DIRE

J. Vincenr, phot.

Fic. À. — Fragments de tige de Vigne cultivés pendant deux mois sur un milieu dépourvu d’hétéro auxine, Un cal volumineux s’est développé sur la face radicale située à l'air libre.

J. Vixcenr, phot.

Fic. B. — Fragment de liber de Vigne après deux mois de culture. Ce fragment était posé à plat sur le milieu. Remarquer que des proliférations abondantes sont apparues aux abords de l'extrémité radicale du fragment.

f) Je ANNALES DES Épipuyries. Page 20.

tions qu'apportent les substances nutritives surajoutées sont quantitatives et et non qualitatives, ce que l’on peut exprimer en disant que la croissance demeure normale. Au contraire l’adjonction de certaines substances excitoformatrices comme les hétéroauxines, modifie profondément les caractères du développement des tissus et détermine une croissance anormale. Nous examinerons donc tout d’abord la croissance normale des tissus, puis leur développement en présence d’hétéroauxine.

a. AMPÉLIDÉES.

La famille des Ampélidées renferme un grand nombre de Lianes dont certaines croissent avec une grande vigueur. Leurs tiges, toujours très minces, rampent sur le sol ou s'élèvent sur des supports en s’accrochant à l’aide de vrilles ou de crampons. Nous commencerons par considérer les cultures de tissus que nous avons réalisées avec le genre Vits. Nous examinerons ensuite les Parthenocissus et les Cissus.

L. Genre Viris : Vots vinifera L. — Le genre Vitis qui n’est représenté en Europe que par une seule espèce : Vitis wimifera L. qui est largement répandue dans tout l’hémisphère Nord tandis qu’on rencontre en Amérique du Nord et en Asie un grand nombre d’autres espèces. Nous envisagerons tout d’abord la morphologie externe et la structure anatomique des cultures de Vitis winifera L., puis de quelques espèces américaines et asiatiques.

A. Morphologie externe. — a. Croissance normale. — Nos essais ont porté surtout sur les tissus des cépages suivants : Aramon, Carignan et Chasselas de Fontainebleau. Pour étudier la croissance normale des tissus de cette espèce, nous utilisons des milieux: gélosés ne renfermant pas de substances de croissance, mais simplement des sels minéraux et du glucose à la concentration de 3 ou 5 p. 100. Nous plantons verticalement les fragments de tige dans le substratum de façon à ce que la plus grande partie demeure à l'air libre, et nous les orientons en position inverse de celle qu'ils avaient sur la plante entière, c’est-à-dire de façon que leur face foliaire seule plonge dans la gélose. Placés dans ces conditions, des fragments de tige de Vigne commencent à proliférer au bout d’une huitaine de jours. Le début de la croissance est marqué par un léger gonflement de la tige et l'apparition d’un anneau continu de parenchyme néoformé sur l’emplacement de la section de la zone génératrice. Cet anneau s’épaissit et déborde de chaque côté sur les tissus différenciés, ses bords internes finissent par se souder pour former une calotte. La croissance se poursuit encore et les tissus deviennent légèrement chlorophylliens lorsqu'on les expose à la lumière. Au bout de deux mois, le cal ainsi formé atteint un diamètre de 10 à 12 millimètres (PL. I, fig. A). La croissance se ralentit alors. Seuls, certains points privilégiés continuent à se ire et la surface qui était régulièrement mamelonnée se hérisse de petites cornes irrégulières serrées les unes contre les autres.

La face foliaire des explantats, plongée dans la gélose, ne prolifère généralement pas. Cette croissance dissymétrique semble mettre en évidence la polarité des tiges de Vigne, aussi avons-nous étudié cette propriété de la façon suivante : nous avons isolé des fragments de liber épais de quelques millimètres, que nous avons cultivés en les couchant à plat sur la gélose de mamière que leurs deux extrémités soient dans des conditions comparables. Nous avons alors constaté que, dans ce cas, également, seule la partie radi-

culaire de l’explantat se développait (pl. I, fig. B).

b. Croissance en présence d’hétéroauxine. — Lorsqu'on ajoute au milieu minéral

glucosé de l'acide indole ou naphtyle acétique, ou une autre hétéroauxine, on constate qu’à des concentrations inférieures à 10-58, ce produit paraîl n’exercer aucune action. Les fragments se développent d'une manière identique à celle que nous venons de décrire. Par contre, pour une concentration légèrement supérieure, les cals se forment plus rapidement. Lorsque la concentration atteint 10-7, le développement des cals est renforcé et ils débordent largement de chaque côté du fragment initial (pl. Il, fig. A); en même temps les tissus préexistants émettent fréquemment des racines. Ces organes sont particulièrement abondants vers l'extrémité radiculaire des explantats ou immédiatement sous le cal. Ils s’enfoncent généralement dans la gélose, mais il arrive que, parfois, ils se dressent verticalement contre les parois du tube. Si le milieu renferme encore davantage d’hétéroauxine, par exemple 10, l’action rhizogène du produit est toujours très marquée et les cals deviennent encore plus volumineux, mais en même temps on observe des phénomènes d'intoxication qui se manifestent par un début de désorganisation des tissus néoformés. Ceux-ci deviennent plus fragiles, car leurs cellules se gonflent en tous sens et se transforment en éléments géants presque séparés les uns des autres. Cette action désorganisatrice de l’hétéroauxine est très irrégulière, certains cals restent normaux tandis que d’autres se transforment partiellement ou même parfois entièrement en tissus mous d’aspect translucide ov {arineux formés de cellules géantes. Enfin, si la concentration aîteint 1075 l’action toxique de l’hétéroauxine est encore plus intense si bien que tous les tissus néoformés deviennent rapidement des amas pulvérulents ou des masses de cellules translucides.

Cette action désorganisatrice paraît moins accentuée lorsqu'on utilise comme hétéroauxine de l'acide x naphyle acétique au lieu d’acide indole 8 acétique. Cest pourquoi, par la suite, nous avons uniquement employé l’acide & naphiyle acétique.

c. Variations de la croissance en fonction de l’état des plantes expérimentées. — La Vigne, comme la plupart des végétaux des pays tempérés ou froids, a une végétation discontinue. C’est au printemps, à partir du mois de mai, dans la région parisienne, qu'elle manifeste la plus grande activité végétative et c’est à ce moment que l’élongation de ses tiges est la plus rapide. Toutefois, à l'inverse de beaucoup d’arbres qui achèvent leur croissance en quelques semaines, la Vigne continue à se développer pendant toute la belle saison et n’entre en repos qu’à l'automne au moment de la chute des feuilles. Dans certaines conditions d’aill urs, par exemple dans les régions tropicales, ou encore en serre chauffée et convenablement éclairée, sa végétation est continue, Nous avons cherché s’il y avait une relation entre l’activité des fragments cultivés in vitro et celle de la plante dont ils provenaient. Pour cela, nous avons fait des prélèvements à diverses périodes de l’année. Nous avons ainsi constaté que les très jeunes bourgeons qui viennent de débourrer au printemps et n’ont pas encore plus de 2 à 3 centimètres de longueur sont incapables de proliférer in vitro. Il en est de même de l'extrême pointe de la tige adulte. C’est lorsqu'on prélève des explantats dans la région médiane de sarments qui ont atteint 40 à 50 centimètres de longueur et en voie de croissance très active, qu'ils se développent le plus rapidement in tro. Des fragments, prélevés au cours de l’été, prolifèrent également avec vigueur, mais, en fin de saison, vers la mi-septembre, les cals sont plus petits et toute prolifération cesse lorsque les prélèvements sont faits après la chute des feuilles depuis le début d'octobre jusqu’en janvier. Il semble qu’une substance inhibitrice se forme alors dans la plante et l'empêche de proliférer car, pendant toute cette période, l’héléroauxine n’exerce aucune action sur les tissus. Il paraît donc

BISeIT-

J. Vincent, phot.

Fic. À. — Fragment de tige de Vigne cultivé pendant deux mois en présence d’hétéroauxine à la

concentration de 10-7 : la partie radicale située à l'extérieur du milieu s’est épaissie pour donner un cal volumineux qui déborde largement sur les tissus préexistants.

J. Vinczwr, phot.

Fic. B. — Fragment de tige de Vitis coignetiae, après deux mois de culture in vitro, sur un milieu contenant de l'acide naphtyle acétique à la concentration de 5/10-7.

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