SIS

EDOrAHO VAN BENEDEN.

entre eux par des fibrilles d'une grande ténuité. H résulte de l'étude que j'ai faite de la genèse de ce stade, que Von ne peut admettre une diatinetion essentielle euti-e les filaments chromatiques et les filaments achromatiques du pronucleus : n'existe en réalité dans les pronucleus, tels que je les ai représentés plancUe XJXlns, flgiire 9, (lu'un seul réticulum. Je n'ai représenté que les éléments les plus appai-ents de Cft^ réseau, auquel il faut rattacher la membrane nucléaire.

C'est exclusivement à la périphérie du pronucleus iin'apj missent ces filaments plus épais, les uns coloi'és, les autres incolores. Entre ceux-ci se trouvent encore des fibrilles réticulées plus pâles et plus minces que je n'ai pas figurées. De semblables fibrilles se voyaient aussi à l'intérieur des pronucleus. Je pense que toute la substance chi'omatique des pronucleus mui-s s'est concentrée dans certains filaments de la couche corticale du pronucleus, de feçon à n'imbiber plus q,t ces éléments. La substance chromatique, régulièrement minée, aux stades antérieurs, dans t«ut« l'étendue de membrane cellulaire, laisse derrière elle, quand s'opère la concentration, un stroma achromatique; la membrane achromatique et le réticulum incolore des pronucleus sont des pai-ties de ce seul et unique stroma achi-omatique, dont les filaments chromatiques font eux mêmes partie.

Au stade représenté figure 10 l'on voit courir, à. la surface de chaque pronucleus, un filament chromatique moins irrégnlier et peu ou point interrompu. L'on n'observe plus de changements brusques de direction, plus d'angles, mais pailout des courbes : le trajet est plus régulièrement fiexueus. Peut-être n'y a t-il, dans cha<iue pronucleus, qu'un filament pelotonné unique. Le filament est manifestement formé de grains: l'on observe moins de variations dans le volume des Je n'ai pas dessiné cette apparence raouiliforme du filami j'ai voulu surtout représenter le trajet du cordon chromatique. Indépendamment de ce dernier, ou distingue toujours la membrane achromatique du pronucleus, bien régulièi-e et formée de granules achromatiques, surtout saillants vers

graiâ^l ameiu^^l

vers l'intérieur; dail^H

le pronacleus Ton voit encore des filaments achromatiques rétlealés, les uns plus épals^ d'autres plus tenus. Je n'ai pas figuré ces derniers détails.

Dans les figures 11, 12, 13 et 14, j'ai représenté diverses formes qu'affecte le cordon chromatique, après qu'il a subi des raccourcissements successif. En même temps qu'il se raccourcit le cordon proémine davantage dans l'intérieur des pronucleus; ceux-ci se rapprochent et s'aplatissent l'un contre l'autre; il devient évident qu'il n'existe, à ce moment, qu'un cordon unique dans chaque pronucleus.

Ce cordon se raccourcit de plus en plus et décrit une ligne dont le trajet est souvent indéfinissable; ordinairement il forme une courbe ouverte; rarement elle est fermée. L'on observe des variations considérables d'un point à un autre d'un même cordon, en ce qui concerne le volume des globules chromatiques. Mais c'est toujours aux extrémités du cordon que se voient les plus gros grains. Quand leur volume atteint certaines limites on distingue manifestement dans le cordon une couche corticale plus chromatique et un axe médullaire moins chromatique (fig. 13 et 14). Tantôt les globules sont adjacents les uns aux autres, d'autres fois écartés les uns des autres et, dans ce cas, ils sont réunis par des commissures un peu moins chromatiques que les globules eux mêmes.

La charpente achromatique du pronucleus reste toujours bien visible. L'on voit presque dans chaque œuf, non-seulement les bouts libres des cordons colorés se continuer dans des filaments achromatiques bien apparents, mais aussi des filaments collatéraux s'insérer aux globules constitutifs de ces cordons.

Parmi les granules achromatiques que l'on distingue, tant dans le contour achromatique des pronucleus, que sur le trajet des filaments achromatiques les plus volumineux, il en est qui sont beaucoup plus gros que ceux que l'on pouvait distinguer aux stades précédents.

Fréquemment on voit les pronucleus, pourvus chacun d'un

gi'os cordon nucléaire contourné, gagner le pôle inférieur de Tœuf, c'est-à-dire le point de la surface du vitellus le plus éloigné de celui qui poi-te le second globule polaire (pi. XlXbis, fig. 13 et 14).

Vers la fin de la période que nous considérons, tantôt un peu plus tôt, tantôt un peu plus tard, le cordon nucléaire, dans chacun des pronucleus, se coupe en deux vers le milieu de sa longueui*. L'un de ces cordons est déjà divisé dans la figure 12 et Ton voit que la rupture s'est faite du côté de la périphérie du pronucleus. Le point où s'opérera la rupture semble déjà indiqué, dans le second cordon, par deux globules chromatiques beaucoup plus volumineux que tous les autres.

Ija figure 15 montre aussi la rupture opérée dans l'un des cordons, annoncée dans le second. C'est là le phénomène découvert par Flemming et désigné par lui sous le nom de segmentation.

Il se constitue ainsi, par segmentation transversale du cordon, dans chaque pronucleus, deux anses chromatiques (pi. XJXbis, fig. 19), dont les bouts libres sont toigouis dirigés vers la périphérie.

J'ai pu m'assurer, par l'examen d'un grand nombre d'œufe, que la rupture du cordon ne se fait pas comme s'il était sectioimé au moyen d'un instrument tranchant H &nt se figurer l'interruption qui se produit dans le cordon, comme résultant bien plutôt d'un afflux de la substance chromatique vers les deux extrémités du cordon, d'où résulte un amincissement médian et une décoloration progressive de cette partie amincie. Cette partie médiane du cordon devient achromatique et l'on voit alors les bouts libres des deux anses chromatiques reliés entre eux par une commissure en grande partie achromatique. La figure 15 montre bien cette continuation des bouts libres des anses chi*omatiques dans nn filament aclu'omatique, moniliforme et très épais.

Je ne commis pas d'images qui prouvent d'une façon plus incontestable l'existence d'un stroma achromatique dans les filaments chromatiques des noyaux en voie de division.

J'ai vu soayent aussi, à ce stade, les granules achromatiques, parfois très volumineux de l'ancienne membrane du pronucleus se continuer avec des fibrilles moniliformes du protoplasme vitellin, comme je l'ai représenté (pi. XLKbis, fig. 15).

Je n'ai jamais vu apparaître, pendant la série des stades que je viens de décrire, aucune ti-ace de fuseau achi-omatique, ni de pôles d'attraction. Pour autant que l'on puisse se fonder sur des caractères négatifs je crois pouvoir exprimer l'opinion que ces pôles ne s'accusent qu'au stade suivant, répondant à la phase étoilée de Flemming.

Je suis loin de vouloir émetti*e le moindre doute sui* les données si précises de Flemming en ce qui concerne le moment où la disposition dicentrique se manifeste dans les cellules qu'il a si bien étudiées; j'ai moi même observé dans un œuf de lapin, en voie de segmentation, l'existence manifeste de deux centres d'attraction, entourés chacun d'une belle étoile protoplasmique, aux deux cotés d'une masse nucléaire globuleuse, dans laquelle se voyaient encore très distinctement les deux pronucleus. Ceux-ci n'avaient subi encore aucune altération. Peutêtre n'y a-t-il aucune liaison de cause à effet entre l'apparition de la figure dicentrique dans le protoplasme et la formation des cordons pelotonnés dans le noyau. L'indépendance des deux phénomènes semble résulter de ce fait que, lors de la formation de cordons pelotonnés dans le noyau, on ne distingue, dans cet élément, aucune particulaiîté que l'on puisse rapporter & l'apparition, dans le protoplasme, de deux centres d'attraction; et, s'il en est ainsi, il n'y aurait rien d'étonnant à ce que l'on constate, entre cellules difiérentes, des variations quant au moment de l'apparition de la figure dicentrique.

J'ai le premier signalé le fait important qu'il se produit, pendant la division karyokinétique des noyaux, des changements dans la constitution physique et chimique du protoplasme cellulaire. Ces modifications se manifestent notamment par le fait que le corps cellulaire d'une cellule en voie de division présente, pour le carmin, un affinité beaucoup phis

320 EDÔCÏRD VAN BENEDEN.

grande qu'à l'état de repos. Dans les feuillets embryonnaires 1 du lapin, constitués à la façon d'un épithélimn pavimenteux simple, le fait saute aux yeux. Dès que l'on a coloré on de ces épitliéliums les cellules en voie de division apparaissent, comme des tâches colorées, au milieu du fond unitbrmément plus pâle formé par les autres cellules. Si l'on examine ces membranes, sans coloration préalable, ces mêmes cellules se font remarquer par une plus grande réfringence de la sub-J stauce qui les constitue,

Flenmiing a pleinement confirmé ces Mis par l'étude qu'BB a &ite de la division indirecte, dans les épithélinms de Ift-I salamandre; il exprime l'opinion que les changements dont î s'agit dépendent de ce que le corps de la cellule se divise e deux conciles, l'une corticale plus dense et l'autre interne pltH claire et probablement plus fluide.

J'ai constaté, en ce qui concerne les œufs de l'ascaiide i cheval, que le même fait se reproduit. Vers la fin du stadi caractérisé par le pelotonnement, au moment où les aui se constituent, le corps viteUin change d'aspect : il devient plus petit, plus réfringent et il acquiert une plus grandftj affinité pour les matières colorantes. Je n'ai pas observé 1 division signalée par Flemming en une couche corticale plM réfringente et une couche interne plus claii^e.

Ces propriétés nouvelles qu'acquiert le ritellus devienne! plus apparentes encore au Stade étoile et se maintiennes jusqu'au moment où la division en deux blastflmères complètement achevée. Une fois les noyaux filles constitué! le vitellus reprend une apparence grossièrement granulei et il perd son affinité pour le carmin.

Le changement qui se produit dans les propriétés du vitelloc pendant la division n'apparait pas simultanément dans tonte l'étendue du corps cellulaire. C'est d'abord au pôle qui porte le second globule polaire que le vitellus devient plus dense e plus apte à, fixer la matière colorante ; il subit soit en mêr temps, soit im peu après, une modification semblable à l'autu pôle, au pourtour des pi-onncleus. A un moment donné (

distingae une zone éqiiatorîale plus granuleuse et moins colorée, comme je Tai représenté (pi. 'KlXbis, fig. 14). Au pôle supérieur se voit im croissant plus dense dont les conies se perdent inférieurement dans le contour du globe vitellin. Peut-être, lors de racheniinement das proinicleus vers le centre du vitellus, la calotte plus colorée s'étend-elle sur tout le pourtour du corps vitellin et constitue-t-elle aloi-s la couche marginale de Flemming. Mon attention n'a pas été particulièrement fixée sur ce point. Peut-être les Vtuiations que l'on constate dans la position du second globule polaire relativement à l'axe de la futui*e figure dicentrique dépendent-elles de cet enveloppement progi*essif de rhémispbëre inférieur du yitellus par la calotte plus dense et plus colorée qui appai*ait d'abord au pôle supérieur.

8* STADE. -- PluuM stellaiiy ou étoilée de la fl^nre ohromatiqne. — Formation des sphères attractives et des asters. — Division de la plaque équatoriale chromatique.

Les contours achromatiques des deux pronucleus deviennent de moins en moins distincts; ces corps accolés l'un à l'antre forment maintenant ensemble une masse claire qui, vue dans certaines directions, paraît indivise (pi. XlXbis, fig. 16, 20 et suivantes); mais, que cette disparition des limites des deux pronucleus n'est qu'apparente, cela résulte clairement d'images comme celle que j'ai représentée planche XlXfer, figure 2, où le contoui* de chacun des pronucleus pouvait encore être distingué. De semblables images sont fréquentes.

L'amas clair formé par les deux pronucleus, réunis en un corps unique en apparence, semble augmenter de volume; il gagne le centi-e du globe vitellin (pi. XIXfe>-). Le contour de la masse achromatique des anciens pronucleus est toujours indiqué par un pointillé dont les gros points pâles sont les derniers vestiges des giunules achromati(iues des phases précédentes. Dans l'intérieur de la masse se voient encore des trainées de granules semblables, anastomosées entre

elles; les plus apparentes de ces traînées se montrent tr)UJours dans la prolungation des filaments chromatiques (pi. XIXter, fig. 2).

La masse achromatique renfeime quatre anses chromatiques ; elles en amvent à se trouver placées dans un seul et même plan, le plan équatorial de la cellule en voie de division. Ce n'est que peu à peu que les quatre anses viennent occuper cette position; mais elles se trouvent alors si bien dans un plan unique, à mi-distance enti*e les centres polaires, qui ont fait leur apparition à ce moment, que si l'on fait rouler sur le porte-objet un œuf montrant d'abord Tune des images représentées figure 20 à 25, on parvient toqjours à ramener dans mie position telle que le disque équatorial, vu en coupe, apparaît au milieu de Tœuf sous la forme d'un bâtonnet transvei'sal sombre (pi. XlX^er, fig. 3 et 4).

Si l'on en juge par la fréquence d'images semblables à celles que j'ai représentées planche XIX&îs, figures 19 à 25 et planche XlXfer, figure 1 à 4, le stade que nous décrivons doit être le plus persistant de tous ceux de l'évolution karyokinétique. Il semble qu'il faut un temps relativement considérable pour amener les anses dans la position qu'elles doivent occuper pour l'accomplissement des phénomènes ultérieurs de la division. La disposition des anses, dans le plan équatorial, est d'ailleui*s éminemment variable, conune le montre bien la série des figures 19 à 25.

Mais les figures 20, 21, 23, 24 et 25 ont ceci de conunun que les anses ne se coupent pas; elles ne sont nulle part ni superposées, ni entrecroisées. 11 n'en est pas de même dans les figures 16, 17, 18, 19 et 22. Je considère ces dernières formes comme moins avancées que celles dans lesquelles les anses se trouvent toutes juxtaposées dans un seul et même plan équatorial. Les phénomènes ultérieui-s de la division ne peuvent s'accomplir sans cette juxtaposition. Les anses en arrivent-elles toujoui-s à se poser comme elles le sont dans la figure 24, où chacune d'elles à sa convexité diiigée vers le centre de la figure, ses extrémités tournées vers la péiîphérîe?

REGUERCllES SIR LA FÉCOINDATION. 323

se forme t-il, dans toas les cas, une étoile proprement dite, une figure comparable à une roue de voiture? ou bien des disques équatoriaux comme ceux que j'ai figurés (pi. 'XlXhis, fig. 20, 21, 22 et 25) peuvent ils, sans passer par la phase étoilée proprement dite (fig. 24), donner lieu directement aux stades ultérieurs du développement? Je ne puis pas résoudre cette question, qui me paraît d'ailleurs présenter une médiocre importance.

Le nombre des anses est constant : on en trouve régulièrement quatre ; elles sont approximativement de même longueur. H ressort avec la dernière évidence de Tétude des stades antériem*s du développement que deux de ces anses proviennent du pronucleus mâle, les deux autres du pronucleus femelle.

Parmi des centaines d'œufs montrant distinctement la figure à quati-e anses, je n'en ai trouvé qu'un seul qui, au point de vue du nombre des filaments chromatiques, fit exception. C'est celui que j'ai représenté planche XÏKbis, figure 23. Indépendamment des quatre anses ordinaires il y avait dans la plaque équatoriale de cet œuf un cinquième filament beaucoup plus long que les auti^es. Sa longueur était environ double de celle des autres. Peut-être s'agissait-il là d'un œuf dans lequel deux zoospermes avaient réussi à pénétrer. A en juger par la constance qui se montre, non-seulement dans le nombre, mais aussi dans la longueur moyenne des anses ordinaires, il semble qu'il s'agissait bien dans cet œuf d'un élément surajouté. Je pense que ce cinquième filament provient d'un second pronucleus mâle. Il est probable qu'il se serait segmenté ultérieui-ement en deux moitiés et qu'il aui-ait donné lieu à deux anses supplémentaires. A part cette particularité, cet œuf ne présentait aucun caractère exceptionnel.

Flemmîng a compté, chez la salamancke, le nombre des anses de la figure stellaire. Dans quatre cellules épithéliales, où il lui fiit possible de déteiminer avec certitude le nombre de ces éléments, il en trouva constamment 24. Retzius ti-ouve que, chez le Triton, le nombre de ces anses est en moyenne de 12 à 16; mais ces nombres sont sujets à variations.

326 EDOIARD VAN BENEDEN.

par oi)position aux cordons chromatiques équatoriaux ou primates.

Un cordon primaire donne donc naissance à deux cordons secondaires et à une substance cliromopliile interposée entre ces cordons. Une anse primaire se dédouble en deux anses secondaires et les huit anses secondaires se trouvent groupées, quatre par quatre, dans deux plans subéquatoriaux parallèles à l'équateur (pi. XIKbis, fig. 25, vue de face, pi. XlXfer, flg. 4, 5 et 6, phases successives d'écartement des deux plans subéquatoriaux, vue de profil).

Je dois faire observer ici que si Ton examine avec soin les extrémités des cordons primaires, au moment oîi ils sont déjà transformés en bandelettes, l'on y voit fréquemment les bordures chromatiques se continuer l'une dans l'autre (pi. XlX&i^, flg. 16). De même aussi, après le dédoublement, l'on voit souvent les anses secondaires, assez éloignées Tune de l'autre vers leur milieu, tandis qu'à leurs extrémités elles sont encore en continuité Tune avec l'autre (pi. XlX&is, fig. 25). Le même fait s'observe dans les figures 1 et 3 de la planche XIX^. Cependant Ton constate de légères variations dans la manière dont les cordons secondaires se comportent l'un vis-à-vis de l'autre aux extrémités des bandelettes primaires. Dans la figure 1 par exemple (pi. XIKbis) l'on voit l'une des bandelettes coupée, à son extrémité, par une section nette; chaque bordure marginale se termine par un globule chromatique assez volumineux et il peut y avoir doute sur la question de savoir si ces deux globules terminaux sont encore en continuité l'un avec l'autre, autrement que par l'intermédiaire de la substance moins chromopliile de la bandelette. Dans la plupart des cas, au contraire les bouts sont arrondis et ils sont régulièrement bordés par le cordon chromatique marginal. D'après cela la niptui*e parait pouvoir se faire soit un peu plus tôt, soit un peu plus tard. Mais c'est un fait général que la continuité entre les deux cordons secondaires se maintient plus longtemps aux extrémités de ces cordons et que leur écartement progresse plus rapidement vers le milieu de leui- longueur (pi. XlXfer, fig. 7).

Avant d'aller plus loin, nous devons nous poser cette question : Comment s'accomplit le dédoublement des cordons primaires? Il est à remai-quer que, dans ce phénomène du dédoublement, un cordon équatorial ou primaire ne donne pas seulement naissance à deux cordons secondaires ou subéquatoriaux, mais aussi à une lame interposée entre ces derniers; cette lame est moins cliromatique, mais cependant manifestement avide de carmin; je l'appellerai la " lame intermédiaire „ et la substance qui la constitue je la désignerai sous le nom de " substance inteimédiaire. „

En même temps que le cordon primaire s'aplatit, la substance chromatique se porte à la périphérie, la substance intermédiaire s'accumule dans la cavité virtuelle délimitée par la couche chromatique corticale. Cette couche chromatique marginale se forme t-elle au début suivant toute la surface du cordon primaire, auquel cas il faudrait admettre un stade tubnlaire, ou s'amasse-t-elle directement le long des bords de la bandelette? Je ne puis pas résoudre cette question; mais je pense cependant qu'au stade figuré planche XïKbis, figure 16, ce stade tubulaire se présente, tout au moins pour les extrémités renflées des cordons. C'est ce qui paraît résulter de l'examen de ces extrémités vues en raccourci. Si pendant quelques instants le cordon prend cette forme, en tout cas le stade tubulaire est de très courte durée : la couche corticale, plus épaisse dès le début suivant les bords de la bandelette, s'interrompt suivant ses faces, et là la substance intermédiaire est mise à nu. La concentration de plus en plus complète, vers les bords, de la couche marginale chromatique, amène la formation de globules arrondis, aux dépens de lames incurvées, telles que nous les avons représentées (pi. XlXfer, fig. 4). Dès lors les cordons secondaires se trouvent constitués. Les gros globules primaires se sont dédoublés en deux globules secondaii*es moins volumineux; et chaque cordon secondaire reproduit, en moindre épaisseur, la forme exacte du cordon primaire dont il provient. De là l'identité de constitution des deux anses jumelles.

328 EDOIARD VAN BENEDEN.

Nous allons voir qu'au stade suivant les anses secondaires de l'un des plans subéquatoriaux se rendent vers l'un des pôles de la figure, que celles de l'autre se portent graduellement vers Tautre pôle et que chacun des noyaux des deux premiei*s blastomères va se former, au moins en partie, aux dépens des quatre anses secondaires du plan subéqnatorial correspondant.

Tel est manifestement la raison d'être du dédoublement des cordons primaires. Chaque cordon fournit une moitié de sa substance à chacun des noyaux filles. Si nous nous rappelons que des quatre anses constitutives du disque équatorial deux proviennent du pronucleus mâle, tandis que les deux antres dérivent du pronucleus femelle, nous en arrivons à cette conclusion que chaque noyau fille reçoit la moitié de sa substance chromatique du zoosperme, l'autre de l'œuf. Si les pronncleos ont un caractère sexuel, si l'un est mâle, l'autre femelle, il est clair que les noyaux des deux premiers blastomères sont hermaphrodites.

La raison du dédoublement des cordons chromatiques, lors de la division des noyaux, a été soupçonnée par Flemming : il s'est demandé si chaque anse primaire ne fournit pas une anse secondaire à chacun des noyaux filles. Quelque probable que lui paraissait cette hypothèse, qui était de nature à faire comprendre le pourquoi du dédoublement, il ne pouvait l'appuyer sur aucun fait d'observation; le nombre considérable des anses que l'on observe dans les noyaux de la salamandre ne permet pas de suivre chacune des anses et de voir ce qu'elle devient. Une semblable difficulté ne se présente pas dans les figures typiques de l'œuf et aussi des blastomères de l'ascaride du cheval. C'est cette simplicité relative qui m^a permis de trancher positivement ce point si important pour l'histoire de la division indirecte des cellules et d'établir la filiation de la substance chromatique des noyaux cellulaires jusques dans les gonocytes mâle et femelle, le spermatozoïde d'une part, l'œuf mûr de l'autre.

Je dois à ce sujet, appeler encore l'attention sur un rapport

qui peut n'être qu'accidentel, auquel cas il ne faudrait lui attribuer aucune importance, mais qui peut-être aussi tout autre chose qu'une simple coïncidence; il acquerrerait alors une haute signification. L'étude minutieuse de Tovogenèse et de la division cellulaire dans les tissus de l'ascaride du cheval serait nécessaire pour trancher la question.

J'ai dit que le pronucleus mâle comme le pronucleus femelle fournissent régulièrement deux anses, ni plus ni moins, au disque équatorial. Or, j'ai montré plus haut la dualité constante du pronucleus femelle et j'ai fait voir que quelques indices permettent de soupçonner que cette même dualité de composition se trouve aussi dans le pronucleus mâle. Dans le pronucleus femelle et peut-être aussi dans le pronucleus mâle il existe, au début, deux masses chromatiques. Cette identité dans le nombre des anses chromatiques qui se forment aux dépens d'un pronucleus et des masses chromatiques qui existent dans le pronucleus, au moment de sa naissance, est remarquable. Y a-t-il là simplement coïncidence ou y a-t-il un rapport de cause à effet entre la constitution de l'ébauche du pronucleus et les produits de son évolution ? C'est là certes une question qui mériterait d'être étudiée. Si l'on se rappelle,, d'autre part, que dans le nucléole de l'œuf il existe deux disques chromatiques, que nous trouvons ces mêmes disques dans la première et dans la seconde figure pseudokaiyokinétiques, que ces disques paraissent subii* deux réductions successives lors de la formation du premier et du second globule polaires, qu'on les retrouve encore dans les deux masses chromatiques du pronucleus femelle, l'on peut se demander si la raison pour laquelle il ne se forme dans le pronucleus femelle que deux anses chromatiques ne se trouve pas déjà dans la constitution du nucléole de l'œuf. Je me borne à soulever cette question. Il faudrait rechercher dans l'histoire de Tœuf l'explication de la dualité de ce nucléole ovulaire. H y a là toute une série de recherches nouvelles à faire et peut-être ces études conduiraient-elles à des résultats importants.

330 EDOIARD VAN BENEDEN.

Dans la formation du noyau de chacun des deux premiers blastomères interviennent deux anses chromatiques mâles et deux anses femelles. Lorsque ces blastomères se divisent chaque noyau donne à son tour naissance à quatre anses (pi. XlXfer, fig. 14) et il en est de même lors de la division des quatre première blastomères. Je n'ai pas pu poursuivre la segmentation plus loin; mais si le même fait se reproduit indéfiniment, ce qui n'a rien d'invraisemblable, il y aurait dans tout noyau de cellule de l'ascaride du cheval l'équivalent de quatre anses chromatiques. Puisque dans les noyaux des deux premiers blastomères se trouve, en fait de substance chromatique, l'équivalent de deux anses mâles et de deux anses femelles, il est éminemment probable qu'il en est de même pour les cellules subséquentes. La circonstance que, lors de la division de deux en quati'e et de quatre en huit, il existe dans chaque disque équatorial quatre anses chromatiques, permet de supposer que deux d'entre elles sont mâles et deux autres femelles. La ressemblance parfaite que Ton constate entre le disque équatorial d'un blastomère en voie de division et le disque équatorial de l'œuf constitué de deux anses mâles et deux anses femelles, justifie cette supposition. /H est probable, dès lors, que les deux substances chromatiques l'une mâle, l'autre femelle se réunissent dans le noyau, / mais qu'elles ne se confondent pas et, qu'au moment de la ■ division, elles se localisent en deux anses mâles d'un part en I deux anses femellas de l'autre. Cela parait résulter de ce fait / que le disque équatorial renferme constamment quatre anses ni plus, ni moins.

Si telle est la constitution des noyaux, dans les cellules des tissus de l'ascaride du cheval, il est probable qu'il doit en être de même pour les œufs et pour les spermatogonies. Dans Tœuf ovarien toute la substance chromatique se concentre dans l'élément que l'on appelle le nucléole ovulaire; certes cet élément n'est pas l'équivalent de ce que Flemming et Retzius appellent des nucléoles dans les cellules des tissus. Tout le réticulum clu*omatique, y compris les nucléoles, parait

s'être condensé dans le corpuscule germinatif. Or, cet élément se constitue de deux disques distincts. H est permis de supposer que chaque disque est l'équivalent d'une anse mâle et d'une anse femelle, et que, lors de la formation des globules polaires, chaque disque rejetterait, en deux poussées successives, l'anse mâle qu'il renferme. La cellule œuf deviencb-ait, par cette élimination, un gonocyte exclusivement femelle. Une spermatogonie donne naissance, chez l'ascaride mégalocéphale, à deux spermatogemmes composés chacun de quatre spermatocytes; et chacun de ceux-ci se dédouble en un zoospenne et en une portion cytophorale (pi. XlXfer, 19 et 20).

Y a-t-il réellement entre les rapports numériques que je signale ici une raison d'être conforme à l'idée que je viens d'exprimer? Je ne puis à cet égard émettre qu'une hypothèse; je n'attache à ce rapprochement aucim autre valeur; mais peut-être l'idée, quelque hypothétique qu'en soit le caractère, provoquera-t-elle de nouvelles recherches. C'est là le but unique que je poursuis en l'émettant.

C'est au stade stellaire qu'apparaissent, dans le protoplasme ovulaire, les pôles et les différenciations polaires de la figure karyokinétique. L'on a décrit depuis longtemps, dans les œufe en voie de division, un fuseau achromatique. Mayzel a révélé son existence dans les cellules animales constitutives des tissus. Les fibrilles achromatiques du fuseau partent en rayonnant des espaces clairs qui occupent, dans les blastomères en voie de division, les extrémités du fuseau. Autour de ces espaces clairs rayonnent des traînées de granulations vitellmes; Plemming les appelle RadiarstraJilen ; Fol a donné aux espaces clairs et aux rayons qui en partent, le nom d'asters.

Les deux asters, avec le fuseau qui réunit entre eux les centres des deux étoiles constituent ce que Fol a appelé un amphiaster. J'ai le premier signalé l'existence dans certaines cellules (œufs des Dicyémides en segmentation), au centre de chaque étoile, d'un petit corpuscule et je lui ai donné le nom de " corpuscule polaire. „ Cet élément a été trouvé depuis dans d'autres cellules et le nom de corpuscule polaire a été

•-Î2 F.Lh)1\RD \o be>ede>.

^.f'.t'lfX^ fiJîr Fl^^-mmin? et par plusieurs aatres histologistes. J'ai aa--i r^-'".i>nria iiae •lan-> Ir.s oellulef? en «livision de rectoderme 'iri lapin Ton «observe les mêmes asters tenninanx que Ton ne r:onnai.->/iir k cetttf éi>«"|ar. que «lans les œufs en segmentation.

Plerriminsr a retrouvé ces asters dans les cellules des tissus de la .ralamandre. Ces c»:ntres d'attraction de la figure il les voit se révéler dés le début du stade de pelotonnement.

U me fiarait r^ne rlans Tœuf de l'ascaride du cheval Tapparition de la figure dicentrique est plus tardive. C'est au stade Htellaire que se montrent les premiers indices de cette formation, et que deux centres d'attraction se manifestent dans le corfis protoplasmique de l'œuf Cpl. XIXW.*, fig. 16, pi. XlXfer, fig. 2j. Il apparaît à chacune des extrémités d'un axe perpendiculaire au plan éfiuatoriaL dans lequel siège l'étoile formée par les anses chromatiques, un corps clair délimité par un cercle de granules achromatiques. Ce corps sphéroidal est formé d^one substance plus homogène que le \itellus ambiant; il présente en outre une affinité plus grande pour le carmin. H s'agit donc d'une formation morphologique distincte et je propose de désigner ces coi*ps sous le nom de sjilwres attrticUves, Au centre de chacune des sphères se voit un globule ou nn groupe de globules différenciés auxquels je conserve le nom de " Corpuscules polaires, y. De chaque corpuscule central partent radiairemeut, dans toutes les dii'ections, des lignes très fines (lui paraissent rattacher au corpuscule polaire les grains achromatiques du contour de la sphère attractive. Mais ces lignes se prolongent au delà des limites de la sphère jusques dans le protoplasme vitelliu, auquel elles donnent une si ructuri; radiaire. Tantôt tous les myons divergents de Tétoile sont également pâles dans les limites de la sphère attractive (pi. XlXter, fig. 2); mais parfois quelques rayons dirigés vc.rs le disque équatorial sont plus apparents que les autres. Ils fonnent alors avec le corpuscule polaire, vers lequel ils convergent, une figure en éventail (pi. XlXfer, fig. 3). 31 n'tîst pjw toiyonrs possible, tant s'en faut, de suivre jusqu'au dis<iue étiuatorial les rayons de cet éventail, qui sont d'ail-

RECnERCnES SIR LA FÉCONDATION. 333

leurs invariablement interrompus à la limite de la sphère attractive : ils s'y fixent à des granules achromatiques assez volumineux. Mais parfois on peut les voir se prolonger au delà, et s'étendre dans la substance achromatique des anciens pronucleus, jusqu'au disque équatorial ou aux disques subéquatoriaux (pi. XlX/er, fig. 4, 6, 7 et 8). Ils paraissent se fixer aux anses chromatiques primaires ou secondaires ; mais je n'ai jamais pu m'assurer qu'ils reliassent entre eux les pôles de la figure dicentrique. Il me paraît bien plutôt, à en juger par des images comme celles que j'ai représentées figures 6 et 7 (pi. XIX^), que les filaments achromatiques ne dépassent pas les disques subéquatoriaux et qu'ils ne forment jamais k eux seuls un ftiseau achromatique complet. Conformément k ropinion de Fol les fibrilles achromatiques du soi-disant fuseau ne sont que des rayons plus accentués de l'étoile attractive. Ces éléments se fixent aux anses chromatiques secondaires.

Je n'ai pas de données bien précises sur l'origine des divers éléments dont je viens de parler. Dès le moment où j'aperçois une sphère attractive je la trouve constituée comme je viens de le dire. Mes observations ne peuvent donc pas servir à élucider la question controversée entre Strasburger et Flemming de l'origine des fibrilles achromatiques du fuseau. Mais il me parait incontestable que, de même que toute la sphère attractive, la portion de ces fibrilles qui siège dans la sphère, est d'origine protoplasmique et probable que la portion qui se trouve entre la sphère et le disque équatorial se forme aux dépens des fibrilles achromatiques des pronucleus.

Cette manière de voir est certes hypothétique; mais elle est fondée sui* la position originelle de la sphère attractive et sur le &it établi plus haut de la continuité organique entre les fibrilles achromatiques intranucléaires et les fibrilles moniliformes du protoplasme.

A mon avis, l'apparition des sphères attractives, du corpuscule polaire et des rayons qui en partent, y compris les flbiîlles achromatiques du ftiseau sont le résultat de l'appa-

334 EDOUARD VAN BENEDËN.

rition de deux centres d'attraction, comparables à deux pôles \ magnétiques dans le protoplasme ovulaire. Cette apparition entraine un arrangement régulier des fibrilles treillissées du protoplasme et de la substance nucléaire aclii*omatique par rapport à ces centres, de la même manière qu'un aimant '.].^ provoque l'arrangement stellaire de la limaille de fer sur la feuille de papier, sous laquelle se trouve placé l'aimant Si la structure du protoplasme est celle que j'ai décrite, il est beaucoup plus admissible que les fibrilles radiées et celles du fuseau sont, comme dans le cas des figures pseudokaryokinétiques, des fibrilles moniliformes devenues plus apparentes et plus homogènes, que de supposer une émission de fibrilles achromatiques aux dépens d'un corpuscule polaire ou vers le coi-puscule. Le fait que la sphère attractive se forme et siège dans le corps cellulaire prouve que la portion terminale du fuseau ne peut être d'origine nucléaire et la continuité existant entre les éléments achromatiques du protoplasme et ceux des pronucleus enlève toute difficulté & l'hypothèse de l'origine nucléaire d'une portion de chacun de ces filaments.

Une autre remarque que j'ai à faire ici c'est que, quand les sphères attractives ont fait leur apparition, les gros grains achromatiques de l'ancienne membrane achromatique des pronucleus, et probablement aussi les granules plus fins du contenu achromatique des pronucleus se rangent en lignes régulières, convergentes vers les centres de la figure dicentrique. Us constituent des lignes méridiennes à la snr&ce de la masse claire des pronucleus. Celle-ci est déprimée au contact des sphères attractives (pi. XlXfer, fig. 3 et 6).

Un mot d'historique sur les éléments achromatiques que je viens de décrire.

Le fuseau achromatique est très-apparent dans les œufs de beaucoup d'animaux et aussi dans les cellules végétales. Au début des recherches modernes sur la division cellulaire (Biitschli, Strasburger) l'on a cru que le fuseau constituait la partie essentielle du noyau en voie de division. Bûtschli et

Strasburger lui ont donué le nom de fuseau nucléaire^ Kemspinddy et, à leurs yeux, cette dénomination était à peu près synonyme de noyau en voie de division. La figure chromatique est par contre, dans beaucoup de ces cas, moins apparente. Avant l'emploi des matières colorantes Ton considérait les éléments chromatiques comme des portions différenciées du fuseau nucléaii*e et Strasburger donna à l'ensemble des éléments chromatiques, réunis en un disque équatorial, le nom de plaque nucléaire, Kemplatte.

C'est Mayzel le premier qui découvrit le fuseau nucléaire dans les cellules constitutives des tissus des animaux supérieurs (Endothelium de la face postérieure de la cornée de la grenouille). Après l'avoir d'abord cherché en vain, Flemming finit par le trouver dans les cellules en division des tissus de la salamandre. Mais dans l'esprit de quelques histologistes modernes régnent encore quelques doutes sur la généralité de son existence et, dans un travail récent, Pfitzner, en parlant du fuseau, s'exprime ainsi : " Dass sic nicJits PrinidreSy iiberJiaupt fùchts fiir den TJieilungsprocess wesenûiclies darsieUen k'ônnen, heweise wold sclion die Unsdieinharkeit und Liconstam der achromaUsdien Figuren. „ C'est avec raison, à mon avis, que Flemming s'élève contre cette manière de voir et qu'il soutient l'importance du fuseau achromatique et Tuniversalité de sa présence dans les noyaux en voie de division. Je ne puis que me rallier complètement à l'argumentation sur laquelle il fonde sa manière de voir.

Mais les résultats de mes recherches diffèrent de celles de mes devanciers en ce que tous admettent l'existence d'un fuseau complet, c'est-à-dire de fibrilles achi*omatiques reliant entre eux les deux pôles de la figure dicentrique. Je pense, au contraire, que le fuseau est incomplet : il se constitue de deux moitiés coniques indépendantes, dont les bases répondent au disque équatorial; les fibrilles s'y insèrent aux éléments chromatiques, et, au lieu d'un fuseau proprement dit, je ne trouve, chez l'ascaride du cheval, que des cônes fibrillaires. Au stade caractérisé pai* la présence d'un disque éciuatorial

Tous les œufe montrent, au stade que nous considérons, des indices plus ou moins accusés de ces saillies superficielles qui pai'aissent résulter de ce que chaque centre d'attraction n'exerce son influence que sur une portion limitée du vitellos; il reste, entre ces portions dites polaires, une zone intermédiaii-e que j'ai appelée la zone équatoriale. (Voir les fig. 3 à 7 de la pi. XlXtet'. Les contours ont été exactement dessinés à la chambre claire, au 1/12 Imm. homogène de Zeiss, et, autant que possible, les dimensions des détails ont été également prises à la chambre claire.)

J'ai constaté des faits du même ordre dans l'étude que j'ai entreprise, il y a deux ans déjà, de la spermatogénèse chez l'ascaris du cheval. La planche XIXter (fig. 16 et 17) représente deux stades de la division d'une spermatogonie.

Flemming distingue la phase stellaire de celle qui se caractérise par l'arrangement des anses en deux groupes parallèles, de façon à former ensemble une plaque équatoriale. Au stade stellaire il a observé, sur le vivant, des mouvements alternatifs d'écartement et de rapprochement des anses vers le plan équatorial de la figure. H avait proposé de désigner ces expansions et ces rétractions alternatives de l'ensemble des anses sous le nom de diastoles et de sjrstoles ; mais dans son dernier ouvrage il abandonne ces dénominar tions. Ces mouvements Retzius ne les a pas observés chez les tritons. Il me parait peu probable qu'ils se produisent dans le cas de l'ascaride du cheval, avec le caractère que Flemming leur a constaté chez la salamandi-e.

Je ne pense donc pas que ces mouvements, en tant qa'altemativement diastoliques et systoliques, présentent aucune importance principielle. Le résultat à obtenir c'est un arrangement tel des anses que les entrecroisements et les superpositions soient évités, afin de rendre possible le cheminement ultérieur des anses secondaires vere les pôles. Le caractère des déplacements qui se produisent, pour amener cet arrangement varient probablement suivant les cas, et avant tout d'après le degi-é de complication de la figure et le nombre

des anses. Très souvent, chez l'ascaride du cheval, dès le moment où la fragmentation du cordon chromatique se produit dans chacun des pronucleus, les anses occupent la position voulue; elles se trouvent juxtaposées, sans se croiser, dans un même plan (pi. XlXbis, fig. 15).

En même temps leur dédoublement commence, les disques sabéquatoriaux, formant encore ensemble la plaque équatoriale se constituent ; les sphères attractives ont fait leur apparition et bientôt l'écartement des anses secondaires commence. Le dédoublement et par conséquent la formation des deux disques sabéquatoriaux sont une seule et même chose et l'un et l'autre phénomène s'accomplissent dès que la disposition stellaii'e des anses primaires se trouve réalisée.

Je guis loin de vouloir contester l'utilité des divisions établies par Flemming pour l'analyse de la succession des phénomènes dans certa.ins cellules, où le nombre des anses, comme chez la salamandre, par exemple, donne lieu à des figures très complexes. Mais il ne s agit là que de coupes établies pour faciliter la description et fixer plus exactement la succession des phénomènes. L'avantage qu'il peut y avoir, dans certains cas, à établir un plus gi-and nombre de ces coupes peut devenir une difficulté dans d'autres conditions. Si je crois inutile d'adopter, en ce qui concerne Tascaride du cheval, deux phases distinctes dans l'ensemble des phénomènes que je rattache à une seule et même période de l'histoire de la division, je n'en suis pas moins en complet accord avec Flemming, en ce qui concerne la succession des événements. C'est à lui que restera le mérite d'avoir analysé les phénomènes complexes dont il s'agit et d'avoir reconnu lem* filiation. Les coupes qu'il a établies, dans l'histoire de la division indii-ecte, n'ont pas été sans exercer une heui'euse influence sur la clarté et la précision de l'admirable exposition qu'il en a faite.

3>ne STADE. — Ecax*tement des anses secondaires; forme étoilée des noyaux filles; Dyaster de Flemming.

l'' Figure chromatique. — Les disques subéquatoriaux formés par les aiises secondaires s'écartent l'un de l'autre et en même temps chacun d'eux s'infléchit de façon & donner lieu à une lame incuiTée tournant sa convexité vers le pôle, sa concavité vei's le plan équatorial. Ceci résulte simplement de ce que, dans chacune des anciennes anses primaires, l'écartement des anses secondaires progresse moins rapidement aux extrémités des cordons, où les deux anses secondaires congénères restent encore unies, alora qu'elles sont déjà assez éloignées Tune de Tauti-e dans la plus gi-ande partie de leur longueur et surtout à leui' milieu. Mais on reconnaît que, pendant cet écartement, les anses secondaires jumelles sont encore reliées entre elles par la lame intermédiaire qui s'allonge progressivement. L'on remarque, en effet, dans toutes les images comme celles que j'ai figm-ées planche XlXfer, fig. 6, 7, 8 et 9, que l'espace compris entre deux anses secondaires est occupé par une substance relativement sombre et chromophile, mais se colorant de moins en moins au fur et à mesure que l'écartement progresse. Cet espace, d'abord lenticulaire ou discoïde (fig. 6 et 7), devient bientôt ovoïde, ou, plus exactement, doliforme (fig. 8 et 9). L'ovoïde, à grand axe transversal, est aplati, suivant ses faces perpendiculairement à son petit axe (fig. 8 et 9). Cet applatissement s'accuse davantage encore plus tard : les faces applaties deviennent même légèrement concaves (fig. 9 et surtout fig. 10).

U existe manifestement au début, dans chaque dû^que subéquatorial, quatre anses secondaires et par conséquent huit branches divergentes, chaque anse présentant deux de ces branches (fig. 7). Les convexités des anses sont dirigées vera l'axe de la figure et, par conséquent, vei's les sphères attractives; les bouts, au contraire, inclinent vers l'équateur, où les deux anses jumelles adhérent encore entre elles (fig. 6). De là le dyaster. Quand l'espace interposé entre les deux

REGUERCUES SIR LA FÉ(:0.NDAT10>. 341

plans sabéqnatoriaux. de lenticulaire qu'il était devient doliforme, les extrémités des anses décrivent, suivant les faces latérales du tonneau, des sortes de méridiens et Ton consUite bientôt; suivant Téquateur, une discontinuité dans la substance chromatique de ces méridiens (fig. 8 et 9). Cette discontinuité s'établit, tantôt plus tôt, tantôt plus tanl.

Les phénomènes de la division nucléaire s'accomplissent exactement suivant le même processus dans les sphères de segmentation. J'ai représenté (pi. XlXter, fig. 15) un œuf en voie de se diviser en quatre blastomères. Dans l'un des segments en voie de division Ton distingue nettement le tonnean : chacun des méridiens se constitue de deux demi anses jumelles; mais l'inteniiption ne s'est pas encore faite suivant l'équateur de la figure. De là probablement la hauteur plus grande du tonneau et son peu de largeur (comparer les fig. 15, 8 et 9). La sépai*ation complète des anses jumelles est id retardée; mais elle s'ai^complit dans les blastomères exactement d'après le même processus que je vais décrire pour l'œuf en voie de division.

La rupture entre les extrémités d'abord continues de deux anses jumelles ne se fait pas par une section réelle. Quand déjà il y a manifestement discontinuité chromatique entre les ^m^ secondaires, l'on peut constater positivement que les lltSmaT des anses chromatiques subéquatoriales sont encore reliées entre elles pas des filaments achromatiques moniliformes, plus tenus que les filaments chromatiques dont ils sont la continuation (fig. 8 et 9). Ces filaments doivent être bien distingués des fibrilles achromatiques qui partent des pôles. Gomme le montent les figures 8 et 9 elles ne se trouvent nullement dans la prolongation de ces dernières et elles présentent d'autres caractères. H s'agit encore une fois ici d'un stroma achromatique abandonné pai* la chromatine, d'après on processus en tout semblable à celui qui se produit quand, an stade de pelotonement, le cordon chromatique se divise en deux anses.

Je donnerai à ces filaments achromatiques, que l'on a con-

fondus avec les fibrilles achromatiques du fuseau, le nom de iilameiits rmnissanU.

Plus le développement progresse, plus ces filaments s'allongent. Quand déjà les noyaux filles se trouvent constitués, on les voit toujours décrire des lignes méridiennes à la surface de la substance claire qui remplit l'espace inteimédiaire et relier entre eux les deux noyaux filles (pi. XlXfer, fig. 10 et 11). Ces filaments constituent probablement des bordures aux lames intermédiaires, qui répondent à l'espace interposé entre les deux noyaux filles. Cet espace s'aggrandit graduellement et devient très étendu.

Dans des sphères de segmentation j'ai observé parfois une répartition très inégale de la substance chromatique le long des méridiens de la figure doliforme. Les globules chromatiques qui constituent les cordons secondaires sont de volume éminemment variable et sont très inégalement distribués le long de ces méridiens (stades semblables à celui que j'ai représenté fig. 15). C'est au voisinage de l'^équateur surtout que les filaments deviennent achromatiques et qu'ils engendrent les filaments réunissants ; mais en d'autres points, plus ou moins rapprochés des faces terminales du tonneau, s'observent aussi des iiitenniptions dans la substance chromatique : si l'on suit un même méridien, d'un pôle à l'autre, on le yoit dans le cours de sa longueur changer plusieurs fois de caractères. De chromatique il revient achromatique; puis de nouveau se voit un segment vivement coloré, auquel succède encore une portion incolore. Ça et là il est impossible de dire si le cordon moniliforme est chromatique ou non; les grains sont d'autant plus nettement chromatiques qu'ils sont pins gros. De même qu'il y a, dans un même méridien, de grandes variations dans les caractères du filament qui le constitue, de même le caractère chromatique des cordons voisins est plus ou moins accusé, suivant leur épaisseur qui est très sujette à variations (pi. XlXfer, fig. 15).

Tous ces faits démontrent une fois de plus que les cordons chromatiques possèdent une charpente achromatique et que

ce stroma, momentanément imbibé d'une substance avide de cannin peut abandonner cette substance cliromophile. Celle-ci peut se déplacer de proche en proche le long d'un semblable filament achromatique.

H ressort de ce qui précède que le nombre des anses secondaires, dans chaque plan subéquatorial est de quatre; il ne devrait donc y avoîi', dans la figui-e doliforme, que huit méridiens. Or, on constate fréquemment que le nombre des cordons chromatiques et des filaments réunissants à direction méridienne est plus considérable. Ce nombre est souvent difficile à déterminer; mais il m'a pani être, dans cei1:ains cas, double ou à peu près double de ce qu'il devinait être, si l'on s'en rapporte aux premiei-s stades : il est de seize environ. Je n'ai pu découviîr, d'une façon positive, la cause de cette multiplication des méridiens. Je soupçonne qu'ils peuvent se diviser longitudinalement en deux cordons parallèles. Je n'ai pu acquérir une certitude complète à ce sujet; mais mon opinion se fonde sui* deux faits : le premier c'est que, dans la plupart des œufs arrivés à un stade intermédiaire entre les figures 9 et 10, les filaments chromatiques méridiens sont beaucoup plus gi'èles qu'au début de la formation des disques subéquatoriaux. Us sont toujours, comme à tous les stades précédents, manifestement moniliformes; mais les grains sont plus petits. Le second, c'est que dans quelques tonneaux j'ai observé des couples de cordons adjacents, ou courant au voisinage Tun de l'autre, paifaîtement identiques l'un à l'autre. Les variations dans la dhection souvent un peu sinueuse des cordons, dans le volume des globules chromatiques, dans l'épaisseur du filament et dans son affinité pour les matières colorantes se reproduisent identiques dans les deux cordons accouplés.

2® Figure dkentnque, — Les sphèi-es attractives, le double cône (fuseau) achi'omatique et les radiations polaires présentent les mêmes caractères qu'au stade précédent. L'ancîemie limite de la masse achromatique des pronucleus tend à dis- \ paraître. Je n'en ai plus trouvé aucune trace au stade repré-

contoui- achromatique du noyau futur par la masse chromatique ; celle-ci gonfle, à la façon d'une éponge, au moment où elle s'imbibe. La membrane achromatique s'imprègne à la fin de substance chromatique et dès lors elle acquiert les propriétés chromatiques que manifestent les contours des noyaux des blastomères arrivés à leur complet développement. Ces noyaux se montrent constitués exactement comme les pronucleus anîvés à maturité.

Les figures 10 à 13 montrent divers stades de cette édification des noyaux filles. Les gros globules chromatiques se résolvent en un grand nombre de filaments et de petits globules, smtout nombreux aux entrecroisements des filaments qui les réunissent entre eux; ceux-ci deviennent les côtés de polyèdres de plus en plus volumineux. Dans la figure 13 l'envahissement de l'espace achromatique par la charpente chromatique réticulée est encore incomplet.

L'on constate fréquemment, aux stades représentés figures 12 et 13, que la charpente chromatique du jeune noyau se montre constituée d'une portion principale, centrale, et d'une portion accessoire^ formant un bourrelet marginal plus ou moins séparé de la première. Je pense que la masse principale provient de la transformation progi'essive du disque chromatique proprement dit, tandis que les restes des méridiens chromatiques donnent lieu à la formation du bourrelet marginal; celui-ci est peut-être constitué de plusieurs lobes. En certains points de ce bourrelet on observe un passage insensible de la charpente chromatique à la charpente achromatique du noyau, tandis que la masse centrale est toiqours délimitée par une couche cliromatique continue, (fig. 13) comme c'est aussi le cas lors de la maturation des pronucleus.

Un fait important, qui ressort clairement de l'examen comparatif des figures 10 à 13, c'est que les sphères attractives ne prennent pas une part directe à la formation deai noyaux. Elles restent constamment en dehors du noyau, diminuent de volume et, au stade représenté figure 13, non-seulement elles sont devenues plus petites, mais aussi beaucoup

moins distinctes. Des fibrilles achromatiques du fuseau, seules les parties qui se trouvent en dehors des sphères attrac-' tîves interviennent dans l'édification de la charpente achromatique des noyaux. Celle-ci se trouve souvent déprimée par la sphère attractive et cette dépression retentit souvent dans la forme de la cha^-pente chromatique. C'est là probablement la cause des éclfeiicrufea/ polaires des jeunes noyaux, signalées par Retzius.

Le corps du tonneau délimité extérieurement par les méridiens achromatiques, que j'ai appelés filaments rémiissants, augmente progressivement de volume ; il se développe surtout dans le sens transversal (fig. 10 et 11).

En même temps la zone équatoriale s'étrangle à son milieu et donne lieu à la formation d'un sillon circulaire transversal qui, au début, s'accuse un peu plus d'un côté de l'œuf que de l'autre. Ce fait a déjà été constaté par Plemming, en ce qui concerne les cellules des tissus de la salamandre. Le sillon transversal gagne en profondeur; il atteint bientôt les limites de l'ancien espace intermédiaire développé en largeur. La formation du sillon équatorial commence donc bien avant que les jeunes noyaux soient complètement édifiés.

Avant que le sillon se creuse et qu'un angle rentrant bien marqué se montre, à la coupe optique de l'œuf, trois lignes transversales, peu écartées l'une de l'autre et parallèles entre elles ont apparu dans toute la largeur de ToBof. La ligne moyenne se trouve dans la prolongation de l'angle rentrant qui répond au sillon dont nous avons signalé plus haut l'apparition (fig. 10). L'examen comparatif des figures 10, 11, 12 et 13 montre clairement que ces lignes marquent les limites optiques de deux plaques adjacentes qui deviennent de plus en plus distinctes. Le plan d'accolement des deux plaques, c'est le plan de séparation des deux blastomères. La division s'accomplit donc par un double processus : un phénomène d'éti-anglement progressif, qui n'atteint que la portion corticale du vitellus, et un processus de différenciation dans l'épaisseur de la masse d'origine nucléaire que j'ai appelée

348 EDOUARD VAN BEISEDEN.

la substance intermédiaire. Les deux plaques, qui dans leur ensemble répondent à la plaque celhdaire (ZeUplatte) de Strasburger, se font remarquer par leur homogénéité; elles sont un peu plus réfringentes que le reste du vitellus et se teintent un peu plus fortement en rose par le carmin. La masse intermédiaire et les filaments réunissants, qui se rendent aux plaques, se confondent peu à peu avec le protoplasme cellulaire. Les deux moitiés de la plaque cellulaire se continuent avec le contour externe du vitellus.

La forme particulière que présentent les blastomères, pendant leur séparation, déjà bien accusée au stade représenté figure 11, est des plus intéressantes, en ce qu'elle reflète bien la composition si particulière de la cellule. Nous devons y distinguer une portion polaire, qui a son centre dans la sphèi'e attractive, et une portion corticale, recouvrant la première à la façon d'une calotte, du côté dirigé vers l'équateur. Le noyau se trouve à la limite entre les deux parties de la cellule ; mais il proémine dans la portion polaire.

Je ne puis m'empêcher de signaler la ressemblance qui existe alors entre un blastomère et un œuf ovarien, tel que je Tai décrit plus haut. L'on trouve la même constitution dans les spermatogonies en voie de division (pi. XlXfer, fig. 16 et 17) et même dans les zoospermes utérins.

Il est clair, d'après cela, qu'un blastomère, qui n'est en définitive qu'une cellule ordinaire, présente un axe de stmcture comme un œuf et un zoosperme ; que les pôles de cet axe sont de valeur inégale et que le véritable centre dynamique de la cellule ne siège pas dans le noyau, mais dans la sphère attractive qui finit pas disparaître. Cela explique pourquoi les radiations du protoplasme ovulaû*e ne sont psus dirigées vers la vésicule germinative.

D semble ressortir aussi de l'exposé que je viens de fsdre, que [les fibrilles du soit disant fuseau nucléaire ne sont que des rayons stellaires, qui se fixent aux anses chromatiques et tirent vers les sphères attractives les anses secondaires; ils se raccourcissent progressivement. J'ai cité dans le cours de ce

travail plusieurs faits qui tendent à prouver que les fibrilles protoplasmiques sont douées de contractilité (Voir, pi. XV, fig. 3 et 4, la déformation des zoospermes aux points d'insertion des filaments).

Les phénomènes successifs de la division cellulaire peuvent à mon avis, être divisés en deux périodes. V Pendant la première il se produit, tant dans le corps protoplasmique que dans le noyau de la cellule, des modifications qui paraissent être préalables à Tapparition, dans la cellule-mère, de deux centres attractif distincts. Ces changements ne sont pas déterminés par ces centres, mais, au contraire, déterminent leur formation. Le protoplasme montre des modifications dans sa réfringence, dans son aspect, dans son afKnité pour les matières colorantes; peut-être, comme le pense Flemming, le protoplasme se divise-t-il en une couche corticale et une masse médullaire. Dans le noyau s'accomplissent tous les changements préalables & la formation de l'étoile équatoriale.

Cette période se termine par l'apparition dans le protoplasme de deux centres dynamiques et, dans le noyau, de la plaque équatoriale.

Dans la seconde période tous les phénomènes que Ton observe paraissent dépendre de l'action attractive des deux centres dynamiques. Le vitellus se décompose en deux sphères polaires et en une zone équatoriale; celle-ci se dédouble plus tard en deux calottes corticales. Les deux moitiés de la plaque cellulaire sont des produits de différenciation de ces calottes, dans les limites de Tancien noyau. Les éléments du disque éqnatorial se dédoublent et donnent lieu k la formation de deux charpentes chromatiques distinctes.

Toute la série des phénomènes qui se produisent lors de la division de la première cellule embryonnaire, pounne de deux pronucleus se reproduit identiquement la même et dans le même ordre, quand les deux blastomères se divisent en quatre (fig. 14 et 15) et quand leurs dérivés se segmentent à leur tour en huit cellules. Je n'ai pas étudié les segmentations

\.''f'rif*nr^. lj\ '*^'i> i:#:r ■:?.•>• '.'-tsT zitr les phéiii>mèiies qui * *i^Virup-..'"«>tir^.': Lils Ir?» irtîu çr.Qaîlras. j<:>a^uit ehaciin le r'.i»* -J'iTi îrTT.i ::«.7^;i- ^ lâMtrîi*. -iiAziti il s'agit d'un blastôT;'>r^. ^^n> Tir* ri'j^iu '■j:.'.i-r.

^^r:^«■,^K Xi'ij'^n i^nr;-!: r-iiï.'saL.'ir à lai ^jù non pas à denx xusiiA a rjrwfrr aniîT* 'tLr.niAaiTifrî. La ilivision des deux prerrii^rn M-i.-r.ornrr*=:> ne :•♦: tiiî: pa.^ simultanément: on les trouve f/»TiJonn à f!^ stades ■liff^renta de la division. Il en est de xuhuH rilf^riearfrment.

J'ne riemière obi^n'ation. Le set^ond globole polaire occape, r^rUf.ivHjnf!Tit à l'axe de la figure «licentrique. des positions trf^M diverses. Ijh plos souvent on le trouve au voisinage de Trine de?* extrémités de l'axe: (pi. XYS^ter, fig. 1, 2, 3. 5, 6, 7, 1 Oj; qnelquefoLs dans le plan équatorial (fig. 4 et 9); d'autres foin dans une position intermédiaire (fig. 11, 13 et 14). (Thange- \A\ activement ou [massivement de position, ou bien reste-t-il fIxA an même point de la surface du vitellus et la direction (Im Taxe des figures karyokinétiques est elle indifférente relat.iv<^iri<'iit k la i)osition qu'occupait la vésicule germinative d^vi-iiiir, Hiiperflcielle? .Je ne puis répondre à ces questions. Mais il me parait plus probable que le globule polaire change dn pliM'f^ ; p(Mit-être est il entraîné, lors de Tenveloppement de rii<''inisplH'T«< inférieur de Tœuf, par la couche plus dense qui iail H011 apparition, sous la forme d'une calotte, à la périphérie di^ rhéiinsph<>ro supérieur. Auerbacli a constaté que, chez .1. iwumimtUt et chez Strongyhis auriadaris, le premier plan do si^^mtMitation est t^oi^jours peii)endiculaire à Taxe de Fœof dont lo globule polaire occupe un des pôles.

Monnnin^ a distinfrné.dans Thistoire de la division indirecte, on oxrinant la pha^' initiale et la phase terminale, le noyan mutoriud raraot^Visé par son réseau chromatique et le noyaa tillf^ oonstitm^ do la mome manière, les cinq phases suivantes :