I. — Sajig des animaux supém.eujps (vertéhnés: rivipares

Presque tous les vert^élirés vivipares ont le' même genre de sang : leurs globules rouges sont biconcaves, non nucléés, et ne diffèrent d'un "animal à l'autre que par le volume, eicceptionnellement aussi par la forme, la plupart des vivipares ayant les hématies discoïdes et quelques-uns seulement {aucbenia, camelus} les ayant aplaties et ovalaires.

Chez tous ces animaux sans exception, à côté des éléments adultes, il en est de plus petits, destinés à les remplacer, et chez tous aussi les propriétés de ces éléments senties mêmes. Il n'est donc pas nécessaij-e d'étudier le sang de tous les vivipares ; il suffit de choisir un type et le meilleur, en même

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temps que le plus imporlanl et le plus commode, nous est fourni par le sang humain.

Pour faire une préparation de sang, on peut simplement déposer entre une lame et une lamelle de verre parfaitement dégraissées, propres, sèches, une gouttelette de sang s'étalant immédiatement en lame mince. Si l'on veut poursuivre l'examen pendant quelque temps et empêcher le sang de s'évaporer on étale immédiatement un peu d'huile sur le bord de la lamelle de façon à faire une sorte d'encadrement. On peut également se servir d'une petite chambre humide très-simple, analogue à celle de Stricker et qui est formée de la manière suivante : une lame de verre un peu épaisse est creusée d'une sorte de rigole circulaire qui isole un disque de 5 à 8 millimètres de diamètre. Ce disque est au même niveau que le reste de la lame. Après y avoir déposé une trèspetite gouttelette de sang qu'on recouvre immédiatement d'une lamelle de verre on obtient une couche de sang mince, que l'on conserve à l'état humide en faisant pénétrer sous la lamelle une gouttelette d'huile ou de glycérine.

Pour étudier les hématoblastes il est indispensable de voir le sang tel qu'il sort des vaisseaux et d'obtenir une préparation en quelque sorte extemporanée.

Voici le dispositif que je conseille : Après avoir dégraissé avec de l'alcool ou de l'éther les lames de verre on les essuie et on les sèche avec soin, puis on fixe la lamelle sur la lame en laissant tomber sur ses quatre coins une goutte de paraffine fondue. On a ainsi un espace capillaire tout préparé à recevoir le sang ; on le place au foyer du microscope de façon à ce qu'on puisse apercevoir immédiatement les éléments du sang dès que ce liquide pénètre par capillarité entre les deux plaques de verre.

Il est nécessaire de se servir d'un grossissement assez fort (oc. 2 ou 3 et obj. 5 Nachet) et de faire tomber le sang sur le bord de la lamelle de verre au moment même où on le fait sourdre par compression de la pulpe du doigt. Dés que le sang est arrivé au contact de l'espace capillaire il s'y précipite avec force et l'on en voit les divers éléments passer, rouler avec rapidité. En certains points qu'on trouve facilement, le courant sanguin est plus lent, et l'on peut y distinguer les

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éléments. Au milieu des rouges et des blancs on aperçoit de très-petits corpuscules ressemblant tout d'abord à de petits globules rouges très-délicats et pâles. A peine les a-t-on aperçus qu'ils sont déjà modifiés : ils deviennent épineux, adhèrent au verre^ se plissent, pâlissent en perdant une partie ou la totalité de leur hémoglobine et ont une tendance à se souder aux corpuscules qu'ils rencontrent de manière à former des amas. Parfois ils retiennent au passage un ou deux globules rouges qui adhérant en un point de leur périphérie alors que le courant cherche à les entraîner, prennent immédiatement une forme de poire. {PL XXXIV, fig. 1, c.)

Au bout de peu de temps, ces hématies se dégagent pour aller concourir à la formation des piles, et les petits éléments dont il vient d'être question restent isolés, et forment des chapelets ou des amas.

Déjà ils sont profondément altérés et presque méconnaissables, mais on a pu constater leur présence, suivre leurs transformations et se convaincre qu'outre les hématies et les globules blancs, le sang contient des corpuscules particulierss'altérant très-rapidement. {PL XXXIV, fig. 1.)

Veut-on les observer dans le sang pur plus posément et avec tout le temps nécessaire pour en distinguer les principaux caractères, il suffit de répéter l'expérience précédente à une température voisine de 0°. Mes observations ont été faites en plein air pendant l'hiver ; il serait facile de les répéter et de les vérifier en toutes saisons en se servant d'une platine réfrigérente à travers laquelle on ferait passer un courant d'eau glacée.

C'est la température d'environ — 1° qui s'est montrée la plus favorable à ce genre d'étude ; mais on peut encore faire de bonnes observations à la température de 1° à 1°,5 C.

Les globules rouges se disposent sous la forme de piles comme à la température ordinaire et dans l'intervalle de ces piles on aperçoit de petits corps très-délicats, isolés ou disposés par petits groupes de deux, trois, quatre et cinq, rarement plus (lorsque la couche de sang est mince). Ces petits corpuscules sont remarquablement nets, quoique fort délicats et trèsminces; la plupart d'entre eux sont netlement discoïdes et biconcaves, légèrement colorés, d'autres, en assez grand

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nombre, sont allongés et portent une sorte de pédicule plus ou moins long.

La plupart de ceux qui se montrent sous la forme d'un bâtonnet ou d'un grain de riz sont des éléments vus de champ, et par suite ils ont une plus grande réfringence et sont entourés d'une ombre portée plus considérable que ceux ({ui sont à plat. {PL XXXIV, fuj. 2, b, b.)

Ainsi vus dans toute leur intégrité, sans l'intervention d'aucun réactif, et probablement tels qu'ils circulent dans les vaisseaux, ces corpuscules sont parfaitement homogènes et à surface lisse; ils ont un aspect colloïde et presque toujours une teinte jaunâtre ou verdàtre sensible, de sorte que leur substance ressemble à celle des globules rouges faiblement colorés. Les plus petits, qui paraissent parfois incolores, sont dépourvus de granulations et n"ont aucune ressemblance avec des fragments de globules blancs. Mesurés dans ces conditions, par les procédés micrométriques ordinaires, ils ont de l;j-,5 à3;v- de diamètre, quelques-uns atteignent 4 et même

Plus tard, malgré l'action du froid, ces éléments s'altéreront et perdront leur forme et leur aspect primitifs ; mais pendant tout le temps qu'ils restent intacts, ils ressemblent complètement à de petits globules rouges délicats et pâles, ce qui justifie le nom dliémntohhistes sous lequel nous avons proposé de les désigner.

Caractères bislo-chimiques. — Les hématoblastes peuvent être fixés dans leur forme normale par un certain nombre de liquides. Un de ceux qui les altère le moins est le sérum iodé (liquide amniotique de la vache) préparé par la méthode de Max Schultze. Avant de s'en servir on a soin de laisser s'évaporer l'excès d'alcool et d'iode : on met une petite quantité de ce liquide dans un petit flacon dont le bouchon est remplacé par une boulette de coton mollement enfoncée dans le goulot et, au bout de quelques jours, lorsque l'odeur d'iode a presque disparu, le sérum est devenu bon pour l'usage. On se sert d'environ 1 partie de sang pour 20 à 50 de sérum et on agite le mélange avec soin de façon à bien, disperser les hé-

matoblastea. Le sang doit être utilisé dès qu'il ^'ient sourdre au dehors.

Dans une bonne préparation les hématoblastes sont presque tous isolés, faciles à distinguer ; la plupart d'entre eux sont régulièrement arrondis et les phis gros nettement excavés. Quand on les regarde à un fort grossissement, on les voit agités d'un mouvement brownien d'où résulte qu'ils se présentent tantôt de profd, tantôt de face. On peut alors s'assurer aisément, comme dans le sang pur, que les corpuscules ressemblant à des bâtonnets sont réellement des hématoblastes biconcaves vus de champ. {PL XXXIV, ïicf. 3, b.)

Presque tous sont incolores, cependant quelques-uns des plus -volumineux conservent une teinte jaunâtre ou verdâtre. La biconcavité ne se voit que sur un petit nombre d'éléments, les autres paraissent vésiculeux; ils sont probablement gonflés et décolorés par le liquide. Les formes pointues, en poire, en grains de riz sont assez communes et il n'est pas rare aussi de voir des corpuscules déformés, anguleux ou légèrement plissés. Tous ne sont pas isolés, quelques-uns se touchent et parfois se confondent; d'autres forment des groupes plus ou moins étendus dans lesquels les éléments constituants sont habituellement faciles à reconnaître.

Dans le liquide amniotique, quelque bien préparé qu'il soit, les globules du sang et particulièrement les rouges s'altèrent constamment au bout d'un certain temps. Les hématoblastes s'y conservent plus longtemps, mais à leur tour, ils pâlissent, perdent leur netteté et au bout de vingt-quatre heures ds ont presque fous disparu en laissant comme dernière trace une sorte de stroma pâle à peine distinct, analogue à celui des bématies en voie de dissolution.

Le liquide amniotique préparé à l'aide d'eau iodo-iodurée au lieu de teinture d'iode agit d'une manière analogue.

L'eau iodo-iodurée à un degré de concentration convenable donne de bonnes préparations des hématoblastes. Ces corpuscules y sont légèrement colorés en jaune tandis que les hématies y prennent une teinte brun acajou plus ou moins foncé. En général ils y sont fixés dans leur forme normale ; mais en même temps rétractés, et cette rétraction s'accen-

(51*8 i;KORf;ES IIAYEM.

luant peu à peu, au bout do deux ou trois jours il devient difficile de les reconnailrc.

Dans les solutions de sels neutres (sulfate de soude, sulfate de magnésie, etc.) préconisées depuis si longtemps pour l'élude du sang, les hématoblastes se comportent à peu près comme dans le sérum iodé. Ils y pâlissent un peu plus vite et ])eaucoup d'entre eux y sont réduits aune sorte de stroma qui lui-même disparaît au bout d'un temps plus ou moins long. On prendra garde de confondre avec ces restes d'hématoblastes les globules rouges décolorés. Quelle que soit, en effet, la formule adoptée pour la fabrication de ces solutions, depuis celle de Zimmermann, 6 de sel sur 100 d'eau, jusqu'à celle de M. Grancher, 1/40, l'hémoglobine s'y dissout plus ou moins vite, de sorte qu'on ne tarde pas à voir, au milieu des globules colorés, de petits stromas pâles, simulant de petits corpuscules qui ont pu être pris par certains observateurs pour des éléments normaux du sang. Ces petits corpuscules réduits au stroma sont sensiblement plus petits que les globules rouges, quelques-uns n'ont que 4 à 5 p. ; ils se rapprochent donc par la taille des hématoblastes tout en conservant cependant des caractères qui permettent facilement de reconnaître leur véritable nature.

On sait avec quelle promptitude les hématies se dissolvent dans l'eau. Celles de l'homme sont plus solubles peut-être encore que celles de tous les autres animaux. Les hématoblastes, au contraire, offrent une certaine résistance à ce dissolvant. Au moment où l'on délaye le sang dans l'eau, beaucoup d'entre eux sont dissous ou tout au moins réduits à un stroma invisible ; d'autres, au contraire, après avoir perdu toute trace de coloration, restent encore perceptibles pendant un certain temps.

Cette résistance relative à l'action de l'eau est facile à constater quand on fait pénétrer sous la lamelle de verre, d'une part, une gouttelette d'eau, de l'autre une gouttelette de sang et qu'on observe les phénomènes qui se produisent lorsque les deux liquides arrivent au contact.

Quand à une goutte de sang on ajoute une petite quantité d'acide acétique, les hématies sont rapidement détruites et transformées en stromas granuleux et à peine distincts; les

RECHERCHES SUR l'ÉVOLUTION DES HÉMATIES, ETC. 699

hématoblastes sont moins éprouvés. Ils pâlissent et quelquesuns disparaissentpeut-étre, mais beaucoup d'autres persistent, du moins pendant quelques minutes et ne se dissolvent qu'à la longue, après être devenus de plus en plus pâles.

Les solutions de potasse et de soude faiblement ou fortement concentrées dissolvent les hématoblastes avec la même facilité que les hématies. Quand les premiers ont eu le temps, avant l'action du réactif, de se rassembler pour former des amas, l'action dissolvante paraît s'exercer d'abord sur la matière granuleuse qui réunit entre eux ces petits corpuscules, puis tout à coup la partie réfringente, corpusculaire proprement dite, disparaît à son tour.

Un des réactifs les plus intéressants à étudier nous est fourni par le liquide dont nous nous servons pour effectuer la numération des globules du sang. On sait qu'il est très-difficile de fixer d'une manière irréprochable les différents éléments du sang. La plupart des liquides employés à cet usage altèrent la forme et la couleur des hématies, et modifient plus ou moins profondément les globules blancs et les hématoblastes.

Il en est de même des sérums artificiels proposés pour la numération des globules ; beaucoup d'entre eux sont si défectueux que non-seulement ils altèrent les globules rouges mais encore en dissolvent un nombre plus ou moins grand. Un anatomiste italien , Pacini , possède cependant depuis longtemps déjà des liquides qui lui permettent de faire des préparations de sang très-remarquables ; les hématies surtout y sont admirablement conservées tant sous le rapport de la forme que de la couleur.

Nous avons fait des essais avec les liquides formulés par Pacini, et malheureusement nous n'avons réussi que d'une manière médiocre.

Ces liquides nous ont donné constamment des préparations moins belles que les siennes et nous avons constaté, de plus, qu'ils produisent dos amas de globules qui nuisent à une bonne répartition des éléments et ([u'ils ne peuvent être employés pour la numération des globules. Néanmoins, guidés par les indications de Pacini, et après un grand nombre de tâtonnements, nous avons obtenu une sorte de sérum artificiel qui convient parfaitement à l'opération du dénombrement des

ARCH. LIL l'HYS., ï!'' àKRIE, V. 46

700 GEOHOES IIAVKM.

globules el (|ui est en même temps un réactif précieux. Voici notre l'ormule :

Liquide A .

Eau distillée 200

Chlorure de sodium pur. ... 1

Sulfate de soude i)ur 5

Bichlorure de mercure pur. . . 0,50

Ce sérum artificiel qui nous a servi à exécuter nos recherches sur l'aglobulie est de tous ceux qui ont été utilisés jusqu'à présent le seul qui ne dissolve jamais un globule rouge et qui permette de reconnaître les altérations histologiques de ces éléments (diamètre, coloration, forme).

En effet, il fixe avec une netteté parfaite toutes les hématies sans en modifier sensiblement la coloration. Il les rétracte très-légèrement et par suite il ne permettrait pas de prendre des mesures micrométriques très-exactes, mais il en respecte parfaitement la forme ; il en exagère même un peu la biconcavité par suite précisément de la condensation légère qu'il fait subir au corpuscule sanguin.

Il constitue une sorte de réactif coagulant agissant d'une manière particulière sur chacun des éléments du sang et par suite pouvant révéler certaines altérations pathologiques. Nous ne parlerons ici que des effets qu'il détermine sur les hématoblastes du sang normal.

Pour obtenir une bonne préparation il faut faire un mélange de 1 partie de sang avec 20 à 100 du véhicule, en ayant soin de faire tomber le sang dans le réactif dés qu'il sort des vaisseaux. Les hématoblastes apparaissent alors parfaitement lixés dans leur forme, mais un peu décolorés et assez fortement rétractés.

En même temps il se produit autour de ces éléments une sorte d'atmosphère granuleuse qui paraît due à la précipitation d'une substance fournie par les hématoblastes, substance glutineuse qui contribue à réunir les éléments en amas plus ou moins volumineux et qui a une tendance à adhérer aux autres éléments du sang et particulièrement aux globules blancs. (PI. XXXV, firj. S, d, d'.) Le réactif met donc en évi-

RECHERCHES SUK L'ÉVOLUTION DES HEMATIES, ETC. 701

clence deux parties distinctes : 1° des corpuscules brillants, rétractés, réfringents, et 2» une substance granuleuse et visqueuse formant une atmosphère plus ou moins étendue autour des corpuscules.

Cette réaction intéressante recevra par la suite son interprétation. Nous n'ajouterons ici que quelques remarques sur les propriétés chimiques du réactif. En essayant séparément chacun des principes constituants qui entrent dans la formule précédente, on constate que la propriété de coaguler les éléments du sang appartient en propre au bichlorure de mercure.

La proportion de bichlorure a été calculée de telle sorte que la précipitation de matière granuleuse soit aussi faible que possible.

Avec du sang normal les hématoblastes isolés se montrent le plus souvent sous la forme de petits corpuscules rétractés, mais libres, tandis qu'autour des hématoblastes groupés au nombre de deux, trois, quatre, cinq, etc., se voit une trèspetite atmosphère granuleuse qui ne gène en rien la bonne répartition des éléments lorsqu'on se sert du liquide en question pour faire la numération des globules du sang. Mais il suffit de modifier la constitution du liquide et d'élever la dose de bichlorure ou d'employer simplement un liquide ayant perdu un peu d'eau par évaporation pour qu'immédiatement les hématoblastes soient plus rétractés et que la quantité de matière granuleuse qui les entoure devienne plus abondante.

La préparation est alors remplie de plaques granuleuses étendues qui, en adhérant aux autres éléments du sang, deviennent le centre d'amas confus. Ces variations dans la quantité de matière granuleuse précipitée autour des hématoblastes suivant In proportion de bichlorure employé prouvent bien que cette matière granuleuse est produite, comme nous l'avons dit, par les hématoblastes plus ou moins fortement revenus sur eux-mêmes sous l'influence du réactif.

Nous montrerons ailleurs que, grâce à cette propriété le liquide en question, tel que nous l'avons formulé, est précieux pour mettre en évidence certaines altérations pathologiques des hématoblastes. {FI. XXXV, %. ',1)

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La solution d'acide osmique concentrée que M. Pouchet^ a recommandée récemment pour l'étude de divers éléments fixe assez bien les globules du sang.

Les hématoblastes y conservent, au moins pendant quelques heures, leurs caractères propres, ce qui permet de les étudier très-facilement. Ils y sont un peu décolorés comme les globules rouges eux-mêmes, et en général aussi, plutôt gonflés que rétractés. Cet état gonflé rend souvent moins nette la biconcavité. Plus tard, en même temps qu'ils noircissent sous l'influence de l'acide osmique ils se rétractent comme les autres éléments du sang et perdent ainsi de leur netteté. Ce réactif en solution concentrée est néanmoins un des meilleurs à employer pour l'étude de ces éléments.

Les matières colorantes qui rendent habituellement de grands services en histologie sont difficilement applicables à l'étude des éléments du sang. Les globules rouges et les hématoblastes sont, en effet, profondément modifiés ou même en partie détruits par les divers véhicules colorés habituellement employés dans les laboratoires.

Mais quand le sang a été traité par le liquide A, les éléments en sont fixés d'une manière tellement solide qu'on peut les laisser se déposer au fond du vase, décanter le liquide, puis traiter les globules ainsi isolés par différentes solutions colorées. J'ai pu étudier ainsi l'action du carmin, de l'éosine, de l'hématoxyline et d'un certain nombre d'autres substances qu'il me paraît inutile de mentionner.

Mes observations sur l'action de ces réactifs ont été complétées par l'étude des cellules vaso-formatives de l'épiploon de quelques animaux nouveau-nés ( chat, lapin, cochon d'Inde). De plus, j'ai fait également de nombreux essais en mélangeant au liquide A, plus ou moins modifié suivant les cas, diverses substances colorantes : éosine soluble dans l'eau, éosine soluble dans l'alcool, pyrosine, solution aqueuse de carmin, etc.

Il résulte de toutes ces recherches que les réactifs colorants ne peuvent mettre en évidence dans les hématoblastes aucun

1 Pouchel, De l'emploi de racide osmique en solution concentrée. {Journ. de l'Anat. et de la Phys., sept. 1876.)

RECHERCHES SUR l'hVOLUTION DES HÉMATIES, ETC. 703

détail particulier de structure. Ces éléments sont homogènes comme les globules rouges et dépourvus de noyau. L'éosine les colore beaucoup moins fortement que les globules rouges et leur donne une teinte rouge-rubis ; elle se porte particulièrement et très-rapidement sur la substance granuleuse qui les entoure. Les autres matières colorantes agissent sur eux comme sur les rouges et ne pourraient servir à établir une différence de constitution chimique entre ces deux éléments.

Propriétés physiologiques. — On a dû remarquer combien nous avons insisté pour que l'étude histologique du sang soit faite sur des éléments aussi frais que possible. Les hématoblastes sont, en effet, caractérisés par une extrême vulnérabilité. A peine sortis des vaisseaux, ils s'altèrent et présensent toute une série de phénomènes agoniques qui méritent d'être décrits en détail.

Supposons qu'on ait fait une préparation de sang pur avec les précautions que nous avons indiquées tout à l'heure. Après avoir observé les particularités que nous avons déjà décrites, on remarque entre les piles formées par les hématies les petits corpuscules hématoblastiques dont on a pu suivre déjà les premières modifications ; quelques-uns sont isolés, et disséminés çà et là, la plupart des autres groupés.

A l'aide d'un grossissement suffisant (de 500 à 800 d.) il est facile de voir qu'ils sont irréguliers, anguleux, phssés, et que, dans cet état, ils présentent deux parties plus ou moins nettement distinctes : l'une périphérique, grisâtre, finement granuleuse ; l'autre, centrale^ corpusculaire, d'aspect vitreux et ovoïde, assez fortement réfringente.

Leur première altération se traduit donc par une sorte de retrait qui les rend plus éclatants, plus brillants, et par l'épanchement autour d'eux d'une matière particulière. {PL XXXIV, fi(j. 1 et 4.)

La substance qui sort ainsi rapidement des hématoblastes est extrêmement visqueuse, et cette viscosité explique trèsbien la formation des petits amas.

Tout d';il)orrl les hématoblastes se réunissent sous la forme

70'( GICOROES KIAYEM.

(le petiLs grains anguleux ou de petites étoiles, formant souvent une sorte de chapelet dont chaque grain est distinct ; puis ces petits corpuscules semblent s'attirer fortement, la substance visqueuse qui les entoure tend à former une masse commune dans laquelle viennent se superposer et se confondre les éléments constituants. Du bord de cette petite masse partent un grand nombre de prolongements fms dont la disposition varie d'un moment à l'autre, la substance qui englue les hématoblastes paraissant posséder une obscure contractilité qui lui permet de changer plus ou moins rapidement de forme.

Les petits hématoblastes isolés subissent des modifications analogues et tout à coup on voit apparaître dans la préparation des fibrilles très-ténues, s'entrecroisant en divers sens, se perdant, se rejoignant et formant un réseau irrégulier plus ou moins net, qui très-évidemment part des hématoblastes. {PL XXXIV, %. 6.)

A ce moment les amas ont un aspect mûriforme ; les petits grains qui les composent ont parfois encore une coloration jaunâtre manifeste, et de leurs bords indécis partent des filaments droits, nets, quoique très- fins, sensiblement plus larges au moment où ils quittent l'amas que sur le reste de leur parcours.

Tous ces détails microscopiques sont assez difficiles à bien saisir et pour les rendre plus distincts il est nécessaire de faire apparaître plus nettement le réticulum fibrineux ainsi que les carrefours formés par les hématoblastes modifiés. Nous allons voir tout à l'heure comment on y réussit.

Lorsque, au lieu d'examiner le sang en couche mince, on le prépare en couche épaisse, la matière exsudée par les hématoblastes devient plus apparente. Cette couche épaisse de sang contient à des distances variables des espaces arrondis, de formes diverses, autour desquels les globules rouges sont arrêtés et disposés concentriquement. Ces espaces clairs, dépourvus de globules rouges, présentent deux zones distinctes : l'une centrale granuleuse constituée par un grand nombre de petits corpuscules pressés les uns contre les autres et analogues à ceux que nous venons de décrire; l'autre périphérique, claire, translucide, d'autant plus étendue que l'amas

RRCIIERCIIES SUR l'kVOLUTION DES HKMATIES, ETC. 70")

aulour des petits amas hématoblastiques lorsque le sang est étalé en couche mince. Dans ce dernier cas les petits hématoblastes isolés perdent en s'altérant leur diamètre primitif et deviennent presque tous punctiformes, tandis que les amas sont constitués par deux, trois, quatre, cinq et jusqu'à quinze à vingt hématoblastes au plus. Les centres d'irradiation du réticulum fibrineux mesurent alors dans le sang normal, ainsi préparé, de i i^ à 8 [j. environ.

Après la coagulation les amas ne subissent plus que de légères modifications. Beaucoup d'entre eux paraissent continuer encore pendant quelque temps à changer plus ou moins nettement de forme, en même temps ils se décolorent de plus en plus, perdent toute trace d'hémoglobine, deviennent plus finement granuleux ou homogènes, se creusent de petites vacuoles et se désagrègent peu à peu; mais tandis que les premières modifications évoluent rapidement, celles qui suivent la coagulation ne s'accentuent que très-lentement.

Ces observations histologiques délicates, mais ne réclamant, en somme, qu'un peu de soin et de patience, rendent parfaitement évidente l'intervention d'un des éléments normaux du sang dans l'acte de la coagulation. Nous chercherons plus tard quelle est la nature et l'importance de cette intervention ; pour le moment, qu'il nous suffise de bien établir les rapports entre ces deux actes : altération des hématoblastes, coagulation spontanée du sang.

On sait avec quelle rapidité le sang se prend en gelée chez l'hom.me et chez la plupart des animaux. C'est avec une rapidité non moins grande qu'évoluent les modifications histologiques des hématoblastes. Dans les conditions ordinaires, ces deux ordres de faits marchent parallèlement. Il était intéressant de savoir s'il en était de même dans les circonstances qui ont une influence marquée sur la coagulation du sang.

Nous savons déjà que la meilleure manière de voir les hématoblastes à l'état intact, dans le sang pur, consiste à maintenir la préparation à une température voisine de 0, et précisément, on sait depuis longtemps que cette température retarde et modifie profondément la coagulation du sang. Il

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est lui-même plus volumineux. La contluence considérable des hématoblastes a rendu ainsi très-visible cette sorte d'exsudation muqueuse qui est à peine reconnaissable ; il nous paraît utile de revenir sur ce point et d'achever l'exposé des observations que nous avons faites, sous ce rapport, sur le sang" humain.

Dans une de nos expériences, la température extérieure élant de 1°,5, nous avons noté les faits suivants :

Les hématoblastes, disposés comme nous l'avons déjà indiqué; restent sans modification aucune pendant environ un quart d'heure; puis un certain nombre d'entre eux deviennent légèrement anguleux, pâlissent et se couvrent de petites pointes courtes dont la disposition paraît se modifier lentement. Je dis « paraît » parce que les hématoblastes en suspension dans la couche supérieure de la lame de sang, agités d'un petit mouvement vibratoire, se déplacent sous les yeux de l'observateur et changent fréquemment d'aspect.

Au bout d'une heure et demie les altérations de ces éléments sont encore peu avancées.

Un quart d'heure après seulement, la température extérieure s'étant élevée à 2°, 25, on voit apparaître un réticulum fibrineux, partiel, extrêmement incomplet, constitué par l'addition aux épines d'une faible partie des hématoblastes, de petits filaments fins, à peine visibles, plus ou moins longs, mais se perdant en général à une faible distance, avant de s'être entrecroisés avec les voisins. Beaucoup d'hématoblastes ne présentent encore qu'une forme étoilée et sont dépourvus de prolongements fibrillaires. A ce moment, la température extérieure est de 2°, 5, et malgré ce froid relatif, les globules blancs présentent des déformations amiboïdes.

Au bout de 2 heures 1/4, les hématoblastes portant des prolongements filamenteux sont plus nombreux, mais les fibrilles paraissent toujours plus courtes, moins nettes que lorsque la coagulation a lieu à la température de la chambre ; elles ne s'entrecroisent qu'en de rares points.

A partir de ce moment, il ne se produit plus que des changements extrêmement lents, consistant en des altérations de plus en plus grandes dec éléments.

Au bout de 24 heures (la température extérieure ayant peu

EECIIERCHES SUR l'ÉVOLUTION DEÎ^ HÉMATIES, ETC. 707

varié), les hématoblastes sont beaucoup plus aUérés que la veille; le réseau fibrillaire n'est pas devenu plus visible. La préparation étant maintenue alors à la température de la chambre, ne se modifie plus ; lès hématoblastes continuent à s'altérer lentement, tandis que le réseau fibrineux reste incomplet et pâle.

Voici d'autres observations analogues et complémentaires: Une préparation de sang faite par une température extérieure de — 2" G. ne montre aucune trace d'altération des hématoblastes, puis tout à coup elle se modifie profondément par une sorte de dissolution des globules rouges.

Dans une autre préparation faite par une température extérieure de — 1°,5, le sang se conserve sans se dissoudre.

Les hématoblastes sont parfaitement nets et disposés en général .par petits groupes. La première altération de ces éléments se montre au bout d'un quart d'heure environ ; elle consiste en une pâleur légère, puis en un état épineux tout à fait semblable à l'état mûriforme ou épineux des globules adultes.

Peu à peu, sans qu'il y ait de courant intérieur appréciable dans la préparation, les hématoblastes se rapprochent les uns des autres comme s'ils étaient attirés par la rétraction de filaments invisibles les reliant les uns aux autres. Au bout d'une demi-heure, ils sont encore à peine modifiés, et, bien qu'ils changent souvent de forme, on ne peut voir dans ce phénomène la preuve de l'existence d'une contractilité analogue à celle des globules blancs. Au bout d'environ 1 heure, plusieurs hématoblastes sont devenus pâles et anguleux. Une demi-heure plus tard, la température étant de — 0°,5, on ne voit pas de réticulum ; quelques globules blancs se sont légèrement déformés ; les petits amas sont plus condensés, mais la plupart des hématoblastes sont encore homogènes et non épineux. Au bout de 2 heures 1/2, les altérations n'ont pas fait de progrès sensibles ; beaucoup d'iiématoblastes sont presque décolorés, les plus volumineux ont encore une teinte verdàtre manifeste.

En conservant la préparation ])lus longtemps au froid, les hématoblastes continuent lentement à s'altérer; ils se flol rissent, se vident pour ainsi dire en laissant à leur

708 GEonrir.s iiayem.

place une sorte de stroma pâle, plissé^ anguleux, d'où il est impossible, môme au l)Out de 24 heures, de48 heures, devoir partir le moindre filament de fibrine. Ces petits corpuscules ainsi modifiés sont presque tous disposés par groupes ou petits amas, mais ils restent distincts, et même arrivent rarement à se toucher, encore moins à se souder. Ces phénomènes ne sont pas sensiblement modifiés lorsque la préparation, après être restée 2 ou -S heures au froid, est rentrée ensuite dans la chambre. Le réticulum fibrineux n'apparaît plus sous l'infiuence de la chaleur, sa formation est définitivement entravée, ou bien s'il se produit, il reste invisible au microscope et diffère complètement du réseau qui apparaît rapidement dans les préparations de sang faites à la température de la chambre.

Le froid paraît donc agir non- seulement en retardant la coagulation, mais aussi en la modifiant plus ou moins profondément, et ses effets sont liés évidemment d'une manière étroite à l'influence qu'il exerce sur les hématoblastes.

Nous avons vu qu'un certain nombre de liquides fixent les éléments du sang et s'opposent à leurs modifications. Ce sont précisément des solutions composées avec des substances connues depuis longtemps comme possédant la propriété d'empêcher ou de retarder la coagulation du sang. Les solutions salines sont de ce nombre et parmi elles les plus intéressantes à étudier dans leurs effets sur la coagulation sont les sérosités naturelles : liquide amniotique et sérosité hydropique. Ces humeurs peuvent être mélangées avec le sang en proportions diverses, et elles ne s'opposent à la coagulation que lorsque la dilution sanguine est assez étendue.

Ainsi lorsqu'à du liquide amniotique on ajoute une faible quantité de sang, on n'observe pas de coagulation ; dès que la proportion de sang dépasse une certaine limite, la coagulation peut être plus ou moins retardée, mais elle a lieu comme dans un sang auquel on aurait ajouté une petite quantité d'eau.

Les modifications des hématoblastes sont influencées dans le même sens.

En ajoutant au sang une très-petite quantité de sérum iodé.

RECHEBCHES SUR l'kVOLUTION DEP II KMATIES, ETC. 709

ces altérations évoluenl plus lentement que dans le sang pur et l'on peut suivre alors plus facilement les phénomènes que nous avons décrits. La plupart des hématoblastes se réunissent en amas, les uns très--pàles, peu distincts, les autres plus franchement granuleux et plus réfringents, amas d'où partent, au bout d'un temps variable, un réticulum fibrineux assez net, maismoins distinct que celui du sang pur.

Lorsque le mélange est fait avec une quantité plus grande de sérum, on ne voit plus se former trace de réticulum fibrineux ; mais au bout de quelques heures, les hématoblastes, d'abord homogènes et lisses ou légèrement anguleux, portent de petits prolongements courts, parfois ramifiés, qui sont comme une ébauche de la formation du réseau fibrineux. {PL I, fiff. 3.)

Dans le sang dilué avec du liquide ascitique ou avec une autre sérosité pathologique, on observe des faits analogues : les globules rouges, plus ou moins déformés, ont encore une tendance à former des piles, les hématoblastes s'altèrent assez rapidement, mais moins vite et moins profondément que dans le sang pur, puis au bout de quelques heures, ils présentent des filaments fibrillaires plus longs et plus nombreux que ceux qui prennent naissance dans le sérum iodé.

Quand, au contraire, le sérum iodé et le liquide ascitique sont ajoutés au sang en quantité suffisante pour s'opposer à toute trace de coagulation, les hématoblastes ne se déforment plus et ne présentent plus aucun prolongement fibrillaire.

Il serait intéressant de poursuivre ce parallèle et de voir ce que deviennent les hématoblastes dans toutes les conditions qui peuvent influencer la coagulation du sang ; mais c'est là un point particulier de notre sujet que nous nous réservons d'étudier plus tard d'une manière spéciale.

— Pour compléter l'étude histologique de la coagulation, il est nécessaire de traiter le sang pris en caillot par différents réactifs destinés à isoler et à faire apparaître le réticulum.

M. Hanvier a indiqué le procédé suivant :

« Après avoir fait une préparation de sang un peu épaisse et bordée à la paraffine, nous l'avons abandonnée à elle-même pendant plusieurs lieures, puis, après avoir gratté la paraffine et enlevé la lamelle, nous avons lavé à plusieurs reprises

GEOUr.ES IIAYF.M.

la couche de sang coagulé en l'arrosant avec une pipette remplie d'eau distillée, jusqu'à ce que la lame ne présentât plus de coloration du tout; puis nous avons replacé sur cette lame une nouvelle lamelle. En examinant cette préparation à un grossissement de 400 à 500 diamètres, le réticuium fibrineux apparaît d'une façon nette.... » (Technique histologique, p. 215.)

L'action de soulever la lamelle pour traiter ensuite le caillot par l'eau et les matières colorantes, déLruit une partie plus ou moins étendue du réticuium. Dans le but d'éviter ce fâcheux effet, j'opère de la manière suivante : Je choisis une lame et une lamelle de verre bien planes, et, après les avoir bien dégraissées et séchées, je fais tomber sur la lame une goutte de sang peu volumineuse que je recouvre immédiatement avec la lamelle. Cette goutte doit s'étendre en couche mince et uniforme, et ne pas dépasser les bords de la lamelle ; on peut d'ailleurs en enlever l'excès avec un papier de soie. La préparation ainsi disposée, on la place immédiatement dans une chambre humide où la coagulation se fera à l'abri de l'évaporation. Au bout de quelques heures (de 6 à 24), on retire la préparation de la chambre humide et on lave immédiatement la couche de sang en faisant passer à travers, à l'aide de papier à filtre et sans retirer la lamelle, un courant d'eau distillée.

L'hémoglobine se dissout peu à peu, et lorsque la couche de sang est complètement décolorée, on remplace l'eau distillée par une solution colorée, destinée à faire apparaître ce qui reste de la couche sanguine.

Nous avons, à cet effet, utilisé, à l'exemple de M.R.anvier, les solutions d'iode (eau iodo-iodurée plus ou moins concentrée), les solutions alcooliques au tiers de sulfate de rosaniline et de chlorhydrate de rosaniline et, de plus, nous avons essayé, pour obtenir une coloration plus fixe que celle de la rosanihne, d'employer le rose de magdala.

Pour se servir de cette substance, on en sature une petite quantité d'alcool, et on ajoute ensuite 10 à 20 fois autant d'eau, jusqu'à ce qu'on obtienne une solution d'une intensité moyenne.

Le rose de magdala a un pouvoir colorant considérable,

KECHERCHES SUR l'ÉVOLUTION DES IIKMATIES, ETC. 711

analogue à celui de la fuchsine ; il se porte presque indistinctement sur tous les éléments, et colore parfaitement le réseau fibrineux. Malheureusement il précipite trop facilement de ses solutions et donne lieu souvent à des dépôts granuleux qui salissent la préparation ; de plus, il n'est guère plus fixe que la fuchsine, et la coloration qu'il produit s'efface peu à peu au bout d'un certain temps.

Quand la couche de sang coagulé a été bien lavée , les matières tinctoriales susdites font apparaître tout ce qui a résisté au lavage, c'est-à-dire le réticulum fibrineux et ses nœuds ou carrefours, un certain nombre de globules blancs dont les noyaux et les granulations se colorent avec plus ou moins d'intensité, et enfin quelques rares stromas de globules rouges n'ayant pas été détruits par l'eau.

Le réticulum fibrineux résiste parfaitement au lavage, et présente deux parties distinctes, les fibrilles et les carrefours.

• Ces derniers sont constitués par les corpuscules hématoblastiques plus ou moins profondément altérés, corpuscules disposés isolément ou en amas, et sur lesquels se portent avec avidité les matières colorantes.

Ce sont des débris d'hématoblastes ayant souvent encore un éclat réfringent particulier, quelquefois même, surtout pour ceux qui sont isolés, une excavation manifeste ; dans les amas, ils sont rarement distincts les uns des autres et paraissent souvent fragmentés en granulations réfringentes.

Les filaments de fibrine moins colorés que les débris d'hématoblastes, paraissent partir de ceux-ci sans l'intervention d'une substance unissante.

Les fibrilles sont des filaments minces, rigides, droits, ayant au plus 1 (7. de diamètre et une épaisseur assez uniforme. Ils quittent en rayonnant les hématoblastes, se portent en tous sens, se divisent un petit nombre de fois dichotomiquement , s'unissent aux amas hématoblastiques voisins, s'anastomosent, s'entrecroisent, se perdent parfois en pointe dôhée et forment ainsi un réseau à mailles anguleuses, irréguhéres, plus ou moins lâches, plus ou moins serrées, suivant l'épaisseur de la couche de sang, ayant servi à la préparation. (P/. ^AXF, //■//. 1.)

71ii (.EuKUES HAYEM.

La gelée lilanienleuse qui envahit une goutte de sang au moment de la coagulaLion, et qui enlace dans ses mailles les globules blancs et les hématies, comprend donc dans son sein tous les hématoblastes, dont une partie se confond intimement avec les filaments fibrillaires, et dont l'autre persiste au niveau des carrefours sous la forme de corpuscules réfringents, plus colorés que le reste du réseau. Il en résulte que lorsqu'on recueille le sang sur le cadavre après la coagulation jjos^ mortem, on n'y trouve plus d'hématoblastes. Et de même, lorsqu'on a soin de défibriner le sang avant de le soumettre à l'examen microscopique, on en retire tous les hématoblastes qui font corps avec les filaments de fibrine enlevés par le battage.

— On sait depuis longtemps que les éléments du sang, et il en est ainsi d'un certain nombre d'autres, ont la propriété de se fixer dans leur forme normale lorsqu'on les soumet à une dessiccation rapide sur une lame de verre. Cette particularité est très-intéressante à beaucoup d'égards : elle permet de faire un grand nombre de préparations du sang de l'homme et des animaux, dans lesquelles il est facile de retrouver et d'étudier les hématoblastes. Les faits révélés par ce mode de préparation forment le complément indispensable de l'étude de ces petits éléments.

Il existe plusieurs manières d'obtenir une préparation de sang sec. Celle que j'emploie consiste à étaler rapidement une goutte de sang sur une lame de verre à l'aide d'une baguette cylindrique, puis à secouer rapidement la lame tenue par un de ses bouts entre le pouce et l'index jusqu'à ce que la mince couche de sang soit bien sèche. Lorsque la préparation n'a pas été laite avec une rapidité suffisante ou bien lorsque le sang n'a pas été recueilli dès sa sortie des vaisseaux, les hématoblastes ont eu le temps de se modifier et ils se présentent sur la lame de verre sous la forme de petits corpuscules groupés en amas, plissés, décolorés, comme à moitié effacés, souvent méconnaissables.

Pour obtenir de bonnes préparations, il faut absolument tenir compte de la vulnérabilité excessive de ces éléments et agir avec une grande promptitude ; puis, en opérant de plus

RECHERCHES SUti l'eVOLUTION DES HliMATIES, ETC. 713

en plus lentement, on peut mettre en évidence la plupart des propriétés des hématoblastes, la dessiccation permettant, suivant la manière dont elle est conduite, d'obtenir ces éléments sous les divers aspects qu'ils offrent à chacune des phases de leurs altérations.

Le sang étant recueilli dès qu'il sort des vaisseaux et étalé en couche mince sans aucune perte de temps, les hématoblastes sont desséchés avant d'avoir subi la plus légère modification et fixés ainsi dans leur forme normale, tels qu'ils circulent dans les vaisseaux.

Gomme ils adhèrent au verre et sont beaucoup plus minces que les globules rouges, ils ne sont pas entraînés comme ces derniers par la baguette de verre et l'on doit les chercher surtout dans les premières portions de la couche de sang.

Il arrive souvent ainsi que les hématoblastes se trouvent isolés complètement ou presque complètement des globules rouges. On peut alors les étudier plus facilement que dans les préparations de sang humide et si Ton a soin de mettre la couche de sang desséché à l'abri de l'humidité en la recouvrant d'une lamelle mince, on obtient des échantillons de sang qui peuvent se conserver indéfiniment.

Les hématoblastes s'y présentent sous l'aspect de petits corpuscules très-minces, très-déhcats, à contour net. Ils contiennent tous, même les plus petits, une certaine quantité d'hémoglobine qui leur donne une teinte jaunâtre beaucoup moins accentuée que celle des hématies et cependant très-manifeste. Toutefois cette coloration n'est sensible que sur le bord relativement épais, le centre du corpuscule étant toujours déprimé comme celui des rouges. D'ailleurs les hématies adultes ont souvent aussi à l'état sec un centre qui, à cause de sa minceur, paraît dépourvu d'hémoglobine. La plupart des hématoblastes ainsi préparés sont arrondis et de même forme discoïde que les globules rouges, d'autres sont un peu allongés, ovalaires, quelques-uns, comme dans le sang humide, portent un petit prolongement en forme de pédicule tout en conservant une excavation très-nette au milieu de la partie la plus large (PL XXXIV, ïig. 5). Ils agissent comme tous les corps bicon(;aves : leur centre devient brillant quand on éloigne l'objectif et obscur lorsqu'on le rapproche.

714 GEORGES IIAYEM.

Le diamètre de ces éléments est très-variable et, en général, plus grand que dans le sang pur ou préparé à l'aide des liquides conservateurs dont nous avons parlé, ce qui tient à ce que la dessiccation permet aux hématoblastes de s'élargir un peu ou plutôt à ce qu'elle s'oppose au retrait qu'ils subissent rapidement dans le sang pur ou dans les liquides conservateurs. Il est permis, en effet, de penser que la dessiccation qui conserve aux globules rouges leur diamètre vrai, agit de même sur les hématoblastes et que ce moyen convient mieux que tout autre lorsqu'on veut déterminer le diamètre exact de ces corpuscules. Nous croyons donc utile d'indiquer ici les résultats micrométriques que nous avons obtenus en opérant sur des hématoblastes secs.

On remarque tout d'abord une diversité excessive dans les dimensions de ces éléments. Quelques-uns sont excessivement petits; d'autres, au contraire, atteignent les dimensions des globules rouges nains dont ils diffèrent par la pâleur, l'extrême minceur et la facilité avec laquelle ils s'altèrent et prennent un bord crénelé qui les fait ressembler à une petite roue dentée irrégulière ou à une petite étoile. Quelque bien faite que soit une préparation la vulnérabilité des hématoblastes est telle que le tiers ou la moitié des éléments ont déjà le bord crénelé.

Mes mensurations micrométriques ont été faites à l'aide d'échantillons de sang pris chez des individus de divers âges , depuis la naissance jusqu'à 72 ans. Je n'ai trouvé aucune différence en rapport avec l'âge. Dans certains échantillons de sang, le plus petit hématoblaste qu'on puisse voir mesure environ 2 [j(.. Mais le plus petit de tous ceux que j'ai mesurés n'avait que Ifx, 80 environ.

Les plus grands mesurent habituellement à peu près 5 ,«. ; exceptionnellement ils peuvent atteindre 5 [Jt., 5 ou même 5 fx, 75 sans perdre leurs caractères d'hématoblastes. Entre ces deux extrêmes 1 f/., 80 et 5 [x, 75 on peut trouver tous les intermédiaires ; les éléments d'un diamètre extrême sont rares ou peu nombreux, ceux d'un diamètre moyen abondent et mesurent environ 3 ;/.

Nous avons déjà dit que dans les préparations faites sans précaution, il est difficile de retrouver les corpuscules que

RECHERCHES SUR l'ÉVOLUTION DES HEMATIES, ETC. 715

nous venons de décrire. On peut pour se rendre compte de leur vulnérabilité, exécuter avec le même sang et dans les mêmes conditions une série de préparations dans lesquelles ils seront de plus en plus modifiés.

Déjà, nous l'avons vu, la préparation la mieux réussie contient toujours des corpuscules crénelés ; mais habituellement bien distincts les uns des autres. Quand on examine la portion de sang qui a été étalée la dernière, on remarque que les hématoblastes s'y présentent déjà sous la forme de groupes. Cette tendance à former des amas est, en effet, le résultat des premières altérations de ces petits éléments^ de sorte que dans les préparations qui n'ont pas été faites avec une très-grande promptitude on trouve plus de groupes d'hématoblastes que d'éléments isolés. Si l'altération des corpuscules n'est pas encore très-avancée, ces petits groupes sont formés par des corpuscules bien nets, colorés, faciles à distinguer les uns des autres bien qu'ils soient confondus par une partie de leur périphérie. Chacun d'eux est encore nettement biconcave.

La préparation a-t-elle été exécutée plus lentement encore les hématoblastes sont immédiatement beaucoup plus altérés : les isolés sont rares, presque tous sont disposés par groupes volumineux, mais diffus ; revenus sur eux-mêmes isolés ou en groupes, ils sont à peine un peu colorés et ressemblent à de petites pellicules irrégulièrement plissées retenant par places un peu d'hémoglobine. Evidemment les hématoblastes, après avoir perdu une partie de leur contenu, sont alors réduits à une sorte de stroma rétracté.

Dans les amas il est le plus souvent impossible, dans ces conditions, de distinguer et de compter les éléments constituants. On voit néanmoins assez nettement que chacun de ces amas est composé d'un certain nombre de petits éléments juxtaposés et non encore fusionnés en une masse commune.

Lorsque les hématoblastes sont fixés après avoir subi des altérations encore plus avancées, ils sont presque détruits en tant qu'éléments anatomiques et seraient tout à fait méconnaissables si on n'avait pas pris soin de suivre pas à pas leurs modifications progressives. Ceux qui sont isolés se présentent sous l'apparence de gi'anulations grisâtres, irréguiières, souvent tros-rcfringentes ; lus amas devenus tout à fait

AHCM. UL l'HYS., 2" SÉUIK, V. 'il

7t9 IJKOKGEP IIAYKM.

irrcguliers sont formés par des granulations plus ou moins réfringentes, grisâtres ou à éclat métalli({ue, anguleuses ou arrondies^ presque complètement confondues en une masse commune. Souvent autour de ces amas il s'est produit une sorte d'atmosphère légèrement jaunâtre due à la dissolution de l'hémoglobine que contenaient les hématoblastes.

La dessiccation fixant les éléments exactement dans la forme qu'ils ont au moment précis où ils perdent leur eau peut encore être utilisée lorsqu'on veut mettre en évidence la disposition des hématoblastes entre les piles de globules rouges, avant ou après la coagulation du sang.

Si Ton étale le sang en couche relativement épaisse, aussi continue que possible sur une lame de verre et qu'on le laisse sécher lentement, les globules rouges auront le temps de se disposer en piles et dans les intervalles de ces piles on verra les hématoblastes isolés ou disposés par petits groupes tels qu'ils se présentent dans une préparation ordinaire de sang pur au moment où le courant sanguin s'arrête. Lorsque la préparation est faite en hiver, les hématoblastes sont assez bien conservés et apparaissent sous la forme de petits corpuscules en général un peu plissés et anguleux, mais encore nettement colorés,

D'autre part, lorsqu'au lieu de faire sécher le sang on met d'abord la lame de verre sous une cloche dont la paroi est doublée d'un papier à filtre humecté (cloche humide) le sang reste liquide.

Au bout d'un certain temps on peut alors faire sécher cette couche de sang coagulé et on fixe ainsi sur la lame de verre tous les éléments avec le réticulum fibrineux. Cette préparation peut ensuite servir à loisir pour l'étude de ce réticulum. Il suffit pour cela de laver le caillot ainsi étalé d'abord avec de l'eau pure, puis avec de l'eau iodée ou une solution de rosaniline et l'on obtient de bonnes préparations qui permettent surtout d'étudier l'état des amas d'hèmatoblastes après la coagulation. Je ferai toutefois remarquer qu'en opérant ainsi, il est impossible de détruire complètement les globules rouges; l'hémoglobine est entraînée par le lavage à l'eau 5 mais le stroma du globule devenu résistant par le fait de la dessiccation iiersiste et devient Irès-apparent après l'ac-

l-iliCllEKGUKS SUH L ÉVOLUTION LIES 11 lOMATIUS, liTi;. 717

tion de l'iode ou de la solution alcoolique de rosaniline. Ces faits me paraissent pompléter utilement l'étude des propriétés physiologiques des hématoblastes : ils démontrent d'une manière irréfutable que tous les petits corpuscules isolés ou groupés, qui nagent dans le plasma sanguin, dans une préparation de sang pur, doivent être rapportés, malgré leurs divers aspects, à un seul et même élément.

— D'après la description précédente on voit qu'il est absolument impossible de confondre les hématoblastes soit avec les globules blancs, soit avec les hématies. Ils diffèrent essentiellement des globules blancs par la forme, le volume, l'absence de noyau, l'homogénéité de leur masse, les propriétés physiologiques, et il nous paraît tout à fait inutile d'établir un parallèle entre ces deux espèces d'éléments. Il est intéressant, au contraire, de revenir sur la comparaison que nous avons établie entre les hématoblastes et les hématies adultes. Lorsque les hématoblastes sont fixés dans leur forme, ce sont, avons-nous dit, de petits corpuscules discoïdes, biconcaves, colorés par de l'hémoglobine, en un mot, de véritables globules rouges en miniature. Aussi leur constitution anatomique présente-t-elle les mêmes problèmes à résoudre que celle des globules rouges. En premier lieu ces petits éléments possèdent-ils un noyau ?

Cette question ne me paraît pas plus difficile à résoudre que pour les globules rouges adultes et on a lieu de s'étonner que quelques rares anatomistes croient, aujourd'hui encore, à la présence d'un noyau dans les hématies. Les apparences de noyau qu'on peut voir naître dans les hématoblastes comme dans les globules rouges sont, en effet, le résultat d'une altération chimique plus ou moins profonde du contenu de ces corpuscules.

Aucun des réactifs dont nous avons eu l'occasion de parler ne fait apparaître trace de noyau, pas plus dans les hématoblastes que dans les hématies, tandis que beaucoup d'entre eux mettent rapidement en évidence le noyau des hématies des ovipares. L'éosine colore uniformément les hématoblastes ainsi que les hématies, sans y faire apparaître une tache granuleuse centrale analogue au noyau des globules rouges

718 GEORGES IIAYE.M.

des ovipares ; d'aulre part l'hématoxyline, qui se fixe avec tant d'énergie sur les noyaux, laisse ces éléments absolument intacts. Les hématoblastes contiennent cependant assez souvent de petites granulations brillantes, mais nous n'insisterons pas ici sur ce point car ces granulations ne sont que Irès-exceptionnellement visibles dans les hématoblastes de l'homme.

En second lieu, on doit se demander si ces éléments ont une membrane d'enveloppe, en un mot, si ce sont des vésicules dont il faudrait ensuite expliquer la forme biconcave ou s'il s'agit de corpuscules dépourvus d'enveloppe.

Sous ce rapport encore ils se montrent semljlables aux globules rouges et certains réactifs qui les altèrent plus ou moins rapidement en dissolvant leur contenu (sérum iodé, sérum au sulfate de soude , eau iodée convenablement étendue) font apparaître une sorte de stroma analogue à celui des hématies décolorées et en partie dissoutes par les mêmes agents.

Cette similitude au point de vue anatomique ne se retrouve pas quand on poursuit la comparaison en se plaçant sur le terrain physiologique. Immédiatement les différences deviennent très-grandes. Ce qui nous frappe dans l'histoire physiologique des hématoblastes, c'est cette vulnérabilité excessive qui apparaît dès que les élémemts ne sont plus dans des conditions tout à fait normales et se traduit par cette série de modifications qui préparent et accompagne.it la coagulation du sang.

Malgré cette vulnérabilité, en quelque sorte active et toute spéciale, les hématoblastes opposent à certains réactifs plus de résistance que les globules rouges et par là ils montrent encore que leur constitution chimique n'est pas identique à celle des hématies. Mais en quoi en diffère-t-elle?

La question ainsi posée est aussi complexe au point de vue anatomique qu'au point de vue chimique. Dès que les hématoblastes sont sortis des vaisseaux et s'altèrent, ils laissent échapper une certaine substance à travers leur stroma. Il est très-probable qu'une partie de cette substance est soluble et disparaît dans le plasma. Mais quelle est cette substance soluble? Les hématoblastes perdent rapidement leur coloration; est-ce l'hémoglobine seule qui se dissout ainsi ou l'hémoglobine et une autre substance? Nous n'en savons encore rien. En

HECHEHCHES SUR l' ÉVOLUTION DES HKMATIES, ETC. 719

tout cas la partie principale de la matière exsudée par les hém^toblastes paraît rester autour d'eux, au moins pendant quelque temps. C'est une matière visqueuse, donnant aux hématoblastes la propriété de se réunir en amas et d'où partent des prolongements qui se confondront avec le réseau fibrineux. Est-ce déjà de la fibrine ou bien une matière en voie de transformation et se combinant avec une autre substance dissoute dans le plasma ?

Enfin, lesstromas des hématoblastes eux-mêmes formant les carrefours du réticulum, insolubles dans l'eau comme les filaments de fibrine, sont-ils de la même constitution chimique que les fibrilles? Je laisse aux chimistes le soin de répondre à ces questions multiples, et je pense que les faits anatomi' ques précédemment exposés pourront servir à les résoudre. Ils contribueront certainement à jeter un certain jour sur le mode de formation encore si discuté de la fibrine.

A en juger par l'effet des réactifs coagulants tels que le bichlorure de mercure et les solutions concentrées d'iode, la matière exsudée par les hématoblastes doit se rapprocher, en effet, considérablement de la fibrine, puisque ces substances y font apparaître de petits filaments fort analogues aux fibrilles du réticulum. De plus, l'étude anatomique des amas hématoblastiques montre que les débris formant les carrefours sont constitués par le stroma des hématoblastes et par quelques granulations d'apparence graisseuse, mais d'une nature encore mal déterminée.

Nos observations histo-chimiques ne nous permettent pas d'aller plus loin ; elles s'appliquent, chez l'homme, à des éléments si petits et si délicats, qu'il serait imprudent de vouloir analyser les phénomènes d'une manière trop intime. Nous aurons d'ailleurs l'occasion de revenir encore sur ce sujet à propos des modifications de même ordre qu'on observe dans les éléments plus volumineux des ovipares.

Nous n'ajouterons plus à ces réflexions qu'une seule remarque.

On a vu que dans les conditions normales, le réticulum fibrineux a pour point de départ les amas hématoblastiques. On dirait, au moment où le sang se coagule, qu'une aorte de cristallisation partant do petits cristaux prôforméa

7i»0 r.KOIîGKS HAYEM.

envahit toute la masse liquide. Ce point de départ du réseau est-il obligatoire ou simplement occasionnel, et si l'on pouvait supprimer tous ces petits débris d'éléments, empêcherait-on la coagulation de s'effectuer? A défaut de réponse fondée sur une observation anatomique, nouâ croyons, d'après les faits établis par les procédés chimiques, que la coagulation peut avoir lieu dans des conditions très* diverses, et il n'est pas illogique d'admettre que ces conditions doivent entraîner des variations correspondantes dans les dispositions et les apparences du caillot et du réticulum, mais ces faits ne diminuent en rien l'importance de l'intervention des hématoblastes.

' Nous avons fait sur ce point un certain nombre d'expériences que nous rapporterons dans un autre travail, et qui prouvent que la fibrine peut se former sans qu'il y ait des groupes d'hématoblastes altérés pour servir de centres d'irradiation au réseau.

Mais nous ne croyons pas que cette fibrine puisse apparaître sans que les hématoblastes, en s'altérant, aient perdu quelque chose d'eux-mêmes, aient fourni par conséquent au plasma la substance qui paraît lui manquer pour se prendre en gelée. En un mot, il nous paraît extrêmement vraisemblable que si l'on pouvait dépouiller complètement le sang de tous les hématoblastes avant que ceux-ci aient subi la plus légère modification, la coagulation serait rendue impossible.

Il y a donc deux faits à considérer dans la coagulation du sang : le fait physiologique, c'est-à-dire celui qui s'accomplit dans les conditions ordinaires, sans l'intervention d'aucune substance étrangère, d'aucun réactif, et dans lequel les phénomènes évoluent anatomiquement,. comme nous l'avons exposé ; le fait chimique de l'apparition d'une substance nouvelle, ou tout au moins d'une matière prenant tout à Coup une forme nouvelle.

Rôle des hématoblastes dans la constitution générale du sang. — Les hématoblastes sont des éléments constants, nombreux, et il nous a paru intéressant de déterminer avec exactitude leur proportion dans le sang.

RECHERCHES SUR l'ÉVOLUTÏON llES HEMATIES, ETC. 721

Lorsqu'on fait la numération des globules à l'aide de l'appareil que nous avons imaginé, M. A. Nachet et moi^ on se sert habituellement d'un grossissement moyen d'environ 250 diamètres (oc. 3 ; obj. 2 ; tube en partie rentré).

Il serait impossible, dans ces conditions, de distinguer les hématoblastes et de les compter. On y parvient facilement en modifiant le dispositif habituel de l'hématimètre de la manière suivante :

A) La cellule ordinaire, haute de 1/5 de millimètre, est remplacée par une cellule de hauteur moitié moindre, soit de 1/10 de millimètre, afin qu'on puisse employer un objectif plus fort.

B) L'objectif n° 3 de M. Nachet est suffisant, si l'on a soin de le combiner avec un oc. 3. Mais il ne faut pas oublier que les globules seront vus à travers une couche relativement très-épaisse, représentée par la hauteur de la cellule et l'épaisseur de la lamelle. Aussi, faudra-t-il choisir une lamelle aussi mince que possible. Malgré cette précaution, si l'on emploie un objectif ordinaire fabriqué pour être correct lorsque les objets sont vus à travers une couche réfringente beaucoup moindre, les globules ne seront pas vus avec netteté. M. Nachet, avec son habileté ordinaire, a écarté cette difficulté en me construisant un objectif 3, corrigé de manière à fonctionner parfaitement dans ces conditions.

G) Le carré tracé dans l'oculaire doit représenter encore une surface carrée de 1/5 de millimètre de côté; le grossissement étant plus fort, il couvrira un champ microscopique plus grand, et devra être gravé exprès pour cet objet.

A l'aide de ce dispositif, on peut compter les globules du sang à un grossissement d'environ 400 diamètres, permettant de voir facilement les hématoblastes, même les plus petits.

On remarquera que cette numération est effectuée dans un parallélipipède dont le volume ne représente que la moitié d'un cube de 1/5 de millimètre de côté.

Pour ne rien changer aux calculs ordinaires et pour pouvoir utiliser les tables dressées d'avance, il suffît de faire le mélange sanguin avec 4 millimètres de sang et 500 millimètres cubes de sérum. Toutes mes numérations ont (dé faites

à l'aide d'un sérum iodé préparé avec soin et je n'ai tenu compte que des éléments tout à fait nets.

Mes recherches n'ont porté encore que sur un petit nombre de sujets de divers âges. Les résultats en sont consignés dans le tableau suivant :

UÉSIGNATIONS.

HÉMA-

toulastes.

HÉMATIES.

GLOIi ri.ES

blancs.

16 000 7 .-JSO 0 000 Il 000 11 300

— de 5 jours

de 13 jours

Enfant de 8 mois, non sevré

Sid 000 276 000 318 000 260 000

Homme de 25 ans

— de 36 ans

Femme de 26 ans

— de 32 ans

— de ()5 ans

Le nombre des hématoblastes paraît donc varier à l'état normal, de 200 000 à 346 000, c'est-à-dire dans des proportions assez grandes. La moyenne générale de ces quelques numérations est de 255 000. Les hématoblastes sont donc, chez l'homme, environ 40 fois plus nombreux que les globules blancs, et 20 fois moins abondants que les rouges.

Le. sang du nouveau-né ne diffère pas, sous ce rapport, de celui de l'adulte K Mais d'après les chiffres du tableau, on remarquera que les enfants de quelques mois à 4 ans ont à la fois un grand nombre d'hématoblastes et de globules blancs. C'est, d'ailleurs, à l'époque de l'allaitement et de la première dentition, que les enfants ont le plus de globules blancs et le moins d'hématies. Il y aura lieu de faire, à cet égard, des recherches plus nombreuses et plus précises. On observera

* Depuis que ce travail est rédige, j'ai trouvé chez le nouveau*né de? chiffres notalilcmcnl inférieurs. Iclf^ que 150,000. 100,000, el mémo 75,000.

RECHERCHES StJH L'ÉVOLUTION DES Hl':\fATIES, ETC. 723

aussi que la production des hématoblastes ne s'affaiblit pas chez le vieillard ; un des chiffres les plus élevés du tableau se rapporte, en effet, à un homme de 72 ans.

Il est très-probable que le nombre des hématoblastes n'est pas le même à tous les moments de la journée, et il sera intéressant d'en déterminer les variations sous l'influence des repas, de la veille, du sommeil, de lafatiù;ue, etc. D'après mes essais, le nombre des hématoblastes augmenterait pendant la période de digestion.

Voici les faits observés chez S personnes différentes :