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en présence d

Une zone génératrice libéroligneuse e

Fi. 13. — Coupe longitudinale d'un cat produit par une ti vasculaire où l’on distingue des vaissea

une tige.

M. Cette structure reproduit celle d’

rencié

es de grandes cellules à mucilage PEN: Parenchyme néoformé ; M : Cellules à mucilage; Z G : Zone génératrice; V : Vaisseaux.

prolifèrent avec une extrême lenteur. Les cals qui apparaissent ici également du côté radical des fragments, à l'emplacement de la zone génératrice, ne s’accroissent pas suffisamment pour que leurs bords intérieurs puissent se souder et conservent donc une forme annulaire ; ils sont entièrement lisses et fortement chlorophylliens. La structure anatomique de ces bourrelets rappelle celle des cals de Malva sylvestris; cependant ils sont encore plus lignifiés, au point que l’on a de la peine de les couper avec un

scalpel.

III. Nicorrana ragacum L. var. « White Burley». — Le Tabac est susceptible d’héberger, en dehors du virus bien connu de la Mosaïque, un certain nombre d’autres virus communs à diverses Solanées, et en particulier le Virus X et le Virus Y de la Pomme de terre qui provoquent chez cette plante des mosaïques parfois accompagnées de nécroses. C’est dans le but de cultiver in vitro ces divers virus que nous avons effectué des eultures de tissus de Tabac.

À. Morphologie externe. — a. Croissance normale. — Lorsqu'on ensemence des fragments de tige de Tabac dans des milieux ne renfermant pas d’hétéroauxine, en les orientant de manière que leur extrémité radiculaire soit située à l'air libre, le cal se forme très lentement sur cette extrémité, uniquement en dehors du milieu de culture; il a l'aspect d’un disque irrégulier devenant vert pâle si les cultures sont exposées à la lumière. La tige émet également un certain nombre de racines, et, assez rarement, quelques bourgeons apparaissent sur les néoformations.

b. Croissance en présence d’hétéroauxine. — Lorsqu'on incorpore au milieu de l'acide naphtyle acétique à la concentration de 1077, les cals deviennent plus volumineux: Ils élaborent moins de chlorophylle et produisent davantage de racines; en même temps, la tige se met à prohiférer au contact du milieu à la surface de celui-ci et s’entoure d’une couronne de tissu mou et translucide d’aspect bien différent du cal normal (pl. VI, fig. B). | Ç

Enfin, en présence de doses plus fortes d’hétéroauxine, on constate que, pour des concentrations comprises entre 10-7et 10-56,les cals deviennent encore plus volumineux, mais que leur aspect se modifie rapidement. Au bout d’un certain temps, quelques mamelons se décolorent, deviennent translucides et cette transformation gagne peu à peu une partie importante des tissus néoformés. L'examen microscopique de ces tissus translucides montre qu’ils sont, en grande partie, formés de cellules géantes ayant subi un accroissement isodiamétrique et sans cohésion entre elles.

Le Tabac est donc une plante qui paraît très sensible à l’action toxique de l’hétéroauxine, puisque des altérations se produisent pour des concentrations dix fois plus faibles (1077) que dans le cas des autres espèces que nous avons étudiées.

Si, au lieu d’enfoncer l'extrémité foliaire des fragments dans le milieu, de manière que la face radiculaire soit située à l'air libre, on plonge cette dernière dans la gélose, son développement est en grande partie inhibé par le contact du milieu; elle ne prolifère alors qu’en présence d’hétéroauxine et dans ce cas elle fournit des néoformations toujours translucides et sans consistance localisées surtout au voisinage de la surface de la gélose. Par contre, l’extrémité foliaire, qui est située à l'air, ne prolifère pas davantage que lorsqu'elle est immergée dans la gélose. Les tiges de Tabac, comme celles de toutes les plantes herbacées que nous avons étudiées, présentent donc une polarité très nette.

c. Influence de l’état de la plante sur la croissance in vitro. — Le Tabac est une plante

dont la tige meurt après avoir fructifié. C’est en isolant des fragments de tiges encore Jeunes en voie de croissance active que l’on obtient les meilleurs développements in vitro. Cependant des tiges plus âgées prélevées au moment de la floraison de la plante sont encore susceptibles de se développer pour former des cals importants.

1 Ci 0 B. Caractères anatomiques. — a. Structure de la tige normale. — Des coupes transver-

Fi. 14. — Coupe schématique d’un fragment de tige de Tabac ayant été cultivé pendant deux mois en présence d’hétéroauxine à la concentration de 10-7.

La prolifération du cambium a donné naissance à deux cals différents. Le premier formé d’un parenchyme compact s’est développé sur la face radicale du fragment. Un certain nombre de nodules cribrovasculaires sont apparus à l’intérieur de ce parenchyme. Le second cal constitué par un tissu mou formé de cellules géantes, s’est développé à la surface du milieu de culture. I entoure entièrement le fragment au niveau où il émergeait de la gélose.

N C : Nodules cribrovasculaires ; M1 : Moelle ; P V : Parenchyme vasculaire; F P : Fibres péricycliques,

sales effectuées dans une tige de Tabac, une vingtaine de centimètres en dessous du point végétatif, permettent d’en examiner la structure; on distingue à l'extérieur l’épiderme mince et poilu, puis quelques assises de parenchyme cortical qui est chlorophyllien et dont certaines cellules renferment des mâcles d’oxalate de calcium. Le péricycle formé d’une seule assise de cellules limite le cylindre central. Le liber forme un anneau continu dans lequel on distingue des flots de fibres libériennes. Cet anneau de liber est doublé intérieurement par un mince anneau de bois formé de grands vaisseaux

associés à des fibres et interrompu par des rayons médullaires. Enfin, la moelle constituée par un parenchyme à grandes cellules présente à sa périphérie, en regard des vaisseaux de première formation, des amas cellulaires colorés en rose vif par le carmin, qui sont formés par du liber interne.

b. Structure de la tige cultivée in vitro. — La coupe longitudinale d’un fragment de tige observée après deux mois de culture permet de voir (fig. 14) que tous les tissus, à l'exception du parenchyme vasculaire trop différencié pour proliférer, c'est-à-dire l'écorce, le parenchyme libérien, le cambium et la moelle, ont participé à la formation des cals; mais c’est surtout la croissance du parenchyme libérien qui est active. Les

Fic. 15. — Nodule cribrovasculaire formé à l’intérieur d’un cal de Micotiana Tabacum après deux mois de culture.

Ce nodule est constitué par une zone génératrice circulaire produisant du liber vers l'extérieur et du parenchyme vasculaire vers l’intérieur.