pu constater

! L'oxyhémocyanine de poulpe à été cristallisée au moyen de la

méthode de Hopkins, déjà utilisée dans le même but par Henze. La cristallisation est aisée el rapide, même dans le cas de l'emploi de sang addilionné de NaFl comme antiseptique, ce qui est intéressant à noter au point de vue pratique, Peu de temps après l'addition, au sang, de sulfate d'ammonium et d'acide acélique, on voit que Île précipité qui s'est formé présente, quand on l'agite dans la liqueur, l'aspeet de nuages à reflets chaloyants ; et, à un fort grossissement, on constate que ce

précipité est exelusivement constitué par de fines aiguilles cristallines,

no

que ce spectre est très analogue à celui que montre le sang de poulpe : dans un cas comme dans l'autre, on observe, en faisant croître l'épaisseur de la couche traversée par la lunière, l'apparition successive de deux bandes d'absorption avec des localisations respectives presque identiques ‘.

Ces recherches sur le spectre d'absorption ultra-violet de l'oxyhémocyanine de poulpe conduisent done à des résultats qui correspondent parfaitement bien à eeux obtenus avec loxyhémocyanine d'escargot, et cette concordance des résultats vient à l'appui des conclusions formulées précédem-

ment.

S 3. — Absorption des rayons ultra-violets par

une nucléine.

29. Spectres de la nucléine de ia levure de bière et de l'acide nucléique correspondant. __ Les nucléines résultent de la combinaison de certaines substances albuminoï-

Pour oblenir un produit de seconde cristallisation exempt de particules amorphes, il faut prendre de grandes précautions, ear il y a tendance à la formation de membranes superficielles solides (les conditions de production de ces membranes ont élé bien étudiées par Ramsden, dans le cas d'une solution d'ovalbumine).

Jai utilisé, pour l'examen spectrographique, une solution d'oxyhémocyauine recristallisée qui n'avait pas été dialysée, el qui contenait, par conséquent, une grande quantité de sulfate d'amimonium,

Des circonstances accidentelles ne n'ont pas permis d'étudier dans de meilleures conditions, ni aussi complètement qu'il eût élé désirable de le faire, le spectre d'absorption de cette oxyhémoeyanine cristallisée, Je crois devoir mentionner ici que loxyhémocyanine de poulpe recristallisée donne nettement — outre les réactions du biuret, xanthoprotéique et de Millon, déjà signalées par Henze — la réaction d'Adamkieviez (noyau tryplophanique).

Je relève simplement, sur ee spectrogramme de loxyhémocyanine de poulpe recristallisée, Ja délimitation de Ta bande «lburmninoïde, lorsque la largeur de cette bande est moindre que celle observée sur le spectrogramme du sang de poulpe : l'absorption porte alors sur les radiations comprises entre À 2927 À et 2628 7 À, la dernière raie

transmise étant À 244 A.

des avec les acides nucléiques. I v à une grande variété de nucléines à Ja formation desquelles prennent part des acides nucléiques très différents.

Je n'ai examiné qu'une seule nueléine: celle que Fon extrait de la levure de bière. Elle est d'un type assez complexe, et sa constitution est relativement bien connue.

[Il serait sans doute intéressant d'étudier les spectres des nucléines répondant à d'autres types.

a) Nucléine extraite de la levure de bière (de GRÜBLER). Donne nettement les réactions : du biuret, xanthoprotéique, de Millon et d'Adamkiewiez. Solution à 1 p. 3000 dans la soude N/500.

Fig, 92 — Nucléine de la levure de bière

EPAISSEUR POSE BANDE D'ABSORPTION DERNIERE RAI en min. en secondes À À I 3 2100 7) 36 2100 8 59 2159 | {2 2159 5 Lo) 2144 (h [S (2704—2446 2195 # DA (2704 —2446 2204 10 60 2728 —2419 2965 12 66 2540 —2405 2265 11 2 2749—9520 2965 1; al 2802—92315 2313 20) 00 sn | 2835

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